To obtain basic information on the sorption and recycling of gold from aqueous systems the interaction of Au(III) and Au(0) nanoparticles on S-layer proteins were investigated. The sorption of protein polymers was investigated by ICP-MS and that of proteinaceous monolayers by QCM-D. Subsequent AFM enables the imaging of the nanostructures.
In this publication the gold sorption behavior of surface layer (S-layer) proteins (Slp1) of Lysinibacillus sphaericus JG-B53 is described. These biomolecules arrange in paracrystalline two-dimensional arrays on surfaces, bind metals, and are thus interesting for several biotechnical applications, such as biosorptive materials for the removal or recovery of different elements from the environment and industrial processes. The deposition of Au(0) nanoparticles on S-layers, either by S-layer directed synthesis 1 or adsorption of nanoparticles, opens new possibilities for diverse sensory applications. Although numerous studies have described the biosorptive properties of S-layers 2-5, a deeper understanding of protein-protein and protein-metal interaction still remains challenging. In the following study, inductively coupled mass spectrometry (ICP-MS) was used for the detection of metal sorption by suspended S-layers. This was correlated to measurements of quartz crystal microbalance with dissipation monitoring (QCM-D), which allows the online detection of proteinaceous monolayer formation and metal deposition, and thus, a more detailed understanding on metal binding.
The ICP-MS results indicated that the binding of Au(III) to the suspended S-layer polymers is pH dependent. The maximum binding of Au(III) was obtained at pH 4.0. The QCM-D investigations enabled the detection of Au(III) sorption as well as the deposition of Au(0)-NPs in real-time during the in situ experiments. Further, this method allowed studying the influence of metal binding on the protein lattice stability of Slp1. Structural properties and protein layer stability could be visualized directly after QCM-D experiment using atomic force microscopy (AFM). In conclusion, the combination of these different methods provides a deeper understanding of metal binding by bacterial S-layer proteins in suspension or as monolayers on either bacterial cells or recrystallized surfaces.
कारण इलेक्ट्रॉनिक्स, उत्प्रेरक, biosensors, या चिकित्सा उपकरणों की तरह कई अनुप्रयोगों के लिए सोने के बढ़ते उपयोग करने के लिए, इस कीमती धातु की मांग में पिछले कुछ साल के समय 6-9 से अधिक हो गया। भारी या कीमती धातुओं के द्वारा सबसे अधिक पर्यावरण प्रदूषण एक पर जा प्रक्रिया है, हालांकि सोने के साथ ही कई अन्य कीमती और भारी धातु, खनन गतिविधियों के माध्यम से, पतला सांद्रता में औद्योगिक अपशिष्ट के माध्यम से वातावरण में जारी है, और अपशिष्ट निपटान 7,8,10 रहे हैं मुख्य रूप से तकनीकी गतिविधियों की वजह से। यह प्राकृतिक पारिस्थितिक तंत्र का एक महत्वपूर्ण हस्तक्षेप की ओर जाता है और संभावित मानव स्वास्थ्य के 9 धमकी सकता है। इन नकारात्मक परिणामों को जानने नई तकनीकों औद्योगिक अपशिष्ट से धातु रीसाइक्लिंग में दूषित पारिस्थितिक तंत्र और सुधार से धातुओं को दूर करने के लिए खोज को बढ़ावा देता है। वर्षा या आयन एक्सचेंज की तरह अच्छी तरह से स्थापित भौतिक-रासायनिक विधियों विशेष रूप से उच्च में, इतना प्रभावी नहीं हैंLy समाधान 7,8,11 पतला। Biosorption, या तो जीवित या मृत बायोमास के साथ, अपशिष्ट उपचार 10,12 के लिए एक आकर्षक विकल्प है। इस तरह के जैविक सामग्री के उपयोग के जहरीले रसायनों की खपत को कम कर सकते हैं। कई सूक्ष्मजीवों जमा या धातुओं स्थिर करने के लिए वर्णित किया गया है। उदाहरण के लिए, Lysinibacillus sphaericus की कोशिकाओं (एल sphaericus) जेजी-A12 कीमती धातुओं के लिए उच्च बाध्यकारी क्षमता से पता चला है जैसे, पीडी (द्वितीय), पंडित (द्वितीय), Au (तृतीय), और पंजाब जैसे अन्य विषाक्त धातुओं (द्वितीय) या यू (छठे) 4,13, सीआर (VI) के लिए 14 बेसिलस megaterium की कोशिकाओं, ए.यू. के लिए पंडित (द्वितीय) और पी.डी. (द्वितीय) 15, और Chlorella अभद्र लिए Saccharomyces cerevisiae की कोशिकाओं (तृतीय) और यू (छठे) 16 17। Au तरह पिछले धातुओं के बंधन (तृतीय), (द्वितीय) ने भी Desulfovibrio के लिए सूचित किया गया है पीडी (द्वितीय), और पं 18 और एल के लिए desulfuricans sphaericus जेजी-B53 19,20। फिर भी, न अलएल रोगाणुओं धातुओं की उच्च मात्रा में बाँध और sorptive सामग्री के रूप में उनके आवेदन सीमित 12,21 है। इसके अलावा, बाध्यकारी क्षमता धातु जैसे विभिन्न मापदंडों, सेल रचना, इस्तेमाल जैव घटक, या पर्यावरण और प्रयोगात्मक शर्तों (पीएच, आयनिक शक्ति, तापमान आदि) पर निर्भर करता है। पृथक सेल की दीवार के टुकड़े 22,23 के अध्ययन, झिल्ली लिपिड, पेप्टीडोग्लायकन, प्रोटीन, या अन्य घटकों की तरह, परिसर का निर्माण पूरे कोशिकाओं 8,21 की प्रक्रियाओं को बाध्यकारी धातु को समझने के लिए मदद करता है।
इस अध्ययन में पर ध्यान केंद्रित सेल घटकों एस-परत प्रोटीन होते हैं। एस-परत प्रोटीन कई बैक्टीरिया और आर्किया के बाहरी सेल लिफाफा के हिस्से हैं, और वे के बारे में 15 का गठन – इन जीवों की कुल प्रोटीन द्रव्यमान का 20%। पर्यावरण के लिए पहला इंटरफेस के रूप में, इन सेल यौगिकों दृढ़ता से बैक्टीरियल sorption गुण 3 प्रभावित करते हैं। आणविक भार चालीस से लेकर के साथ एस-परत प्रोटीनकेडीए के सैकड़ों कोशिका के भीतर उत्पादन कर रहे हैं, लेकिन बाहर इकट्ठा कर रहे हैं करने के लिए वे लिपिड झिल्ली या polymeric सेल दीवार घटकों पर परतों के रूप में सक्षम रहे हैं। पृथक करने के बाद, लगभग सभी एस-परत प्रोटीन अनायास इंटरफेस में, या तलीय या ट्यूब संरचनाओं की तरह 3 बनाने सतहों पर निलंबन में स्वयं को इकट्ठा करने के लिए आंतरिक संपत्ति है। प्रोटीन monolayer की मोटाई बैक्टीरिया पर निर्भर करता है और 5 की एक सीमा के भीतर है – 25 एनएम 24। सामान्य में, का गठन एस-परत प्रोटीन संरचनाओं 35 एनएम 3,24 करने के लिए एक परोक्ष (P1 या p2), वर्ग (पी 4), या हेक्सागोनल (पी 3 या पी 6) 2.5 की जाली स्थिरांक के साथ समरूपता हो सकता है। जाली गठन द्विसंयोजक फैटायनों पर निर्भर है और मुख्य रूप से सीए 2 25,26, बदचलन, जे एट अल पर कई मामलों में हो रहा है। एस-परत प्रोटीन आधारित इंजीनियर Nanostructures में औद्योगिक अनुप्रयोगों के लिए nanocomposites आधारित। (एड्स Tijana जेड ग्रोव और Aitziber एल Cortajarena) (स्प्रिंगर, 2016 (प्रस्तुत))। फिर भी, विशेष रूप से इस तरह के सीए 2 और 2 मिलीग्राम + के रूप में द्विसंयोजक फैटायनों मोनोमर तह, मोनोमर-मोनोमर बातचीत, एक जाली के गठन, और विभिन्न धातुओं की भूमिका की पूरी प्रतिक्रिया झरना, अभी भी पूरी तरह से समझ नहीं रहे हैं।
ग्राम पॉजिटिव तनाव एल 27 (नए वंशावली वर्गीकरण के बाद बेसिलस sphaericus से नाम) sphaericus जेजी-B53 यूरेनियम खनन अपशिष्ट ढेर "Haberland" (Johanngeorgenstadt, Saxony, जर्मनी) 4,28,29 से अलग किया गया था। अपने कार्य एस-परत प्रोटीन (Slp1) एक वर्ग जाली, 116 केडीए 30 के एक आणविक वजन, और बैक्टीरिया कोशिकाओं 31 रहने पर ≈ 10 एनएम की मोटाई के पास। पिछले अध्ययनों में, लगभग 10 एनएम की मोटाई के साथ एक बंद और स्थिर प्रोटीन की परत की इन विट्रो गठन कम से कम 10 मिनट 19 में हासिल की थी। संबंधित तनाव एल sphaericus JG-A12 भी "Haberland" ढेर से एक को अलग, उच्च धातु बाध्यकारी क्षमता के पास है और इसकी पृथक एस-परत प्रोटीन Au जैसे कीमती धातुओं के लिए एक उच्च रासायनिक और यांत्रिक स्थिरता और अच्छा sorption दरों दिखाया गया है (तृतीय), पंडित (द्वितीय), और पी.डी. (द्वितीय) 4,32,33। कीमती धातुओं के बंधन यह कम या ज्यादा विशिष्ट कुछ धातुओं के लिए है और बहुलक के बाहरी और भीतरी प्रोटीन की सतह पर और अपने pores में कार्य समूहों, आयनिक शक्ति की उपलब्धता, और पीएच मूल्य पर निर्भर करता है। , OH-, पीओ 4 – -, अतः 4 – और तो- प्रोटीन द्वारा धातु बातचीत के लिए प्रासंगिक कार्य समूहों COOH-, राष्ट्रीय राजमार्ग 2 हैं। सिद्धांत रूप में, धातु बाध्यकारी क्षमता अनुप्रयोगों, बदचलन, जे एट अल की एक व्यापक स्पेक्ट्रम खुला। एस-परत प्रोटीन आधारित इंजीनियर Nanostructures में औद्योगिक अनुप्रयोगों के लिए nanocomposites आधारित। (एड्स Tijana जेड ग्रोव और Aitziber एल Cortajarena) (स्प्रिंगर, 2016 (प्रस्तुत))। उदाहरण के लिए, के रूप में हटाने या वसूली के लिए biosorptive घटकोंभंग विषाक्त या बहुमूल्य धातुओं की, संश्लेषण या नियमित रूप से संरचित धातु नैनोकणों (एनपीएस) कटैलिसीस के लिए, और जैव-संवेदी परतों 3,5,18,33 जैसे अन्य जैव इंजीनियर सामग्री का परिभाषित बयान के लिए टेम्पलेट्स। Au की तरह नियमित रूप से व्यवस्थित एनपी सरणियों (0) -NPs सीओ ऑक्सीकरण 34-37 के लिए आणविक इलेक्ट्रॉनिक्स और biosensors, अति उच्च घनत्व भंडारण उपकरणों, और उत्प्रेरक से लेकर प्रमुख अनुप्रयोगों के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। ऐसे आवेदनों और इन सामग्रियों के स्मार्ट डिजाइन के विकास अंतर्निहित धातु बाध्यकारी तंत्र की एक गहरी समझ जरूरी है।
इस तरह के जैव आधारित सामग्री के विकास के लिए एक शर्त बायोमोलिक्यूल और तकनीकी सतह 38,39 के बीच एक अंतरफलक परत के विश्वसनीय कार्यान्वयन है। उदाहरण के लिए, polyelectrolytes एस-परत प्रोटीन 39 की recrystallization के लिए एक इंटरफेस परत के रूप में इस्तेमाल किया गया है परत-दर-परत (LbL) तकनीक 40,41 के साथ इकट्ठे </> समर्थन। इस तरह के एक इंटरफेस एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और मात्रात्मक रास्ते में प्रोटीन कोटिंग प्रदर्शन करने के लिए एक अपेक्षाकृत आसान तरीका प्रदान करता है। साथ और चिपकने वाला प्रमोटरों के साथ संशोधन के बिना विभिन्न प्रयोगों प्रदर्शन करके, यह कोटिंग कैनेटीक्स, परत स्थिरता, और biomolecules 19,42, बदचलन, जे एट अल के साथ धातुओं की बातचीत के बारे में बयान करना संभव है। एस-परत प्रोटीन आधारित इंजीनियर Nanostructures में औद्योगिक अनुप्रयोगों के लिए nanocomposites आधारित। (एड्स Tijana जेड ग्रोव और Aitziber एल Cortajarena) (स्प्रिंगर, 2016 (प्रस्तुत))। हालांकि, प्रोटीन सोखना और प्रोटीन सतह बातचीत के जटिल तंत्र पूरी तरह से समझ नहीं है। खास तौर पर रचना, पैटर्न अभिविन्यास, और कोटिंग घनत्व के बारे में जानकारी अभी भी लापता है।
अपव्यय निगरानी (QCM-डी) तकनीक के साथ क्वार्ट्ज क्रिस्टल Microbalance एक प्रोटीन सोखना, कोटिंग कैनेटीक्स के अध्ययन के लिए उपकरण, और बातचीत के समर्थक के रूप में हाल के वर्षों में ध्यान आकर्षित किया हैनैनोमीटर स्तर 19,43-45 पर उपकर। इस तकनीक को वास्तविक समय में बड़े पैमाने पर सोखना की विस्तृत पता लगाने के लिए अनुमति देता है, और प्रोटीन lattices 19,20,42,46-48 पर प्रोटीन स्वयं कोडांतरण की प्रक्रिया और कार्यात्मक अणुओं के युग्मन के लिए एक संकेतक के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है। इसके अलावा, QCM-डी माप प्राकृतिक जैविक शर्तों के तहत प्रोटीन की परत के साथ धातु बातचीत प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए संभावना खुला। हाल के एक अध्ययन में, यूरोपीय संघ की तरह चयनित धातुओं के साथ एस-परत प्रोटीन की बातचीत (तृतीय), Au (तृतीय), पीडी (द्वितीय), और पंडित (द्वितीय) QCM-डी 19,20 के साथ अध्ययन किया गया है। adsorbed प्रोटीन की परत ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया की कोशिका दीवार का एक सरल मॉडल के रूप में सेवा कर सकते हैं। इस एकल घटक के अध्ययन धातु बातचीत का एक गहरी समझ के लिए योगदान कर सकते हैं। हालांकि, पूरी तरह QCM-डी प्रयोगों सतह संरचनाओं और प्रोटीन करने के लिए धातु के प्रभाव के बारे में बयान की अनुमति नहीं है। अन्य तकनीक इस तरह की जानकारी प्राप्त करने के लिए आवश्यक हैं। एक पीओएससंरचनात्मक गुणों पर इमेजिंग जैव nanostructures के लिए sibility और प्राप्त जानकारी के परमाणु शक्ति माइक्रोस्कोपी (AFM) है।
प्रस्तुत अध्ययन का उद्देश्य एल की विशेष Slp1 में, ((0) -NPs एयू (तृतीय) और एयू) एस-परत प्रोटीन के लिए सोने की sorption जांच करने के लिए था sphaericus जेजी-B53। आईसीपी एमएस का उपयोग कर 5.0 और QCM-डी का उपयोग कर स्थिर एस परतों के साथ – प्रयोगों 2.0 की एक पीएच रेंज में बैच पैमाने पर निलंबित प्रोटीन के साथ किया गया। इसके अतिरिक्त, जाली स्थिरता पर धातु नमक के घोल के प्रभाव के बाद के AFM के अध्ययन के साथ जांच की गई। इन तकनीकों के संयोजन विशिष्ट धातु समानताएं के बारे में पूरी बैक्टीरियल कोशिकाओं पर घटनाओं बाइंडिंग के बारे में और अधिक सीखने के लिए एक उपकरण के रूप में इन विट्रो धातु बातचीत की प्रक्रिया का एक बेहतर समझ के लिए योगदान देता है। यह ज्ञान न केवल पर्यावरण संरक्षण के लिए धातुओं की वसूली के लिए लागू फिल्टर सामग्री के विकास और पुनः के संरक्षण के लिए महत्वपूर्ण है49, बल्कि विभिन्न तकनीकी अनुप्रयोगों के लिए उच्च आदेश दिया धातु एनपीएस के सरणियों के विकास के लिए सूत्रों का कहना है।
इस काम में विभिन्न विश्लेषणात्मक तरीकों का एक संयोजन का उपयोग कर जांच की गई एस-परत प्रोटीन के लिए एयू के बंधन का अध्ययन किया। विशेष रूप से, एयू के बंधन खनन पानी या प्रक्रिया के समाधान से एयू की वसूली के ल?…
The authors have nothing to disclose.
वर्तमान कार्य आंशिक रूप से BMWi और BMBF-परियोजना "Aptasens" (BMBF / डीएलआर 01RB0805A) द्वारा वित्त पोषित IGF-परियोजना "एस चलनी" (490 ZBG / 1) द्वारा वित्त पोषित किया गया। AFM के अध्ययन के दौरान और एक देशी अंग्रेजी वक्ता के रूप में पांडुलिपि पढ़ने के लिए एरिक वी जॉनस्टोन के लिए अपने बहुमूल्य मदद के लिए टोबियास जे गुंठर के लिए विशेष धन्यवाद। इसके अलावा, इस पत्र के लेखक (आईसीपी एमएस माप में सहायता के लिए संसाधन पारिस्थितिकीय के लिए संस्थान से) Aline रिटर और सबरीना Gurlit को धन्यवाद देना चाहूंगा, Manja वोगेल, नैन्सी उंगेर, करेन ई Viacava और Helmholtz-संस्थान के समूह जैव प्रौद्योगिकी संसाधन प्रौद्योगिकी के लिए Freiberg।
equiment and software | |||
Bioreactor, Steam In Place 70L Pilot System | Applikon Biotechnology, Netherlands | Z6X | Including dO2, pH sensors of Applikon Biotechnology and BioXpert software V2 |
Noninvasive Biomass Monitor BugEye 2100 | BugLab, Concord (CA), USA | Z9X | — |
Spectrometer Ultrospec 1000 | Amersham Pharmacia Biotech, Great Britain | 80-2109-10 | Company now GE Healthcare Life Sciences |
MiniStar micro centrifuge | VWR, Germany | 521-2844 | For centrifugation of cultivation samples |
Research system microscope BX-61 | Olympus Germany LLC, Germany | 037006 | Microscope in combination with imaging software |
Cell^P (version 3.1) | Olympus Soft Imaging Solutions LLC, Münster, Germany | — | together with microscope |
Powerfuge Pilot Separation System Serie 9010-S | Carr Centritech, Florida, USA | 9010PLT | For biomasse harvesting |
T18 basic Ultra Turrax | IKA Labortechnik, Germany | 431-2601 | For flagella removal and sample homogenization |
Sorvall Evolution RC Superspeed Centrifuge | Thermo Fisher Scientific, USA | 728411 | Used within protein isolation |
Mobile high shear fluid processor, M-110EH-30 Pilot | Microfluidics, Massachusetts, USA | M110EH30K | Used for cell rupture |
Alpha 1-4 LSC Freeze dryer | Martin Christ Freeze dryers LLC, Osterode, Germany | 102041 | — |
UV-VIS spectrophotometry (NanoDrop 2000c) | Thermo Fisher Scientific, USA | 91-ND-2000C-L | For determination of protein concentration |
Mini-PROTEAN vertical electrophoresis chamber | Bio-Rad Laboratories GmbH, Munich, Germany | 165-3322 | For SDS-PAGE |
VersaDoc Imaging System 3000 | Bio-Rad Laboratories GmbH, Munich, Germany | 1708030 | Used for imaging of SDS-PAGE gels |
ICP-MS Elan 9000 | PerkinElmer, Waltham (MA), USA | N8120536 | For determination of metal concentration |
Zetasizer Nano ZS | Malvern Instruments, Worcestershire United Kingdom | ZEN3600 | For determination of nanoparticle size |
Q-Sense E4 device | Q-Sense AB, Gothenburg, Sweden | QS-E4 | ordered via LOT quantum design (software included with E4 platform) |
Q-Soft 401 (data recording) | Q-Sense AB, Gothenburg, Sweden | ||
Q-Tools 3 (data evaluation and modelling) | Q-Sense AB, Gothenburg, Sweden | ||
QCM-D flow modules QFM 401 | Q-Sense AB, Gothenburg, Sweden | QS-QFM401 | ordered via LOT quantum design |
QSX 303 SiO2 piezoelectric AT-cut quartz sensors | Q-Sense AB, Gothenburg, Sweden | QS-QSX303 | ordered via LOT quantum design |
Ozone cleaning chamber | Bioforce Nanoscience, Ames (IA), USA | QS-ESA006 | ordered via LOT quantum design |
Atomic Force Microscope MFP-3D Bio AFM | Asylum Research, Santa Barbara (CA), USA | MFP-3DBio | AFM measurements and imaging software |
Asylum Research AFM Software AR Version 120804+1223 | Asylum Research, Santa Barbara (CA), USA | — | imaging software included in Cat. No. MFP-3DBio |
Igor Version Pro 6.3.2.3 Software | WaveMetrics, Inc., USA | — | imaging software included in Cat. No. MFP-3DBio |
BioHeater | Asylum Research, Santa Barbara (CA), USA | Bioheater | Sample heater for AFM measurements |
Biolever mini cantilever, BL-AC40TS-C2 | Olympus Germany LLC, Germany | BL-AC40TS-C2 | Prefered cantilever for AFM measurements |
WSxM 5.0 Develop 6.5 (2013) | Nanotec Electronica S.L. , Spain | freeware | Software for AFM analysis |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Detergents and other equiment | |||
Calcium chloride Dihydrate (CaCl2 ∙ 2H2O) | Merck KGaA | 1.02382 | — |
acidic acid, 100 %, p.A. | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 3738.5 | Danger, flammable and corrosive liquid and vapour. Causes severe skin burns and eye damage. |
Antifoam 204 | Sigma-Aldrich Co. LLC. | A6426 | For foam suppression |
bromophenol blue, sodium salt | Sigma-Aldrich Co. LLC. | B5525 | — |
Coomassie Brilliant Blue R (C45H44N3NaO7S2) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 3862.1 | — |
Deoxyribonuclease II from porcine spleen | Sigma-Aldrich Co. LLC. | D4138 | Typ IV , 2,000-6,000 Kunitz units/mg protein |
Ethanol, 95% | VWR, Germany | 20827.467 | Danger, flammable |
glycerine, p.A. | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 3783.1 | — |
Gold(III) chloride trihydrate (HAuCl4 ∙ 3H2O) | Sigma-Aldrich Co. LLC. | 520918 | Danger |
Guanidine hydrochloride (GuHCl) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 0037.1 | — |
Hellmanex III | Hellma GmbH & Co. KG | 9-307-011-4-507 | — |
Hydrochloric acid (HCl) (37%) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 4625.2 | Danger; Corrosive, used for pH adjustment |
Lysozyme from chicken egg white | Sigma-Aldrich Co. LLC. | L6876 | Lyophilized powder, protein =90 %, =40,000 units/mg protein (Sigma) |
Magnesium chloride Hexahydrate (MgCl2 ∙ 6H2O) | Merck KGaA | 1.05833 | — |
Magnetic stirrer with heating, MR 3000K | Heidolph Instruments GmbH & Co.KG, Germany | 504.10100.00 | Standard stirrer within experiment |
NB-Media DM180 | Mast Diagnostica GmbH | 121800 | — |
Nitric acid (HNO3) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | HN50.1 | Danger; Oxidizing, Corrosing |
PageRuler Unstained Protein Ladder | ThermoScientific-Pierce | 26614 | — |
Poly(sodium 4-styrenesulfonat) (PSS) | Sigma-Aldrich Co. LLC. | 243051 | Average Mw ~70,000 |
Polyethylenimine (PEI), branched | Sigma-Aldrich Co. LLC. | 408727 | Warning; Harmful, Irritant, Dangerous for the environment; average Mw ~25,000 |
Potassium carbonate anhydrous (K2CO3) | Sigma-Aldrich Co. LLC. | 60108 | Warning; Harmful |
Ribonuclease A from bovine pancreas | Sigma-Aldrich Co. LLC. | R5503 | Type I-AS, 50-100 Kunitz units/mg protein |
Sodium azide (NaN3) | Merck KGaA | 106688 | Danger; very toxic and Dangerous for the environment |
Sodium chloride (NaCl) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 3957.2 | — |
Sodium dodecyl sulfate (SDS) | Sigma-Aldrich Co. LLC. | L-5750 | Danger; toxic |
Sodium hydroxide (NaOH) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 6771.1 | Danger; Corrosive, used for pH regulation within cultivation and pH adjustment |
Spectra/Por 6, Dialysis membrane, MWCO 50,000 | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 1893.1 | — |
Sulfuric acid (H2SO4) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | HN52.2 | Danger; Corrosive, used for pH regulation within cultivation |
Tannic acid (C76H52O46) | Sigma-Aldrich Co. LLC. | 16201 | — |
TRIS HCl (C4H11NO3HCl) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 9090.2 | — |
Tri-sodium citrate dihydrate (C6H5Na3O7 ∙ 2H2O) | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 3580.2 | — |
Triton X-100 | CARL ROTH GmbH+CO.KG | 3051.3 | Warning; Harmful, Dangerous for the environment |
VIVASPIN 500, 50.000 MWCO Ultrafiltration tubes | Sartorius AG | VS0132 | — |
β-mercaptoethanol | Sigma-Aldrich Co. LLC. | M6250 | Danger, toxic |