Summary
हम घाव साइट में कलम बांधने का काम आठ सप्ताह के भ्रूण brainstem तंत्रिका स्टेम सेल के बाद टी -4 रीढ़ की हड्डी transected चूहों में हृदय मापदंडों रिकॉर्ड करने के लिए एक रेडियो टैलिमीटर प्रणाली का उपयोग कर के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं. टेलीमेटरी सही ढंग से सचेत आज़ादी से घूम रहा रीढ़ की हड्डी घायल चूहों में हृदय समारोह का मूल्यांकन करने के लिए एक उन्नत तकनीक है.
Abstract
उच्च वक्ष या गर्भाशय ग्रीवा रीढ़ की हड्डी की चोट (एससीआई) हृदय रोग को जन्म दे सकता है. हृदय मापदंडों पर नजर रखने के लिए, हम साथ या हरी फ्लोरोसेंट प्रोटीन व्यक्त भ्रूण brainstem व्युत्पन्न तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं की ग्राफ्टिंग के बिना एक टी -4 रीढ़ की हड्डी transection लिया कि चूहों की ऊरु धमनी में एक रेडियो ट्रांसमीटर से जुड़ा एक कैथेटर प्रत्यारोपित. ऐसे प्रवेशनी प्रविष्टि या पूंछ कफ के रूप में अन्य तरीकों की तुलना में, टेलीमेटरी लगातार स्वतंत्र रूप से आगे बढ़ पशुओं में रक्तचाप और दिल की दर पर नजर रखने के लिए फायदेमंद है. यह भी लंबी अवधि के कई डेटा अधिग्रहण करने में सक्षम है. रीढ़ की हड्डी घायल चूहों में, कोलोरेक्टल बढ़ाव के जवाब में अनर्गल हालत और स्वायत्त dysreflexia तहत बेसल हृदय डेटा को सफलतापूर्वक दर्ज किया गया. एक ट्रांसमीटर एक रीढ़ की हड्डी transection से पहले प्रत्यारोपित किया जाता है इसके अलावा, अगर पहले और एससीआई के बाद हृदय मापदंडों एक ही चूहे में तुलना की जा सकती. वर्णित telemet की एक सीमाRY प्रक्रिया ऊरु धमनी में आरोपण ipsilateral hindlimb को रक्त की आपूर्ति को प्रभावित कर सकते हैं.
Introduction
हृदय रोग उच्च स्तर पर रीढ़ की हड्डी की चोट (एससीआई) के बाद होता है. यह अव्यवस्थित रक्तचाप और हृदय गति बाकी पर, ऑर्थोस्टेटिक हाइपोटेंशन, व्यायाम प्रेरित हाइपोटेंशन, और चोट स्तर 1,2 नीचे संवेदी उत्तेजनाओं के जवाब में उच्च रक्तचाप और baroreflex की मध्यस्थता मंदनाड़ी के एपिसोड के द्वारा होती स्वायत्त dysreflexia में प्रकट होता है. ये लक्षण रीढ़ की हड्डी घायल मरीजों के दैनिक जीवन के साथ हस्तक्षेप. इस प्रकार, यह एससीआई और प्रयोगात्मक उपचार के साथ पशुओं में हृदय परिवर्तन की जांच के लिए प्रभावी उपकरण स्थापित करने के लिए महत्वपूर्ण है.
पशुओं में हृदय समारोह की जांच करने के लिए, कई तकनीकों रक्तचाप और दिल की दर पर नजर रखने के लिए इस्तेमाल किया गया है. Noninvasive पूंछ कफ परिधीय रक्तचाप 3 मापने के लिए नियोजित किया जा सकता है, जबकि सेंट्रल हृदय मापदंडों, प्रवेशनी प्रविष्टि और टेलीमेटरी द्वारा दर्ज किया जा सकता है. अन्य विधियों, टेली की तुलनाmetry यह स्वतंत्र रूप से आगे बढ़ जानवरों और हृदय समारोह 4 के लंबे समय तक निगरानी में सतत रिकॉर्डिंग के लिए अनुमति देता है कि मुख्य लाभ है. एससीआई पशु मॉडल में, प्रयोगात्मक उत्तेजना के बाद परिधीय रक्तचाप में परिवर्तन का पता लगाने में काफी बड़ा नहीं हो सकता. तदनुसार, उपयुक्त हृदय की निगरानी तकनीक एससीआई के साथ पशुओं के लिए चयनित किया जाना चाहिए.
वर्तमान अध्ययन में, एक रेडियो टैलिमीटर प्रणाली पूरा रीढ़ की हड्डी transection के बाद वयस्क चूहों में हृदय समारोह की निगरानी के लिए पेश किया गया था. चूहे घाव साइट में syngeneic चूहा भ्रूण 14 दिन (E14) brainstem व्युत्पन्न तंत्रिका स्टेम कोशिकाओं (बी एस एनएससी) का ग्राफ्ट प्राप्त किया. चोट और कोई प्रत्यारोपण और भोले, रिहाई चूहों के साथ चूहों के नियंत्रण के रूप में कार्य किया. टेलीमेटरी की प्रक्रिया ट्रांसमीटर नसबंदी और आरोपण (चित्रा 1), बेसल हृदय पैरामीटर की रिकॉर्डिंग, कोलोरेक्टल बढ़ाव प्रेरित प्रतिक्रियाओं, और ट्रांसमीटर सफाई और शामिलभंडारण.
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Protocol
सभी पशु प्रोटोकॉल संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित किया गया. प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और सुरक्षा के लिए एनआईएच दिशा निर्देशों का कड़ाई से पालन कर रहे हैं. सर्जिकल प्रक्रियाओं के साथ पशुओं को पर्याप्त रूप से दर्द और परेशानी को कम करने के लिए इलाज किया गया.
1 स्पाइनल कॉर्ड Curgery और सेल कलम बांधने का काम
- सभी सर्जरी से पहले आटोक्लेव सर्जिकल उपकरणों. विभिन्न जानवरों पर प्रक्रियाओं के बीच उपकरणों से रोगजनकों और माइक्रोबियल को दूर करने के लिए गर्म मनका अजीवाणु (ललित विज्ञान उपकरण) का उपयोग करें. सर्जरी के दौरान बाँझ सर्जिकल दस्ताने, गाउन, और पर्दे का प्रयोग करें. प्रत्येक शल्य प्रक्रिया के लिए सड़न रोकनेवाला सर्जिकल तकनीक को रोजगार.
- महिला फिशर intraperitoneal इंजेक्शन (आईपी) के माध्यम से प्रशासित ketamine (25 मिलीग्राम / एमएल), xylazine (1.3 मिलीग्राम / एमएल), और acepromazine (0.25 मिलीग्राम / एमएल) के संयोजन के साथ 344 चूहों (2 मिलीग्राम / किग्रा) anesthetize.
- वापस क्षेत्र दाढ़ी और betadine और इथेनॉल के साथ बार बार त्वचा को साफ.
- एक # 10 ब्लेड का उपयोग त्वचा में कटौती और दो टूक मांसपेशियों परतों काटना. , कशेरुकाओं अलग T3 बांस का पर्दाफाश, और एक ठीक इत्तला दे दी Rongeurs का उपयोग कर एक पृष्ठीय laminectomy प्रदर्शन करने के लिए एक स्केलपेल का उपयोग करें.
- Longitudinally ड्यूरा काटकर अलग कर देना और रीढ़ की हड्डी स्टंप के बीच एक लगभग 1 मिमी rostrocaudal खाई पैदा करने iridectomy कैंची और microaspiration के संयोजन का उपयोग टी -4 स्तर पर रीढ़ की हड्डी आड़ा काट.
- 3-0 Vycril के साथ पूरी तरह से खून बह रहा बंद हो जाता है, तो सीवन मांसपेशियों तक 2 मिनट और घाव क्लिप के साथ त्वचा करीब - करीब 1 रुको.
- Lactated घंटी (5 एमएल), buprenorphine (0.035 मिलीग्राम / किग्रा), और subcutaneously तुरंत सर्जरी के बाद एम्पीसिलीन (33 मिलीग्राम / किग्रा) इंजेक्षन और जाग जब तक एक गर्म इनक्यूबेटर में चूहों को बनाए रखने.
- इंजेक्षन घंटी और दो बार दैनिक 3 दिन के लिए या दर्द और संकट के लक्षण गायब हो जब तक एम्पीसिलीन एक बार दैनिक 10 दिनों के लिए समाधान, और buprenorphine. च जब तक अन्य जानवरों की कंपनी के लिए एक जानवर वापस नहीं करतेully बरामद किया.
- मैन्युअल खाली पलटा मूत्राशय की स्थापना तक दो बार के बारे में दो सप्ताह के लिए एक दिन मूत्राशय खाली है, और यदि आवश्यक हो तो अस्तित्व भर में एक दिन में एक बार मूत्राशय खाली.
- दो हफ्ते बाद ऊपर वर्णित है, एससीआई चूहों फिर से anesthetize और रीढ़ की हड्डी में घाव साइट फिर से बेनकाब. घाव साइट में प्रत्यारोपित कोशिकाओं को बनाए रखने के लिए बंद कर दिया ड्यूरा रखें.
- घाव गुहा का उपरिकेंद्र और कई इंजेक्शन के साथ घाव का व्याख्यान चबूतरे वाला और दुम अंतरफलक में, 10 E14 सर्वव्यापक GFP ट्रांसजेनिक चूहा भ्रूण से एकत्र और फाइब्रिनोजेन में एम्बेडेड सेल समाधान (3.5 × 10 5 μl), के μl और थ्रोम्बिन 5,6 इंजेक्षन एक हैमिल्टन सिरिंज से जुड़े 40 माइक्रोन की एक आंतरिक व्यास, के साथ एक खींच लिया गिलास micropipette का उपयोग साइटों,.
- मांसपेशी परतों सिवनी और घाव क्लिप के साथ त्वचा को बंद करें.
- 1.8 - कदम 1.6 में वर्णित के रूप में पोस्ट सर्जरी इंजेक्शन और मूत्राशय की देखभाल कर.
- एक सप्ताह होसामने छिड़काव, रीढ़ की हड्डी में 7 intraperitoneally प्रतिगमनपूर्वक लेबल सहानुभूति प्रेगन्ग्लिओनिक न्यूरॉन्स को 0.5% Fluorogold (FG, आसुत जल में 0.4 मिलीलीटर) इंजेक्षन.
2 ट्रांसमीटर आरोपण
- नसबंदी के लिए कमरे के तापमान पर 2 घंटा (10 घंटा के लिए) - कम से कम 1 के लिए transmittersin 2% glutaraldehyde समाधान (आसुत जल 96 मिलीलीटर में 50% glutaraldhyde के 4 मिलीलीटर) भिगोएँ.
- अच्छी तरह से बाँझ 0.9% नमक के साथ 3 बार ट्रांसमीटरों धोएं और उपयोग (अधिक नहीं 1 घंटा) तक खारा में उन्हें दुकान.
- आठ सप्ताह E14 कोशिका प्रत्यारोपण (10 सप्ताह के बाद चोट के बाद), के साथ या सेल ग्राफ्टिंग और भोले नियंत्रण चूहों के बिना एक एससीआई लिया कि चूहों reanesthetize.
- पेट क्षेत्र और hindlimbs दाढ़ी. Betadine साथ त्वचा साफ करें. लापरवाह स्थिति में शल्य चिकित्सा की मेज पर चूहा रखें.
- एक # 15 ब्लेड का उपयोग सही पक्ष पर उदर पेट और जांघ पर त्वचा काटकर अलग कर देना.
- एस के माध्यम से कटubcutaneous संयोजी ऊतक एक छोटे कैंची का उपयोग ऊरु वाहिकाओं और तंत्रिका के बंडल को बेनकाब करने के लिए.
- घुमावदार सुझावों के साथ एक ठीक संदंश का उपयोग नस और तंत्रिका से ऊरु धमनी अलग करें.
- धमनी के नीचे तीन रेशम टांके रखो और प्रत्येक सीवन में एक ढीली गाँठ बनाते हैं.
- बाद में कैथीटेराइजेशन के लिए vasodilation बटोर धमनी की सतह के लिए 0.1 मिलीलीटर Lidocaine (2%) लागू करें.
- Proximally एक ढीला रेशम सिवनी खींच द्वारा एक स्थायी रेशम गाँठ और अस्थायी ब्लॉक के साथ distally पोत सुरक्षित.
- एक 20 गेज घुमावदार सुई का उपयोग धमनी पंचर और एक कैथेटर प्रविष्टि उपकरण का उपयोग दूरमापी कैथेटर (8 सेमी लंबी) की नोक डालें.
- Rostrally अप जिससे वक्ष महाधमनी में टिप रखकर 4 सेमी तक कैथेटर डालें.
- ऊरु धमनी के आसपास तीन रेशम टांके बांधने से पोत के भीतर कैथेटर लंगर.
- Ribcage और टी की दुम बढ़त के बीच पार्श्व साथ एक चमड़े के नीचे जेब बनाओवह एक कुंद कैंची से घुटने की श्रृंखला के सबसे कपाल विस्तार.
- अत्यधिक आंदोलन से बचने के लिए ट्रांसमीटर आसपास के संयोजी ऊतक को जेब और सिवनी में ट्रांसमीटर शरीर डालें.
- नंबर 6 रेशम के धागे के साथ त्वचा सीवन.
- Lactated घंटी (5 एमएल), buprenorphine (0.035 मिलीग्राम / किग्रा), और subcutaneously तुरंत सर्जरी के बाद एम्पीसिलीन (33 मिलीग्राम / किग्रा) इंजेक्षन और जाग जब तक एक गर्म इनक्यूबेटर में चूहों को बनाए रखने.
3 बेसल मतलब धमनी दबाव (एमएपी) और दिल की दर (मानव संसाधन) रिकॉर्डिंग
- के रूप में जल्दी ट्रांसमीटर आरोपण के बाद एक दिन के रूप में, रिसीवर पैड पर एक भी पशु डाला और पर ट्रांसमीटर बारी. हृदय मापदंडों पशु आदत डालना और स्थिर करने के लिए 15 मिनट - लगभग 10 के लिए प्रतीक्षा करें.
- कम से कम 1 घंटे के लिए एक कम्प्यूटरीकृत डाटा अधिग्रहण प्रणाली के साथ पल्स धमनी दबाव से निकाली गई जो कीर्तिमान आराम मानचित्र और मानव संसाधन,. डेटा हर 5 सेकंड लीजिए.
- एक मॉनिटरimals लगातार और दिखाई ऐंठन की घटना के दौरान डेटा बिंदुओं को हटा दें. प्रत्येक जानवर के लिए, औसत डेटा बिंदुओं मतलब मूल्यों को प्राप्त करने के लिए.
4 कोलोरेक्टल स्वायत Dysreflexia बढ़ाव प्रेरित
- ट्रांसमीटर रिसीवर पर अंदर भोजन छर्रों के साथ आपूर्ति की एक तौलिया में एनएससी grafted या एससीआई नियंत्रण चूहों को नियंत्रित. आमतौर पर चूहों की प्रक्रिया के दौरान मिलकर रह सकते हैं.
- लगभग 2 सेमी के लिए मलाशय में एक लेटेक्स गुब्बारे इत्तला दे दी कैथेटर डालें और टेप 8 के साथ पूंछ के लिए यह सुरक्षित.
- पर ट्रांसमीटर मुड़ें और 10 के लिए प्रतीक्षा - 15 मिनट रक्तचाप preinsertion आधारभूत पर लौटने के लिए अनुमति देता है.
- लगभग 30 एमएमएचजी के दबाव उत्पन्न करने के लिए, धीरे से 1 मिनट के लिए हवा की 1.4 मिलीलीटर के साथ 10 सेकंड से अधिक गुब्बारे की मुद्रास्फीति से कोलोरेक्टल बढ़ाव प्रेरित.
- रिकॉर्ड नक्शा और पहले ऑफिस 1 मिनट, के दौरान 1 मिनट, और कोलोरेक्टल बढ़ाव के बाद 1 मिनट; नमूना डेटा 3 मिनट प्रक्रिया के दौरान हर 3 सेकंड.
- दो परीक्षणों के बीच कम से कम 15 मिनट वसूली अंतराल के साथ पशु प्रति 3 परीक्षण - 2 प्रदर्शन करना.
- अगर कोई आगे मूल्यांकन ऊपर वर्णित डबल खुराक संज्ञाहरण संयोजन के साथ ओवरडोज जानवर (आईपी). 4% paraformaldehyde द्वारा पीछा खारा के साथ जानवरों छिड़कना.
- प्रत्येक जानवर के लिए, पहले और क्रमशः कोलोरेक्टल बढ़ाव दौरान मूल्यों औसत; आधारभूत और प्रत्येक परीक्षण के लिए बढ़ाव प्रेरित मानचित्र और ऑफिस परिवर्तन के बीच अंतर की गणना; 2 से अधिक औसत - 3 परीक्षण मतलब मूल्यों को प्राप्त करने के लिए.
5 ट्रांसमीटर सफाई
- संज्ञाहरण के बाद लेकिन छिड़काव से पहले पशु के शरीर से ट्रांसमीटर निकालें. सफाई तक आसुत जल से भरा एक बीकर में तुरंत लेना; दूरमापी डिवाइस के सूखने से बचने.
- कमरे के तापमान पर 24 घंटे के लिए 1% Terg-A-Zyme एंजाइमी सफाई समाधान (10 जी / एल पानी) के लिए दूरमापी स्थानांतरण.
- एक कुंद 30 गेज सुई के साथ ट्रांसमीटर कैथेटर की नोक REGELREGEL सिरिंज से जुड़े.
- ध्यान से एक मुड़ा हुआ नरम ऊतक का उपयोग कर ट्रांसमीटर सूखी और मूल प्लास्टिक ट्रे में स्टोर.
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Representative Results
ऊपर वर्णित टेलीमेटरी तकनीक का उपयोग करना, हम सफलतापूर्वक रीढ़ की हड्डी घायल पशुओं में हृदय मापदंडों दर्ज की गई. ऑफिस पिछली रिपोर्टों 9 के साथ संगत भोले जानवरों की तुलना में वृद्धि हुई है, जबकि अकेले एससीआई के साथ पशुओं में, एमएपी काफी कम हो गया था. बी एस एन एस सी ग्राफ्टिंग, मानचित्र और मानव संसाधन के साथ पशुओं में भोले जानवरों में मापा स्तर (चित्रा 2) से संपर्क किया. हानिकारक उत्तेजना नक्शे में वृद्धि और मानव संसाधन 3,8 में कमी का उत्पादन अगर कोलोरेक्टल बढ़ाव के दौरान एक चूहे dysreflexic के रूप में माना गया था. प्रासंगिक उच्च रक्तचाप और baroreflex की मध्यस्थता मंदनाड़ी अनिवार्य रूप से सभी जानवरों में शुरू हो गया लेकिन हद समूहों के बीच मतभेद था. बीएस एनएससी साथ grafted पशुओं में नक्शे वृद्धि बहुत कम थी (16.9 ± 3.1 एमएमएचजी, एन = 3) अकेले चोट (64.1 ± 1.6 एमएमएचजी, एन = 3) (चित्रा 3) के साथ जानवरों से भी. हालांकि, कोलोरेक्टल बढ़ाव के दौरान मानव संसाधन में कमी काफी समूह के बीच अलग नहीं किया थाएस. मंदनाड़ी baroreflex तंत्र द्वारा मध्यस्थता है, इस विसंगति एससीआई 10 के बाद baroreceptors की कम संवेदनशीलता की वजह से हो सकता है. ऐंठन की परवाह किए बिना इलाज के सबसे चूहों में कोलोरेक्टल बढ़ाव के दौरान हुई.
ऊतकीय विश्लेषण करने पर, उत्कृष्ट भ्रष्टाचार बीएस एनएससी साथ प्रत्यारोपित रीढ़ की हड्डी डोरियों में अस्तित्व लेकिन भ्रष्टाचार के बिना घायल नियंत्रण जानवरों की रीढ़ की हड्डी में एक अंतराल के संकेत immunolabeling. भ्रूण एनएससी पूरी तरह से घाव साइट भरा है और केवल मामूली cavities मनाया गया. समाविष्ट दोनों rostrally और दुमदारी मेजबान ग्रे और सफेद पदार्थ में एकीकृत. गु + catecholaminergic और 5 हिंदुस्तान टाइम्स + serotonergic न्यूरॉन्स की एक बड़ी संख्या में बी एस एन एस सी प्रत्यारोपण के भीतर पाया गया है, और कई axons भौगोलिक विवरण के अनुसार लंबी दूरी (चित्रा 4) से अधिक intermediolateral सेल स्तंभ में दुम सहानुभूति प्रेगन्ग्लिओनिक न्यूरॉन्स innervated. भ्रष्टाचार के बिना घायल पशुओं में इसके विपरीत, में वें, + / 5 हिंदुस्तान टाइम्स + Fibers घाव नीचे thoracolumbar रीढ़ की हड्डी में पता नहीं थे () नहीं दिखाया.
चित्रा 1:. ऊरु धमनी की कैथीटेराइजेशन दिखा आरेख ऊरु धमनी (ए) तंत्रिका (एन) और नस (वी) से विच्छेदित, और फिर एक घुमावदार सुई के साथ हवा निकाल दी है. ट्रांसमीटर से जुड़े कैथेटर हृदय रिकॉर्डिंग के लिए वक्ष महाधमनी (~ 4 सेमी) के स्तर पर कैथेटर की नोक रखकर, धमनी में डाला जाता है.
चित्रा 2: बेसल मानचित्र और ऑफिस बीएस एनएससी साथ grafted रीढ़ की हड्डी घायल चूहों में ठीक एक प्रतिनिधि पलटन में (एन = 3 / समूह), टेलीमेटरी रिकॉर्डिंग काफी कम बेसल मानचित्र और एससीआई के साथ चूहों में उच्च ऑफिस और कोई इलाज 10 मूत इंगित करता है. चोट के बाद एस (* पी <0.05). इसके विपरीत, दोनों हृदय मापदंडों 8 सप्ताह बीएस एनएससी ग्राफ्टिंग के बाद भोले चूहों के स्तर (10 सप्ताह के बाद चोट) के लिए ठीक हो (दोनों p> 0.05, एनोवा फिशर पद अस्थायी द्वारा पीछा).
चित्रा 3:. कोलोरेक्टल बढ़ाव (सी आर डी), स्वायत dysreflexia दोनों एससीआई और बी एस एन एस सी grafted पशुओं में एक 1 मिनट CRD दौरान शुरू हो रहा है स्वायत्त dysreflexic -induced मंदनाड़ी के साथ के रूप में प्रासंगिक उच्च रक्तचाप प्रकट. एक घायल नियंत्रण चूहे में (ए), पेट के बढ़ाव के दौरान लगभग 60 एमएमएचजी मानचित्र बढ़ जाती है. बीएस एनएससी साथ grafted एक चूहे में 20 एमएमएचजी - (बी) हालांकि, नक्शा वृद्धि दृढ़ता से 10 से कम है.
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चित्रा 4: Grafted बीएस एनएससी मेजबान वयस्क रीढ़ की हड्डी में एकीकृत और catecholaminergic और serotonergic न्यूरॉन्स में अंतर (ए) बी एस एनएससी ग्राफ्टिंग के बाद आठ सप्ताह, GFP और GFAP डबल immunolabeling में प्रत्यारोपित GFP लेबल की कोशिकाओं के साथ घाव साइट के भरने को दर्शाता है. एक अनुदैर्ध्य स्पाइनल कॉर्ड खंड. इसके विपरीत (बी), एक अंतराल के भ्रष्टाचार के बिना एक transected रीढ़ की हड्डी में मौजूद है. Tyrosine hydroxylase (वें) और सेरोटोनिन (5 हिंदुस्तान टाइम्स) के लिए immunolabeling (सी, डी) कई वें और भ्रष्टाचार के भीतर 5 हिंदुस्तान टाइम्स सकारात्मक न्यूरॉन्स का पता चलता है. (ई, एफ) भ्रष्टाचार व्युत्पन्न वें + और 5 हिंदुस्तान टाइम्स + axons का विस्तार और intermediolateral सेल स्तंभ में fluorogold साथ लेबल दुम सहानुभूति प्रेगन्ग्लिओनिक न्यूरॉन्स अंदर आना. स्केल सलाखों: 1 मिमी (बी), 25 माइक्रोन (डी), और 50 माइक्रोन (एफ).
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Discussion
परंपरागत रूप से, एक तरल पदार्थ भरा प्रवेशनी धमनी में डाला जाता है और प्रत्येक पशु 11 में एक टर्मिनल स्नैपशॉट के रूप में हृदय मापदंडों रिकॉर्ड करने के लिए एक दबाव transducer से जुड़ा है. लगातार एक लंबे समय के लिए हृदय प्रदर्शन की निगरानी करने के लिए, रेडियो टैलिमीटर सिस्टम कई प्रयोगशालाओं में कार्यरत हैं. यह और अधिक परिष्कृत उपकरण आज़ादी जानवरों चलती है, सचेत में रक्तचाप रिकॉर्ड कर सकते हैं. तरल पदार्थ भरा कैथेटर की तुलना में, टेलीमेटरी सही रूप में एससीआई पशुओं में हृदय समारोह का मूल्यांकन करने के लिए एक और अधिक उन्नत तकनीक माना जाता है. वर्तमान अध्ययन में एक ट्रांसमीटर रिकॉर्डिंग से पहले केवल 1 दिन प्रत्यारोपित किया गया था, यह पहले या एससीआई कई डाटा अधिग्रहण के लिए प्रयोगात्मक आवश्यकताओं 12 के आधार पर बाद प्रत्यारोपित किया जा सकता है. बेसल रक्तचाप और मानव संसाधन, या तो केंद्रीय या परिधीय रिकॉर्डिंग के लिए हासिल किया जा सकता है. हालांकि, कोलोरेक्टल बढ़ाव को हृदय प्रतिक्रिया में noninvasive पूंछ कफ आधारित पद्धति से नहीं पाया जा सकता हैहमारे अनुभव. हाल के टैलिमीटर विश्लेषण चूहों 9,13 में पूरा उच्च वक्ष रीढ़ की हड्डी transection के बाद हाइपोटेंशन और क्षिप्रहृदयता की लंबी अवधि के हठ सत्यापित. हमारे एससीआई नियंत्रण चूहों में कम बेसल मानचित्र और उच्च ऑफिस में एक ही रिकॉर्डिंग तकनीक का उपयोग करते हुए पिछली रिपोर्ट के साथ संगत कर रहे हैं. कोलोरेक्टल प्रेरित स्वायत्त dysreflexia सेल भ्रष्टाचार प्राप्त कि चूहों में क्रमशः समाप्त किया गया था. कई रीढ़ की हड्डी क्षेत्रों में SPNs को हमारे ऊतकीय सबूत, catecholaminergic और serotonergic सूचनाओं के आधार पर शारीरिक सुधार के लिए खाते सकता है.
ट्रांसमीटर कैथीटेराइजेशन सफल प्रत्यारोपण और रिकॉर्डिंग के लिए महत्वपूर्ण है. रीढ़ की हड्डी transected चूहों में, ऊरु धमनी का व्यास के कारण मोटर और hindlimbs का संवेदी समारोह की कमी के कारण सामान्य से छोटा होता है. पूरी पक्षाघात आमतौर पर पेशी शोष में यह परिणाम है. सर्जन धमनी से भी बड़ा होने की कैथेटर की नोक मिल सकता है. इस मामले में, पर 2% Lidocaine लागू करनेvasodilation जानने धमनी की सतह को आसानी से हवा निकाल दी वाहिकाओं में डाला जाएगा कैथेटर की नोक के लिए अनुमति देता है. 5 मिनट - विशेष रूप से, lidocaine प्रेरित-vasodilation लगभग 4 बनी रहती है. इस प्रकार, पोत पंचर और कैथीटेराइजेशन जल्द से जल्द किया जाना चाहिए. बेसल मानकों के डेटा अधिग्रहण की अवधि में, हम 1 घंटे के लिए डेटा अंक हर 5 सेकंड एकत्र. 3 मिनट कोलोरेक्टल बढ़ाव प्रेरित रिकॉर्डिंग के दौरान, तथापि, डेटा इस छोटी सी अवधि में एक अधिक सटीक औसत के लिए अधिक डेटा अंक प्राप्त करने के लिए हर 3 सेकंड नमूना थे.
ऊरु धमनी में एक कैथेटर का आरोपण hindlimb के रक्त की आपूर्ति के साथ हस्तक्षेप और बाहर का धमनी sutured है, खासकर अगर ऊतक परिगलन उत्पन्न हो सकता है. बजाय एक रेशम सीवन के ऊतक गोंद की एक छोटी सी बूंद के साथ धमनी में कैथेटर सम्मिलन बिंदु सील कम से कम आंशिक रूप से रक्त के प्रवाह को बहाल कर सकते हैं. इस प्रकार, जानवरों लंबे समय तक निगरानी के लिए स्वस्थ हो जाएगा.वैकल्पिक रूप से, ट्रांसमीटर की कैथेटर उदर गुहा में ट्रांसमीटर शरीर रखने उदर महाधमनी में सीधे प्रत्यारोपित किया जा सकता है. इस विधि ipsilateral hindlimb में ऊतक क्षय से बचा जाता है लेकिन जठरांत्र समारोह को प्रभावित करने का खतरा है.
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Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Fibrinogen (rat) | Sigma | F6755-25MG | 2 hr at 37 oC to dissovle |
| Thrombin (rat) | Sigma | T5772-100UN | Dissovle in 10 mM CaCl2 |
| 1% Terg-A-Zyme | Sigma | Z273287 | Enzymatic solution for telemeter cleaning |
| Fluorogold | Fluorochrome | Dissovle in distilled water and avoid light | |
| Telemeter (PA-C40) | Data Sciences International | ||
| Telementric recording and analysis system | Data Sciences International | Signal stimulator, Data Exchange Matrix, receivers, Ambient pressure reference monitor | |
| Balloon-tipped catheter | Edward Lifesciences | 111F7-P | For colorectal distension |
References
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