Orthotopic tynntarm Transplantasjon i rotter
Summary
Tynntarm transplantasjon har blitt en akseptert behandling for pasienter med irreversible intestinal svikt. Vår eksperimentell modell av orthotopic tynntarm transplantasjon i rotter fungerer som en pålitelig verktøy for å håndtere underliggende immunologisk og inflammatoriske prosesser som komplisere tarmtransplantasjon.
Abstract
Tynntarm transplantasjon har blitt en akseptert klinisk alternativ for pasienter med kort tarm syndrom og svikt i parenteral ernæring (irreversibel intestinal svikt). I spesialiserte sentre forbedret operativ og administrerende strategier har ført til utmerket kort og mellomlang sikt pasient og pode overlevelse samtidig som det gir høy livskvalitet 1,3. I motsetning til i de mer vanlige transplantasjon av andre faste organer (dvs. hjerte, lever) mange underliggende mekanismene organfunksjon og immunologiske forandringer indusert av tarmtransplantasjon er ikke helt kjent 6,7. Episoder med akutt avvisning, sepsis og kronisk graft svikt er de viktigste hindringene fortsatt bidrar til mindre gunstige langsiktige utfall og hindre en mer utbredt anvendelse av prosedyren tross et økende antall pasienter på hjemmebane parenteral ernæring som ville potensielt ha nytte av en slik transplantasjon. Tynntarmen inneholderet stort antall passasjer leucocytes ofte referert til som en del av tarmen forbundet lymfesystemet (GALT) dette blir en del av årsaken til det høye immunogenity av intestinal pode. Tilstedeværelsen og nærhet av mange commensals og patogener i tarmen forklarer alvorlighetsgraden av sepsis episoder gang pode mucosal integritet blir kompromittert (for eksempel ved avvisning). Å fremme feltet av intestinal-og multiorgan transplantasjon mer data generert fra pålitelige og gjennomførbare dyremodeller er nødvendig. Modellen gir her kombinerer både pålitelighet og gjennomførbarhet gang etablert på en standardisert måte og kan gi verdifull innsikt i de underliggende komplekse molekylære, cellulære og funksjonelle mekanismer som utløses av tarmtransplantasjon. Vi har med hell brukt og videreutviklet den beskrevne prosedyren over mer enn 5 år i vårt laboratorium 8-11. Den Jove video-basert format er spesielt nyttig for å demonstrere komplekse procedure og unngå innledende fallgruver for grupper som planlegger å etablere en orthotopic gnager modell etterforsker tarmtransplantasjon.
Protocol
Representative Results
Discussion
Mens intestinal transplantasjon modeller i rotter har blitt beskrevet så tidlig som i 1970ies 5 mest av de nylig ansatt modeller innebære heterotopiske tarmtransplantasjon ved hjelp av ulike teknikker 13. Mens heterotopiske prosedyrer generelt har fordelen av enklere mikrokirurgisk teknikk og lettere tilgjengelighet av graftet for vurdering, har heterotopiske tarmtransplantasjon den store ulempen ved ikke å ta hensyn til flere interaksjoner av det transplanterte tynntarmen og dets funksjonelle a…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| University of Wisconsin (UW) solution (ViaSpan) | Bristol-Myers Squibb | ||
| Uro-Nebacetin N solution | Nycomed | 6967855 | |
| Ampicillin | Ratiopharm | ||
| Carprofen (Rimadyl) | Pfizer | ||
| Prolene 10-0 unresorbable suture | Ethicon | ||
| Monocryl 6-0 resorbable suture | Ethicon | ||
| Vicryl 3-0 resorbable suture | Ethicon | ||
| i.v. Catheter G 20 1.1×33 mm | Braun | ||
| i.v. Catheter G 22 0.9×25 mm | Braun | ||
| Kodan Skin Prep | Schülke | ||
| NaCl 0.9% Infusion solution | Braun | ||
| Curved forceps small | FineScienceTools | 11009-13 | |
| Micro forceps curved | AESCULAP | BD 333 | |
| Micro forceps curved | AESCULAP | FD281R | |
| Micro forceps straight 1 | WPI | 5 | |
| Micro forceps straight 2 | WPI | 2 | |
| Micro needle holder | WPI | 14081 | |
| Micro scissors | FineScienceTools | 15006-09 | |
| Micro scalpel | MANI | Ophthalmic knife | |
| Micro clamps | AESCULAP | FB329R |
References
- Abu-Elmagd, K. M., et al. Five Hundred Intestinal and Multivisceral Transplantations at a Single Center: Major Advances With New Challenges. Ann. Surg. 250 (4), 567-56 (2009).
- Berney, T., et al. Portal versus systemic drainage of small bowel allografts: comparative assessment of survival, function, rejection, and bacterial translocation. J. Am. Coll. Surg. 195 (6), 804 (2002).
- Fishbein, T. M. Intestinal transplantation. N. Engl. J. Med. 361 (10), 998 (2009).
- Hernandez, F., et al. Is portal venous outflow better than systemic venous outflow in small bowel transplantation? Experimental study in syngeneic rats. J. Pediatr. Surg. 40 (2), 336 (2005).
- Monchik, G. J., Russell, P. S. Transplantation of small bowel in the rat: technical and immunological considerations. Surgery. 70 (5), 693 (1971).
- Murase, N., et al. Graft-versus-host disease after brown Norway-to-Lewis and Lewis-to-Brown Norway rat intestinal transplantation under FK506. Transplantation. 55 (1), 1 (1993).
- Murase, N., et al. Immunomodulation of intestinal transplant with allograft irradiation and simultaneous donor bone marrow infusion. Transplant Proc. 31 (1-2), 565 (1999).
- Pech, T., et al. Perioperative infliximab application ameliorates acute rejection associated inflammation after intestinal transplantation. Am. J. Transplant. 10 (11), 2431 (2010).
- Schaefer, N., et al. Resident macrophages are involved in intestinal transplantation-associated inflammation and motoric dysfunction of the graft muscularis. Am J Transplant. 7 (5), 1062 (2007).
- Schaefer, N., et al. Mechanism and impact of organ harvesting and ischemia-reperfusion injury within the graft muscularis in rat small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1821 (2006).
- Schaefer, N., et al. Acute rejection and the muscularis propria after intestinal transplantation: the alloresponse, inflammation, and smooth muscle function. Transplantation. 85 (10), 1465 (2008).
- Xue, L., et al. Surgical experience of refined 3-cuff technique for orthotopic small-bowel transplantation in rat: a report of 270 cases. Am. J. Surg. 198 (1), 110 (2009).
- Zhang, X. Q., et al. Simplified techniques in rat heterotopic small bowel transplantation. Transplant. Proc. 38 (6), 1840 (2006).
- Zhao, Y., et al. The establishment of a new en bloc combined liver-small bowel transplantation model in rats. Transplant. Proc. 39 (1), 278 (2007).
