وصفنا 1<em> خارج الحي عدوى</em> نموذج لرؤية التفاعلات المباشرة من مسببات الأمراض البكتيرية مع خلايا قناة فالوب. وقد تم تأسيسها في الأنسجة الجهاز كله نموذج للتحقيق<em> C. الحثرية</em> علم الأمراض التي يسببها إلى قناة فالوب الإناث في ظل ظروف "الحياة مثل".
التهابات الجهاز التناسلي مع الكلاميديا (سي. الحثرية) هي الأكثر شيوعا التي تنتقل عن طريق الاتصال الجنسي مرض في النساء على مستوى العالم. قد التخليص غير فعال أو استمرار مسببات الأمراض تؤدي إلى الصعود التهابات الجهاز التناسلي العلوي ويفترض أن يسبب ضررا للالتهابات المزمنة إلى 1،2 الأنسجة المصابة. ونتيجة لذلك، قد عقابيل سريرية شديدة مثل مرض التهاب الحوض (PID)، الانسداد الأنبوبي والعقم تحدث 3،4.
معظم الأبحاث مع جيم وقد أجريت الحثرية في خطوط الخلايا الظهارية (مثل التهاب الكبد-2 الخلايا وهيلا 229) أو في الفئران. ومع ذلك، كما هو الحال مع خلية ثقافة النماذج القائمة، فإنها لا تعكس أيا من علم وظائف الأعضاء من الأنسجة الأصلية ولا الفيزيولوجيا المرضية من C. التهابات الجهاز التناسلي الحثرية في الجسم الحي 5. ونظرا للقيود مزيد من حقيقة أن أجهزة الطرد المركزي وسط إشارات (مثل الإنترفيرون γ mediatإد JAK / STAT مسار الإشارات) التي تتحكم في نمو الخلايا المتدثرة تختلف جوهريا بين الفئران والبشر 6،7. نحن وغيرنا وبالتالي، أنشأت كل نموذج هيئة قناة فالوب للتحقيق التفاعل المباشر بين C. الحثرية والبشرية فالوب السابقين خلايا الجسم الحي أنبوب 8،9.
لهذا الغرض، جمعت قناة فالوب الإنسان من النساء اللواتي خضعن لاستئصال الرحم والمصابين بفيروس C. الحثرية ضرب مصلي د. في غضون 24 ساعة إصابة آخر، عينة حيث حللت باستخدام المجهر الإلكتروني (SEM) والمجهر الإلكتروني انتقال (تيم) للكشف عن الكلاميديا تتوسط ضرر الظهارية، فضلا عن جيم الحثرية تشكيل إدراجها في نسيج فالوب.
تصور من العوامل المسببة للأمراض التي يسببها ضرر للأنسجة المصابة هي شاقة ومحدود في كثير من الأحيان إلى الإجراءات التجريبية في الفئران. أنشأنا وجود عدوى فيفو السابقين نموذج في قناة فالوب الإنسان لتحليل C. التهابات في المسالك الحثرية العلوي الأعضاء التناسلية للإناث. من خلال استخدام هذا الأسلوب، كنا قادرين على تصور C. الحثرية – الأضرار التي يسببها الإنسان لظهارة قناة فالوب خلال يوم واحد إصابة آخر. وكان تورم الخلوية وتحلل التغيرات المورفولوجية النموذجية التي لوحظت في C. الحثرية – قناة فالوب المصابة ولكن ليس في غير المصابة الضوابط. وكشفت التحليلات أن تيم متدثرات تطبيق نموذجي دورة تنموية داخل الخلايا داخل أنسجة المصابة، والتي تبين مشتملات كبير مع إعادة متباينة الهيئات الابتدائية ولكن أيضا أصغر الادراج مع الهيئات شبكي الموسعة التي قد تدل على استمرار. ومع ذلك، فإن الصورة الشكلية وحدها لا تكفي للتمييز بين النسخ المماثزيادة الالتهابات icating والمستمرة، التي تتميز بها عملية التمثيل الغذائي المنخفض ومقاومة مضادات الميكروبات 10.
تدمير الخلايا الطلائية في قناة فالوب المصابة هي إما بسبب تعطل C. الحثرية – الخلايا الظهارية المصابة بعد الانتهاء من دورة النمو داخل الخلايا وإطلاق الهيئات الابتدائية المعدية أو إطلاق سراح المؤيد للالتهابات السيتوكينات 8. العوامل المسببة للأمراض التي يسببها تلف الأنسجة والمضيف الناجم عن ردود فعل مناعية ضد C. ومن المفترض أن تكون الحثرية العوامل الرئيسية التي تؤدي إلى فقدان وظائف الخلايا الظهارية، وإعادة عرض الليفية والعقم الأنبوبي أخيرا 8،11 في الجسم الحي.
واحدة من القيود الرئيسية لهذا النموذج هو عدم وجود خلايا التهابية مما يعوق تحليل الآثار الثانوية للجيم الأولي عدوى الحثرية لظهارة قناة فالوب. ومع ذلك، فإن النموذج هو أبتكبده للتحقيق في ظروف بيئية مختلفة (على سبيل المثال محتوى الأكسجين) وأولي المضيف استجابة مناعية في جيم الحاد التهابات الحثرية 8،9. خطط أخرى هي لوضع نموذج لاختبار مضادات الميكروبات ضد C. الحثرية في أنابيب فالوب كامل الإنسان وإلى تميز الولايات التمثيل الغذائي من المراحل التنموية المختلفة التي لوحظت في ظهارة الأنبوبي بواسطة 2-فوتون ليزر المسح المجهري.
The authors have nothing to disclose.
وأيد هذا العمل من قبل الكتلة، DFG التميز "التهاب في واجهات" (RA-إذا، RA-D). ونحن ممتنون للمساعدة فنية ممتازة من Wischnat كريستين.
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
DMEM | PAA | E15-843 | |
RPMI | PAA | R15-802 | |
FCS | PAA | A15-101 | |
Cycloheximide | Sigma – Aldrich | ||
SPG Buffer | various | see recipe below | |
Monti’s fixative | various | see recipe below | |
sodium cacodylate buffer | various | see recipe below | |
Richardson’s stain | various | see recipe below |
Recipes:
1. SPG Buffer
2. 0.1 M sodium cacodylate buffer, pH 7.35.
3. Monti’s fixative
4. Richardson’s stain