我们描述了一个快速的方法分离和培养的海马和皮层神经细胞从老鼠胚胎。该协议允许在几乎纯神经细胞需要我们进行实验。
我们描述了一个快速的方法分离和培养E15-17大鼠胚胎海马或皮层神经元。程序可以成功地应用于老鼠和人类的初级神经元和神经祖细胞的分离。分离神经元无血清培养基均保持在几个星期。这些文化可用于核转染,免疫细胞化学,核酸制备,以及电。年老的神经细胞,也可以慢病毒转导效率,有效地减少,磷酸钙或脂质的方法,如脂质体转染。
大鼠海马和皮层神经元的解剖和文化在这里介绍的方法,允许使用在化学上定义的介质( 图3)增长了近纯神经细胞进行实验。虽然近纯无血清培养基中培养神经元的协议已先前所述的2,3,4,也有我们的方法中作出了重要的变化。不同于传统的协议(即银行家等)5,我们已取代TrypLE快速,更温和的分解酶胰蛋白酶。我们也省略了两个步骤,这可能会影响神经细胞的完?…
The authors have nothing to disclose.
我们感谢社论援助乔娜埃利斯。项目描述奖号码R01MH079751(主持人:F.佩鲁齐)从国家心理健康研究所的支持。内容完全是作者的责任,并不代表国家精神卫生研究所或国立卫生研究院的官方意见。
Table I. Neurobasal/B27 complete medium.
Table II. Dissection medium.
Table III. 50x Counting solution.
Table IV. Specific reagents.
Table V. Specific equipment.