Summary
Se describe el diseño del dispositivo "quick-linker" para el trasplante ortotópico de hígado de rata más fácil.
Abstract
Trasplante ortotópico de hígado de rata es un modelo popular, que se ha demostrado en un papel JoVe reciente con el uso del dispositivo "rápida-enlazador". Esta técnica permite la fácil venosa del manguito-anatomoses después de una curva de aprendizaje razonable. El dispositivo se compone de dos asas, que se talla fuera de hojas de bisturí, una aproximador, que se obtiene mediante la modificación de unas pinzas de Kocher, y los puños diseñados a partir de tubo de polietileno de calibre fino. Todo el proceso se puede realizar en un laboratorio común el uso de material de bajo costo. El presente informe proporciona un protocolo paso a paso para el diseño de las piezas necesarias e incluye plantillas.
Introduction
Una técnica de trasplante ortotópico de hígado de rata se ha demostrado en un reciente Diario de experimentos visualizados papel 1. Vena porta y de infra-hepáticos vena cava anastomosis se realizaron con la técnica de puño asistida rápido enlazador. Esta técnica fue elegida entre otras revisiones de la técnica del Kamada original de 2-4, ya que permite la anastomosis más fácil y más rápido, resulta en una mejor hemodinámica, y puede ser implementado con una curva de aprendizaje más corta 1,5.
La técnica rápida-enlazador requiere el uso de un mango, un aproximador y puños, todos los cuales pueden ser diseñados a partir de material común de laboratorio de acuerdo con la técnica descrita en el presente informe.
Protocol
1. Mango: Diseño y Definición
- Proteger una hoja de bisturí N º 10 de carbono en una tabla de madera con una cinta.
- Marque el centro del ring en el microscopio. Debe estar ubicado 1,2 cm recta desde el bosque de la hoja de bisturí.
- Taladre un agujero de 2 mm con una broca de diamante esférica, montado en un taladro de alta velocidad.
- Ampliar el agujero con fusiforme o pedacitos de diamante cónica. El diámetro final varía de acuerdo con el peso de la rata como se muestra en la Tabla 1.
- El diseño de la forma del mango con un marcador permanente. Figuras 1 y 2 se pueden utilizar como plantillas.
- Convertir el taladro en una amoladora de banco pequeño y quitar la parte de la hoja fuera de la forma.
- Para rematar la pieza con una baja velocidad de cepillo giratorio.
2. Approximator: Diseño y Definición
- El aproximador se obtiene mediante la modificación de Klemmer quirúrgica recta o pinza de Kochers.
- Cortar la mitad de una rama en el microscopio utilizando el mini amoladora de banco de alta velocidad.
- Hacer ranuras simétricas a ambos lados para permitir el asa para introducir por completo.
- Haga un corte longitudinal en el brazo largo y compruebe que el centro del brazo largo y un mango bien posicionados se encuentran en un mismo eje.
- Diseñar una muesca en el brazo largo mirando hacia el centro de la empuñadura.
- Hacer la rama lo más fina posible y completan la pieza con la baja velocidad del cepillo giratorio.
3. Puños: Diseño y Definición
- Gemelos pinzas varían de acuerdo con el peso de la rata y la tensión. Por el contrario, su longitud debe mantenerse alrededor de 4 mm.
- Tome un tubo de polietileno de calibre fino y redondo fuera de un borde con un bisturí N º 10.
- Diseñar una arboleda 0,5 mm desde el borde y corte cuidadosamente una pendiente de bajar a la arboleda.
- Cortar una o dos muescas de espesor total en la tubería. Estos seayudar a la manipulación de la banda durante la preparación del injerto y trasplante.
- Cortar el brazalete a 4 mm a partir de su borde.
Representative Results
Cinco equipos, entre ellos cinco aproximadores y 11 tiradores han sido fabricados. Un asa se rompió durante la final cepillado. Este problema era debido al hecho de que el anillo de la manija era demasiado estrecha, y se ha resuelto mediante el establecimiento de la parte más estrecha del anillo de mango a 0,5 mm. No hay problemas ocurrieron durante la formación de los aproximadores.
| Peso Rat (g) | Porta mango (diámetro interno) (mm) | Porta manguito (diámetro exterior) (mm) | IVC mango (diámetro interno) (mm) | IVC manguito (diámetro exterior) (mm) |
| 120-180 | 2.2 | 1.7 | 2.6 | 2.08 |
| 180-270 | 2.6 | 2.08 | 03.04 a 03.07 | 3,0-3,25 |
| > 270 | 2.9 | 2.42 | 4.2 | 3.7 |
La Tabla 1.
Figura 1. Porta plantilla mango. Si impresa con una escala de 1:01 se puede utilizar para guiar el mango de la conformación. Haga clic aquí para ver la figura más grande .
Figura 2. IVC plantilla mango. Si impresa con una escala de 1:01 se puede utilizar para guiar el mango de la conformación. Haga clic aquí para ver la figura más grande .
Figura 3. V.Porta Porta y IVC puños vista lateral. Del injerto debe ser asegurado a la ranura central, mientras recipiente del destinatario al lateral. Este recurso permite el contacto óptimo de la íntima-a-íntima.
La Figura 4. Están representados Porta y IVC puños vista frontal. Calibradores adecuados para ratas que pesaban 180-270 g.
Discussion
En el presente informe se describe el diseño y construcción del sistema de quick-enlazador para el trasplante de hígado de rata más fácil.
Trasplante de hígado de rata es un modelo popular entre 125-180 documentos relacionados que se publican anualmente desde la década de 1990 ( www.pubmed.com ). Además, permite una amplia gama de experimentos, incluyendo la exploración de aspectos de la preservación inmunológicos y de injerto. El uso del kit "rápida-enlazador" permite la anastomosis más fácil y más rápido con garantía de contacto de la íntima-a-íntima. Una descripción detallada y la discusión de los pasos técnicos de un trasplante de hígado de rata se han descrito anteriormente 1.
El kit de rápido enlazador se puede construir a bajo precio de material común de laboratorio. El principal desafío encontrado se ha relacionado la ruptura de un mango durante el cepillado final, y ese problema se ha resuelto mediante el establecimiento de la nominal más estrechat del anillo de mango en 0,5 mm (Figuras 1 y 2 muestran tamaños apropiados). En cuanto a la calidad de la hoja, sólo debe considerarse de acero inoxidable. Aunque ligeramente menos flexible en comparación con la hoja de acero de carbono medio, cuchillas de acero inoxidable no se desarrollan óxido, lo que permite un uso en la vida de las asas.
De nota, el diseño de las asas y puños actuales es el resultado de un proceso, que ha llevado a los tamaños de propuestas, lo que permite para las anastomosis más eficientes. Gemelos diámetros varían de acuerdo con los pesos de rata (Tabla 1). Mínimas variaciones se pueden tolerar en términos de longitud, con una longitud habitual de alrededor de 4 mm (Figuras 3 y 4).
En cuanto a la aproximador, la pinza de Kocher seleccionado debería haber mangos al menos 4 cm del punto de apoyo. Esto permite un cierre seguro de la rejilla fuera del abdomen del animal.
En general,el dispositivo propuesto puede permitir la anastomosis de vena más fácil para el trasplante de hígado y otros tipos de injertos en ratas.
Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Acknowledgments
El estudio fue apoyado por la Fundación Artères, la Fundación Astellas Europa y la Fundación Boninchi. CT fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencia de Suiza (subvención SCORE 3232230-126233).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Porta cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1729 800/100/420 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| IVC cuff | altecweb or smiths-medical | Coil 01-96-1733 800/100/540 |
Bore : variable Wall : 0.30 mm Length: 3.8-4.2 mm altecweb.com or smiths-medical.com |
| Mini-drill | Dremel | 100 series | 35,000 rpm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7103 | 2 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7105 | 4.4 mm dremel.com |
| Diamond wheel point | Dremel | 7144 | 2.4 mm dremel.com |
| Cut-off wheels | Dremel | 420 | dia: 23.8 mm thickness: 0.5 mm dremel.com |
| Quick-linker handles | dltchiropody (DLT) | PAR 10 | modified scalpel blades dltchriopdy |
| Quick-linker approximator | pharmap | UD-04-275 | modified Kocher's forceps pharmap.ch |
References
- Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. Orthotopic Liver Transplantation in Rats. J. Vis. Exp. (65), e4143 (2012).
- Hori, T., et al. Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide. World Journal of Gastroenterology., WJG. 16, 3120 (2010).
- Kashfi, A., et al. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation Proceedings. 37 (1), 185-188 (2005).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47 (1979).
- Oldani, G., et al. A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result. Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).
