الكالسيوم هو رسول في كل مكان في الجهاز العصبي ، وضرورية لتحريك الافراج العصبي والتغييرات في قوة متشابك. هنا نظهر تقنية لتحميل كا 2 + – المؤشرات في محطات العصب ذبابة الفاكهة. نظهر أيضا تصنيع أجهزة المطلوبة ، والتأكيد على النقاط الحرجة للنجاح في هذه التقنية.
Abstract
الكالسيوم يلعب أدوارا عدة في الجهاز العصبي ولكن لا شيء أكثر إثارة للإعجاب من حيث الزناد لاطلاق سراح العصبي ، ولا شيء أكثر عمقا من أن رسول ضروري ليونة متشابك التي تدعم التعلم والذاكرة لمزيد من توضيح الأسس الجزيئية للكا 2 + التي تعتمد على آليات متشابك ، لا بد من نموذج النظام على حد سواء ليونة وراثيا ويمكن الوصول إليها من الناحية الفسيولوجية. ذبابة الفاكهة السوداء البطن يوفر مثل هذا النموذج. في هذا النظام ، وراثيا ترميز الفلورسنت المؤشرات المتوفرة لكشف كا 2 + التغيرات في المحطات الطرفية العصبية. ومع ذلك ، فقد تقتصر هذه المؤشرات حساسية للكا 2 + وغالبا ما تظهر استجابة غير خطية. تتلاءم بشكل أفضل المؤشرات لقياس الفلورسنت الاصطناعية كا السريع 2 + التغييرات المرتبطة بالنشاط العصبية. هنا نظهر تقنية لتحميل ديكستران – مترافق الاصطناعية كا 2 + المؤشرات في محطات العصب يرقات ذبابة الفاكهة تعيش في. هناك تركيز خاص على تلك الجوانب من البروتوكول الأكثر أهمية لنجاح هذه التقنية ، مثل كيفية تجنب التصريف الكهرباء الساكنة على طول الأعصاب معزولة ، والحفاظ على الصحة من إعداد أثناء فترات تحميل طويلة ، وضمان بقاء محور عصبي من خلال توفير كا 2 + لتعزيز ختم النهايات محوار مقطوعة. انخفاض تقارب ديكستران – مترافق كا 2 + ، المؤشرات ، مثل fluo – 4 وrhod ، التي تتوفر تظهر إشارة إلى ارتفاع نسبة الضوضاء في حين تعطيل الحد الأدنى من الكالسيوم قبل المشبكي 2 + الديناميات. ديكستران – اقتران يساعد على منع كا 2 + يجري عزلها المؤشرات في عضيات مثل الميتوكوندريا. ويمكن تطبيق هذه التقنية على حد سواء لتحميل الأجنة واليرقات والبالغين.
Protocol
حدد طبق تشريح النظيفة التي لم تتعرض إلى أي مثبتات. تشريح يتجول 3 يرقة ذبابة الفاكهة الثالثة في طور مرحلي متوسطة ذبابة الفاكهة التي تحتوي على الكالسيوم شنايدر 2 + و L – الجلوتامين ، (لا قطع الأعصاب أو أي ألياف الع?…