Summary
Bu protokol mantar entomopatojenin tanıtmak için iki aşılama yöntemleri gösterilmektedir
Abstract
Beauveria bassiana'nın endophytically bitkileri kolonize etme yeteneğine sahip bir mantar entomopatojenin olduğunu. Bir endophyte, B. gibi bassiana herbivory ve hastalıktan bitkilerin korunmasında rol oynayabilir. Bu protokol B. kurmak için iki aşılama yöntemleri gösterilmektedir endofitik biyolojik kontrol daha sonraki değerlendirmeler için hazırlık sık fasulye (Phaseolus vulgaris), içinde endophytically bassiana. Bitkiler bir B. almadan önce iki hafta boyunca yüzeye sterilize tohumlardan yetiştirilen 10 8 Konidyumların / ml (veya su) bassiana tedavisi bir yapraktan sprey veya toprak ıslatma olarak da uygulanır. İki hafta sonra, bitkiler hasat edilir ve onların yaprakları, sapları ve kökleri endofitik fungal kolonizasyon değerlendirmek için numune alınır. Bunun için, numuneler ayrı ayrı birçok parçaya kesilir, sterilize yüzey ve 20 gün boyunca patates dekstroz agar ortamında bekletilen. Medya olarak mantar üremesi gözlemlemek 2-3 günde denetlenirbitki bölümleri ile sociated ve B. oluşumu kaydetmek bassiana onun endofitik kolonizasyon ölçüde tahmin etmek. Aşılama başarı analizleri B. oluşumu karşılaştırmak tedaviler ve kontroller arasında belirli bir bitki parçası içinde bassiana (yani yaprakları, sapları veya kökleri). Aşılama yöntem ek olarak, deney Belirli bir sonucu hedef mahsul türleri ya da farklı bağlı olabilir, mantar entomopatojenin tür zorlanma veya kullanılan ayırma ve bitki yetiştirme koşulları.
Introduction
Mantar Entomopatojenlerin mycopesticides 1 olarak önemli bir potansiyele sahip böcek populasyonları önemli düzenleyiciler vardır. Ancak son zamanlarda, ancak, mantar Entomopatojenlerin endophytes, hem de doğal ve çeşitli aşılama yöntemleri 2 yanıt olarak meydana gösterilmiştir. Endofitik mantar Entomopatojenlerin ve ekolojik işlevleri büyük ölçüde bilinmemektedir, ancak bazı çalışmalar bitki büyüme 3,4, otobur direnci 5-8 ve hastalık direnci 9,10 bunları koymaktadır. Burada sunulan yöntemlerin genel amacı endofitik biyolojik kontrolü müteakip değerlendirmeler için hazırlık, bir endophyte olarak bir mantar entomopatojenin tanıtmaktır.
Beauveria bassiana'nın (Balsamo) Vullemin (Ascomycota: Hypocreales) iyi okudu endofitik mantar entomopatojenin 5-9,11-19 olduğunu ve ticari mycopesticide olarak kullanılabilir. Aşılama yöntemleri kurmak için test
Ortak fasulye (Phaseolus vulgaris) zararlılara karşı en hassas bitkiler arasında yer alıyorve hastalıklar. Bu kimin krizi bölgelerde 28 genelinde en sınırlayıcı fasulye üretim faktörü olduğu düşünülmektedir 400'den fazla zararlıları ve 200 patojenler, etkilenebilir. Buna göre, ortak fasulye B. tarafından endofitik biyolojik kontrolün tam spektrum incelemek için mükemmel bir model kırpma olabilir bassiana. Bu yönde ilk adım olarak, bu makalede ortak fasulye bir endophyte olarak B.bassiana tanıtmak için aşılama yöntemleri gibi yapraktan sprey ve toprak drenches açıklar.
Protocol
1. Bitkiler
- Yüzey sterilize% 0.5 sodyum hipoklorit iki dakika ve% 70 etanol içinde iki dakika için onları daldırarak fasulye tohumları (cv. Calima). Steril distile su ile tohumların üç kez yıkayın.
- Patates dextroxe agar (PDA) medyada son durulama suyuna 100 ul kaplama ve 25, 10 gün boyunca plaka inkübe ederek sterilizasyon başarısının ° C Değerlendirin Herhangi bir büyüme plaka üzerinde görülen ise deney sonlandıralım ve yeniden başlatın.
- 2:1 oranında toprak ve kum steril bir karışımı içeren saksılara üçlü gruplar halinde tohum bitki. 25 bir büyüme odası ° C, ca için tencere aktarın. % 50 bağıl nem ve 12 saat fotoperiyodun. Bir hafta sonra çimlenme, en az iki kuvvetli fideleri ortadan kaldırır. Steril distile su ve NPK 15-15-15 gübre 6 g / L su çözeltisi ile dikimden sonra 10 ve 20 gün dölleme ile Su 2-3 günde.
2. Mantar
- Bir ticari edininBeauveria bassiana'nın suşu GHA (Mycotrol SE, Laverlam, Cali, Kolombiya) CIAL formülasyonu.
- Tek spor stok kültür oluşturmak için, ca askıya. bir 10 saniye için% 0.1 'lik su Triton-X-100 çözeltisi ve girdap 1 ml Konidyumların tam döngü inokülasyon. 25 de 24 saat süre ile% 2.5 agar ve inkübe Asil üzerinde süspansiyon daha sonra, levha 100 ul ° C. 100 mm levha içeren PDA içine tek bir çimlenme conidium aktarın ve tüm plaka (yaklaşık 3-4 hafta) kapsar kadar büyür.
- Steril koşullar altında, ortam yüzeyinden mantar büyüme kazımak ve 10 ml steril% 0.1 Triton-X-100 içinde askıya. Bir dakika vorteksleyin. Sonra, hif kaldırmak ve stok süspansiyon elde etmek için steril bir tülbentten geçirilerek süspansiyon filtre.
- Stok süspansiyon konidial konsantrasyonu tahmin etmek hemasitometre kullanın. Konidial sayımları kolaylaştırmak için, her seferinde 100 ul o aktarma, stok 10.000 kat seri dilüsyon hazırlamakf konidial% 0.1 Triton-X 100 900 ul süspansiyon ve sonraki seyreltme önce 10 saniye boyunca karıştırın.
- Inokulum üretmek için, aşağıdaki formül kullanılarak 10 8 konidya / ml 'lik bir nihai konsantrasyon için stok süspansiyon ayarlayın;
- 25 24 saat süreyle% 2.5 Noble Agar ve inkübe üzerinde 10.000 kat seyreltme konidial canlılığı, plaka 100 ul değerlendirmek ° C. Ardından, yüzde çimlenme tahmin etmek 100 Konidyumların üç rasgele grupları inceleyin. Çimlenmiş bir conidium düşünün zaman ondan conidium projelerin yarısından çapından daha görünür bir germ tüp artık. Ortalama yüzde çimlenme% 90 aştığında Sadece süspansiyonu kullanın.
3. Aşılama
- Onların ilk gerçek yaprak aşamasında (yaklaşık 14 gün ekimden sonra) ulaştığınızda bitkiler inoküle edin. Steril ile toprak kapasitesi Su bitkileri damıtmakaşılar önce ed su 24 saat.
- Yapraktan püskürtme yöntemi için, konidial süspansiyon (tedavi) veya% 0.1 Triton-X 100 (kontrol) yaprakların adaxial (üst) yüzeyine onlar doygunluk ulaşana kadar uygulamak için bir el atomizer kullanın. Toprağa konidial akış önlemek için alüminyum folyo ile pot üstüne örtün. Püskürtme sonra, fungal invazyon kolaylaştırılması nem yüksek düzeyde tutmak için 24 saat boyunca plastik bir torba ile bitkileri kapsamaktadır.
- Toprak ıslatma yöntemi için, konidial süspansiyon (tedavi), 10 ml ya da% 0.1 Triton-X 100 (kontrol) bitki tabanında toprak yüzeyine. Uygulamak için dereceli bir silindir kullanmak
- Aşılar sonra, tesadüf blokları deneme desenine onları düzenliyor büyüme odalarına bitkiler dönün. En az dört ilave deneysel bloklar aynı deney içinde, endofitik kolonizasyon değerlendirme ek olarak, bitki büyüme değerlendirilmesine izin verecek şekilde monte edilmelidir.
4. Evaluations
- Rastgele sırayla Blokların seçilmesi, bir anda deneme bir blok değerlendirin. Bu, tek bir gün değerlendirmeye edilemez büyük deneyler için özellikle önemlidir.
- Bir bitki işlemeden önce, ölçmek ve tabandan apikal meristem olan yüksekliği kaydedin. Sonra, dikkatle söküp ve akan musluk suyu iyice yıkayın.
- Her bitki, örnek itibaren iki bildiriler, kök iki parça ve kök iki adet. Bitkinin ilk gerçek yaprak rastgele broşür örnekleri seçin. Daha sonra, bitki ortasından ve toprak yüzeyine yakın bir mesafede, iki kök örnekleri, 3 cm uzunluğunda her elde edin. Son olarak, kök orta ve kök ucu arkasında 1 cm de 3 cm uzunluğunda, iki adet kazık kök örnekleri almak. Uygun üç ayrı kağıt torba ve etiket örnekleri yerleştirin.
- Bir blok içinde tüm bitkilerin yıkama ve örnekleme sonra, daha sonra, yaprak işleme göre kökleri başlangıç ve son olarak sapları.
- T sterilize YüzeyeYukarıda 1.1, gibi steril bir laminer akış kaputu konular. Steril distile suya göre her bir örnek üç kez durulayın ve steril havlu kağıt kurumalarını bekleyin. Sonra, teşrih ve endophytes dezenfektanları ile temas nedeniyle elimine edilmiştir nerede olabileceğini, dış kenarları atın.
- Sapları ve kökleri için yaprak ve 6 mm uzunluğundaki için 6x6 mm, ortalama altı bölüme kesilmiş numune kesin. Levha 2 mg / L her birinde antibiyotikler tetrasiklin, streptomisin ve penisilin ile desteklenmiş PDA besiyeri ile 60 mm Petri plaka üzerinde altı bölümden. Parafilm ile plaka mühürleyin ve 25 karanlıkta inkübe ° C Her bitki altı tabak, başına iki bitki parçasını verir.
- Belirli bir bitki parçasını her bloğunun işledikten sonra durulama suyunu değiştirin. Atılmadan önce kullanılan durulama suyu, plaka ° C sterilizasyon başarısının 25 az 10 gün PDA besiyeri ve inkübe üzerinde 100 mikrolitre numune değerlendirmek. Mantar üremesi ensues ise, analiz için gelen numune düşünmüyoruz.
- Fungal büyüme gözlemlemek ve kaydetmek için 20 gün boyunca plakaları 2-3 günde bir kontrol edin. Tüketim ve transfer bitki bölümleri taze PDA içeren tabak mantar endophytes varlığı sergiliyor. Bu orijinal plaka komşu bitki bölümleri kirlenmesini önlemek olacaktır.
- Rekor B. Bitki bölümlerden bassiana büyüme. Beauveria bassiana'nın karakteristik beyaz yoğun Miseller kenarında uçuk sarı krem haline tarafından tespit edilebilir. Şüphe, bir damla su olarak numune monte ve türün karakteristik küresel Konidyumların ve zikzak şekilli konidyoforlar, arıyor, bir mikroskop altında incelemek zaman.
- Bitki biyokütle tedavilerin etkisini değerlendirmek için ilave deneysel blokları kullanın. İlk olarak, taban apikal meristem üst bunların yüksekliği ölçülür. Sonra, dikkatle söküp ve musluk suyu tesisleri yıkama ve kuru ağırlığını belirlemek için üç gün boyunca 45 ° C'de kurumaya bırakın.
Representative Results
B. bassiana P. endophytically-kolonize başardı gösterdi aşılama tedavileri (Şekil 1) yanıt vulgaris. Yaprak spreyleri ve toprak drenches Hem B. tarafından endofitik kolonizasyonu sonuçlandı tedavi bitkilerin% 80'inden fazlasında bassiana (Şekil 2). Ancak, kolonizasyon ölçüde değerlendirilmiştir bitki parçası ve kullanılan aşılama yöntemi bağlıydı. Yapraklar sprey aşılar en yanıtladı. Kökler, diğer yandan, sadece ıslatma aşılar cevap verdi. Nihayet, sapları hem aşılama yöntemleri benzer şekilde yanıtladı. B. bassiana kontrolü bitki bölümlerden herhangi saptanmadı.
B. başka muamele, endophytes bağımsız olarak bassiana değerlendirilen bitki bölümlerin% 15 büyüdü, ancak komşu bölümleri istila ve sonuçlarını etkileyebilecek önce onlar medya plakalar üzerinden diseke edildi.
Tedavi ve kontrol bitkilerine iki hafta aşısından sonra gözle ayırt edilemez hale geldi. Hiçbir fark, kuru ağırlığının ve yüksekliği saptandı.
Şekil 1. Beauveria bassiana'nın tarafından fasulye bitkilerinin endofitik kolonizasyonu (. Phaseolus vulgaris cv Calima) üzerine aşılama tedavilerinin Temsilcisi sonuçları sol Üst:. Kontrolü yok büyüme ile plakalar. Sağ Üst: Tüm plağı kirleten bir bitki bölümünden Mantar endophyte. Alt sol: B. bassiana iki bitki bölümlerinden büyüyor. Sağ alt: Endofitik B. bassiana Konidyumların ve konidyoforlar gibi mikroskop altında görülebilir.
Şekil 2. Bea endofitik kolonizasyonu üzerine aşılama tedavilerinin Etkisisuşu GHA ile aşısından sonra Beauveria bassiana'nın iki hafta n bitkiler (Phaseolus vulgaris cv. Calima). Yüzde kolonizasyon kültürlü bölümlerin sayısına bölünmesiyle kolonize bitki bölümlerin sayısını temsil eder.
Discussion
Birçok faktör bir endophyte olarak bir mantar entomopatojenin kurmak için bir denemenin belirli sonucunu etkileyemez. Sonuçlarımız, aşılama yöntemi bunlardan biri olduğunu göstermektedir. Deneme Biyolojik faktörler bitki tür ve çeşidi seçilir ve mantar entomopatojenin türler gerilmesi içeren veya kullanılan izole. Manipülasyonu dikkate alınması gereken diğer faktörler inokulum konsantrasyon, aşılar için tesis yaşı ve bitki yetiştirme koşulları içerir.
Bir mantar entomopatojenin 14,17,18,21 tarafından sistemik bitki kolonizasyon neden bir aşılama yöntemi için ideal olacaktır. Bunun yerine, aşılama yöntemleri, yerel kolonizasyonu belirli bir desen tercih eğilimi belirir. Toprak drenches kökte kolonileşme 17, tercih ise kahve, örneğin, yaprak spreyi yaprak kolonizasyonu lehine. Biz ortak fasulye aynı desen bulundu. Sonuçta, inokülasyon yöntemi tercih edilmelidirmuhtemelen hedef otobur ya da bitki patojen niş eşleşen bir tesis içerisindeki endophyte amaçlanan yere göre yönlendirilmelidir.
Medya kültürünün esas almasına rağmen yaygın olarak kullanılan, endophyte tespiti ve ölçümü, pahalı zor ve hata eğilimli olabilir. Örneğin, 10.800 bitki bölümleri (1.800 Petri kapları üzerine ekildi) toplam B. optimize etmek için bir deney değerlendirildi muz 16 bassiana aşılar. Bunların dışında, 4.496 bölümleri varsayılan bir B. tarafından kolonize edildi bassiana'nın gibi başlıca koloni morfolojisi ile tanımlanır. Açıktır ki, her koloni için türlerinin mikroskobik doğrulama bir arzu ama kalkılamayacağını adım olurdu. Diğer taraftan, 1.176 bölümleri başka mantarlar tarafından kolonize edildi ve atılır ve veriler 16 eksik olarak tedavi edildi. Olasılığı o B. Bununla birlikte, mevcut bassiana fakir bir rakip ya da büyümek için daha yavaş oldu ve sonunda bu bölümleri ortaya olabilirdi eğerllowed yeterli zamanı. Bu nedenle, medya kültürünün esas endophyte algılama yöntemleri yanlış pozitif ve yanlış negatif tabidir. Buna göre, örneğin daha güvenilir bir şekilde tespiti ve ölçümü yöntemleri, gelişme polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) analizlerinin 20,21,24 dayalı olanlar da daha doğrulamıştır.
Inokülasyon deneyler için nihai hedef herbivory ve / veya hastalığa karşı dayanıklı sistemik direnç sağlar etkili bir tedavi geliştirmek olmalıdır. İnandırıcı bir, ama henüz denenmemiş, hipotez endofitik kolonizasyon ölçüde endophyte aracılı direnç derecesi ile pozitif korele gerektiğidir. Aşılama yöntemleri rafine sonra doğal bir sonraki adım, bu nedenle, bu korelasyon incelemek olabilir. Çeşitli Video protokolleri araştırmacılar bir hedef haşere ya da patojen 29-31 için uygun bir direnç testi tasarlamanıza yardımcı olabilir. Sonuçta, bu inokulum başarısını belirleyecek bu ne bir testtirtion, yöntem ve endofitik biyolojik kontrol için ilişkili olması muhtemel.
Disclosures
Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ederim.
Acknowledgments
Üretim ve deneysel çalışmalar burada Reynaldo Pareja en sadık ve coşkulu yardım yansıtmaktadır sundu. Kolombiya İdari Bilimler Bölümü, Teknoloji ve Yenilik (Colciencias) tarafından ve Bill & Büyük Zorluklar İncelemeler girişimiyle Melinda Gates Vakfı hibe tarafından finanse edilmiştir.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| REAGENTS | |||
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | |
| Mycotrol SE | Laverlam | 4167 | |
| Noble agar | Sigma | A5431-250G | |
| Penicillin G sodium salt | Sigma | P3032-25MU | |
| Petri dish (100 x 15 mm) | Fisher | 08-757-12 | |
| Petri dish (60 x 15 mm) | Fisher | 08-757-13A | |
| Potato dextrose agar | Difco | 213400 | |
| Regular bleach (NaOCl) | CLOROX | N/A | |
| Streptomycin sulfate salt | Sigma | S6501-25G | |
| Tetracycline | Sigma | T3258-25G | |
| Triple quince (NPK) | ABOCOL | N/A | |
| Triton X-100 | Sigma | X-100 | |
| EQUIPMENT | |||
| Biological safety cabinet | NuAire | NU-425-600 | |
| Hemocytometer | Fisher | 02-671-10 | |
| Leica DM LB microscope | Leica | N/A | |
References
- Vega, F. E., Meyling, N. V., Luangsa-ard, J. J., Blackwell, M. Fungal entomopathogens in Insect Pathology. Vega, F. E., Kaya, H. K. , Elsevier. San Diego. 171-220 (2012).
- Vega, F. E. Insect pathology and fungal endophytes. Journal of invertebrate pathology. 98, 277-279 (2008).
- Sasan, R. K., Bidochka, M. J. The insect-pathogenic fungus Metarhizium robertsii (Clavicipitaceae) is also an endophyte that stimulates plant root development. American journal of botany. 99, 101-107 (2012).
- Elena, G. J., Beatriz, P. J., Alejandro, P. Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorokin promotes growth and has endophytic activity in tomato plants. Advances in biological research. 5, 22-27 (2011).
- Bing, L. A., Lewis, L. C. Suppression of Ostrinia nubilalis (Hübner)(Lepidoptera: Pyralidae) by endophytic Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin. Environmental entomology. 20, 1207-1211 (1991).
- Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. Endophytic Beauveria bassiana in banana (Musa spp.) reduces banana weevil (Cosmopolites sordidus) fitness and damage. Crop protection. 27, 1437-1441 (2008).
- Gurulingappa, P., Sword, G. A., Murdoch, G., McGee, P. A. Colonization of crop plants by fungal entomopathogens and their effects on two insect pests when in planta. Biological. 55, 34-41 (2010).
- Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. Effect of endophytic Beauveria bassiana on populations of the banana weevil, Cosmopolites sordidus, and their damage in tissue-cultured banana plants. Entomologia experimentalis et applicata. 129, 157-165 (2008).
- Ownley, B. H., et al. Beauveria bassiana: Endophytic colonization and plant disease control. Journal of invertebrate pathology. 98, 267-270 (2008).
- Ownley, B. H., Gwinn, K. D., Vega, F. E. Endophytic fungal entomopathogens with activity against plant pathogens: ecology and evolution. BioControl. 55, 113-128 (2010).
- Akello, J., et al. Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin as an endophyte in tissue culture banana (Musa spp.). Journal of invertebrate pathology. 96, 34-42 (2007).
- Gómez-Vidal, S., Lopez-Llorca, L. V., Jansson, H. B., Salinas, J. Endophytic colonization of date palm (Phoenix dactylifera L.) leaves by entomopathogenic fungi. Micron. 37, 624-632 (2006).
- Posada, F., Vega, F. E. Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales) as an endophyte in cocoa seedlings (Theobroma cacao). Mycologia. 97, 1195-1200 (2005).
- Tefera, T., Vidal, S. Effect of inoculation method and plant growth medium on endophytic colonization of sorghum by the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana. BioControl. 54, 663-669 (2009).
- Posada, F., Vega, F. E. Inoculation and colonization of coffee seedlings (Coffea arabica L.) with the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales. Mycoscience. 47, 284-289 (2006).
- Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. The effects of Beauveria bassiana dose and exposure duration on colonization and growth of tissue cultured banana (Musa sp.) plants. Biological. 49, 6-10 (2009).
- Posada, F., Aime, M. C., Peterson, S. W., Rehner, S. A., Vega, F. E. Inoculation of coffee plants with the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales). Mycological research. 111, 748-757 (2007).
- Brownbridge, M., Reay, S. D., Nelson, T. L., Glare, T. R. Persistence of Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales) as an endophyte following inoculation of radiata pine seed and seedlings. Biological control. 61, 194-200 (2012).
- Posada, F. J., Chaves, F. C., Gianfagna, T. J., Pava-Ripoll, M., Hebbar, P. Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana as an endophyte in cocoa pods (Theobroma cacao L.). Revista U.D.C.A. actualidad & divulgación científica. 13, 71-78 (2010).
- Quesada-Moraga, E., Landa, B. B., Muñoz-Ledesma, J., Jiménez-Díaz, R. M., Santiago-Alvarez, C. Endophytic colonisation of opium poppy, Papaver somniferum, by an entomopathogenic Beauveria bassiana strain. Mycopathologia. 161, 323-329 (2006).
- Biswas, C., Dey, P., Satpathy, S., Satya, P. Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana as a season long endophyte in jute (Corchorus olitorius) and its rapid detection using SCAR marker. BioControl. , 1-7 (2011).
- Bing, L. A., Lewis, L. C. Occurrence of the entomopathogen Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin in different tillage regimes and in Zea mays L. and virulence towards Ostrinia nubilalis (Hübner). Agriculture, ecosystems & environment. 45, 147-156 (1993).
- Akello, J., Sikora, R. Systemic acropedal influence of endophyte seed treatment on Acyrthosiphon pisum and Aphis fabae offspring development and reproductive fitness. Biological. 61, 215-221 (2012).
- Reddy, N. P., Ali Khan, A. P., Devi, U. K., Sharma, H. C., Reineke, A. Treatment of millet crop plant (Sorghum bicolor) with the entomopathogenic fungus (Beauveria bassiana) to combat infestation by the stem borer, Chilo partellus Swinhoe (Lepidoptera: Pyralidae. Journal of Asia Pacific. 12, 221 (2009).
- Quesada-Moraga, E., Muñoz-Ledesma, F. J., Santiago-Alvarez, C. Systemic protection of Papaver somniferum L. against Iraella luteipes (Hymenoptera: Cynipidae) by an endophytic strain of Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales). Environmental entomology. 38, 723-730 (2009).
- Cherry, A. J., Banito, A., Djegui, D., Lomer, C. Suppression of the stem-borer Sesamia calamistis (Lepidoptera; Noctuidae) in maize following seed dressing, topical application and stem injection with African isolates of Beauveria bassiana. International journal of pest management. 50, 67-73 (2004).
- Gurulingappa, P., McGee, P. A., Sword, G. Endophytic Lecanicillium lecanii and Beauveria bassiana reduce the survival and fecundity of Aphis gossypii following contact with conidia and secondary metabolites. Crop protection. 30, 349-353 (2011).
- van Schoonhoven, A., Voysest, O. Common beans in Latin America and their constraints in Bean production problems in the tropics. Schwartz, H. F., Pastor-Corrales, M. A. , Second, CIAT. Cali. 33-57 (1989).
- De Vos, M., Jander, G. Choice and no-choice assays for testing the resistance of A. thaliana to chewing insects. J. Vis. Exp. (15), e683 (2008).
- Parsa, S., Sotelo, G., Cardona, C. Characterizing herbivore resistance mechanisms: spittlebugs on Brachiaria spp. as an example. J. Vis. Exp. (52), e3047 (2011).
- Atamian, H., Roberts, P., Kaloshian, I. High and low throughput screens with root-knot nematodes Meloidogyne spp. J. Vis. Exp. (61), e3629 (2012).
