Summary

쥐 Orthotopic 작은 창자 이식

Published: November 06, 2012
doi:

Summary

작은 창자 이식은 되돌릴 장 실패 환자에 대한 인정 치료 옵션이되었습니다. 쥐의 orthotopic 작은 창자 이식 우리의 실험 모델은 장 이식을 복잡하게 기본 immunologic과 염증 프로세스를 처리 할 수​​있는 신뢰할 수있는 도구로 제공하고 있습니다.

Abstract

작은 창자 이식은 비경 영양 짧은 창자 증후군과 실패 (돌이킬 수없는 장 실패) 환자에 대한 임상 승인 옵션이되고 있습니다. 전문 센터에서 수술을 향상과 생활 1,3의 높은 품질을 제공하는 동시에 관리 전략은 우수한 단기 및 중간 기간 환자와 이식 생존으로 이어 왔습니다. 다른 고체 기관의보다 일반적인 이식과 달리 (예 : 심장, 간) 장 이식에 의해 유도 그라프 트 기능과 immunologic의 변경의 여러 기본 메커니즘은 완전히 알려져 6,7 없습니다. 급성 거부, 패혈증 및 만성 이식 실패의 에피소드는 아직 덜 유리한 장기 성과에 기여하고 잠재적으로 이러한 이식의 혜택을받을 수 집 비경 영양에 대한 환자의 증가에도 불구하고 절차의보다 광범위한 고용을 방해 주요 장애물입니다. 소장을 포함여객 leucocytes의 큰 숫자가 일반적으로 내장 관련된 림프 시스템 (갈트) 장 이식의 높은 immunogenity 이유의이되는 부분의 일부라고. 이식 점막 무결성 (거절의 예를 들어) 손상되면 존재 속에서 많은 commensals과 병원균의 근접 패혈증 에피소드의 심각도를 설명합니다. 안정적이고 실현 가능한 동물 모델에서 생성 된 더 많은 장 및 multiorgan 이식 데이터의 필드를 이동하는 것은 필요합니다. 모델은 여기에 한 번 표준화 된 방식으로 설립 신뢰성과 타당성을 모두 결합하여 장 이식에 의해 실행되는 기본 복잡한 분자, 세포 및 기능 메커니즘에 중요한 통찰력을 제시 할 수 있습니다 제공됩니다. 우리는 성공적으로 우리의 실험실 8-11에서 5 년 이상 동안 사용 설명 절차를 수정했습니다. 주피터 동영상 기반 형식은 복잡한 proce을 설명 할 때 특히 유용합니다dure 및 장 이식을 조사 orthotopic 쥐 모델을 구축 할 계획 그룹에 대한 초기 함정을 피하십시오.

Protocol

1. 기부자 운영 기증 쥐 24 시간 (물 / 혈당 솔루션을 무료로 이용하실 수)에 금식 보관해야합니다. Isoflurane 흡입 마취를 유도하기 위해 표준 분무기에 2 %로 시작하고 개복술을 수행 한 후 1 % 줄일 수 있습니다. 진정 작용을 확인 발가락 핀치을 수행합니다. 복부를 면도하고 피부 시험을 치루 3 회 (Kodan)로 청소하십시오. 그런 다음 진통제의 피하 투여 후 중간 절개를 수행합니?…

Representative Results

일반 수술 과정 이식 동물은 약 ​​1 시간에 대한 열 램프 아래의 절차에서 신속하게 복구해야합니다. 저체온은 수술 사망률의 주요 원인이며, 신중하게 내부 및 postoperatively 피해야한다. Intraoperative 유체 손실 2.5 ML 정상적인 생리의 SC 주입 플러스 2.5 ML 포도당 5퍼센트 첫 24 시간마다 8 시간으로 대체해야합니다. 쥐도 postoperatively 첫​​ 24 시간에 포도당 용액 (또는 겔 다이어?…

Discussion

쥐의 장 이식 모델 1970ies 5로 일찍 설명되어 있지만 최근 고용 모델의 대부분은 다른 기술이 13을 사용하여 heterotopic 장 이식을 포함한다. 일반적으로 heterotopic 절차를 쉽게 microsurgical 기법과 평가를위한 이식을보다 쉽게​​ 접근 할 수있는 장점을 가지고 있지만, heterotopic 장 이식이 계정에 이식 된 작은 창자의 여러 상호 작용과 수축 활동 등의 기능 측면을 복용하지의 가장 큰 단…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) Bristol-Myers Squibb
Uro-Nebacetin N solution Nycomed 6967855
Ampicillin Ratiopharm
Carprofen (Rimadyl) Pfizer
Prolene 10-0 unresorbable suture Ethicon
Monocryl 6-0 resorbable suture Ethicon
Vicryl 3-0 resorbable suture Ethicon
i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm Braun
i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm Braun
Kodan Skin Prep Schülke
NaCl 0.9% Infusion solution Braun
Curved forceps small FineScienceTools 11009-13
Micro forceps curved AESCULAP BD 333
Micro forceps curved AESCULAP FD281R
Micro forceps straight 1 WPI 5
Micro forceps straight 2 WPI 2
Micro needle holder WPI 14081
Micro scissors FineScienceTools 15006-09
Micro scalpel MANI Ophthalmic knife
Micro clamps AESCULAP FB329R

References

  1. Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
  2. Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
  3. Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
  4. Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
  5. Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
  6. Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
  7. Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
  8. Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
  9. Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
  10. Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
  11. Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
  12. Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
  13. Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
  14. Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).

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Cite This Article
Kitamura, K., von Websky, M. W., Ohsawa, I., Jaffari, A., Pech, T. C., Vilz, T., Wehner, S., Uemoto, S., Kalff, J. C., Schaefer, N. Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (69), e4102, doi:10.3791/4102 (2012).

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