Summary

마우스의 복부 유착의 창조

Published: August 27, 2016
doi:

Summary

Abdominal adhesions that form after surgery are a major cause of pain, infertility, and hospitalization and reoperation for small bowel obstruction. Our surgical procedure for creating abdominal adhesions in mice is a reliable tool to study the mechanisms underlying the formation of adhesions.

Abstract

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or intraabdominal infection. The precise mechanisms underlying adhesion formation are poorly understood. Many compounds and physical barriers have been tested for their ability to prevent adhesions after surgery with varying levels of success. The mouse and rat are important models for the study of abdominal adhesions. Several different techniques for the creation of adhesions in the mouse and rat exist in the literature. Here we describe a protocol utilizing abrasion of the cecum with sandpaper and sutures placed in the right abdominal sidewall. The mouse is anesthetized and the abdomen is prepped. A midline laparotomy is created and the cecum is identified. Sandpaper is used to gently abrade the surface of the cecum. Next, several figure-of-eight sutures are placed into the peritoneum of the right abdominal sidewall. The abdominal cavity is irrigated, a small amount of starch is applied, and the incision is closed. We have found that this technique produces the most consistent adhesions with the lowest mortality rate.

Introduction

복부 유착은 일반적으로 수술 또는 복강 내 감염에 이어 염증에 반응하여 복부 흉터 조직 형성의 형태이다. 유착 만성 복통 및 불임의 주요 원인이며, 소장 폐쇄 (1)의 가장 흔한 원인이다. 유착의 존재는 제 복부 조작이 더 어려운 수행 합병증의 가능성이 증가한다.

년간의 연구에도 불구하고, 유착의 형성을 기본 메커니즘은 제대로 이해 남아 있습니다. 복막 표면 초기 부상 다음 장과 같이 복벽 (3)의면을 결합하는 혈전 형성 피브린이 풍부한 유체의 삼출을 야기하는 것으로 알려져있다. 이후, 섬유 아세포 등의 세포 접착 공간으로 이전 및 결합 조직 (4)을 분비. 세 개월간 밀착성 혈관과 신경을 개발하여 성숙 <suP> 5.

몇몇 상업적 제품은 복부 수술 (예 Seprafilm) 후 유착 형성을 줄일 수 있도록 설계되어있는 것. 이 모든 제품의 기계적 장벽의 역할과 대장의 ​​루프와 복부 벽 6,7 사이의 물리적 접촉을 방지하여 유착 형성을 중지합니다. 외과 접착 배리어 유착 (8)의 형성을 감소시키는 대조 연구로부터의 증거에도 불구하고, 많은 외과의는 일화 기계적 장벽 제품의 효과 실망되었다.

현재 유착 형성에 관여하는 정확한 과정이 제대로 이해하고 있다는 사실을 반영하는 어떤 약물 계 항 – 부착 요법은 존재하지 않는다. 특히 유착 형성에 관여하는 이벤트의 개선 된 이해를 필요 유착 형성에 관여하는 세포 또는 분자 제제를 대상으로하는 치료법 개발. 여러 그룹들 유착 형성 9-11에 대한 중요 할 수있다 분자 경로를 확인했다. 동물 모델은 유착 형성을 연구하기위한 최상의 환경을 제공한다. 많은 연구는 여러 동물, 특히 쥐와 마우스 6,12-14에 부착 수술 생성을 설명하는 발표되었다. 마우스 및 형질 전환 마우스 및 마우스 기반 항체의 폭 넓은 가용성 섬유증을 공부하고 우리의 경험을 감안할 때, 우리는 유착의 연구를위한 우리의 모델로 마우스를 선택했다. 여기서, 우리는 우리가 재현성 및 신뢰성 마우스의 복부 유착을 만들기 위해 개발 한 기술을보고합니다.

Protocol

다음 프로토콜은 스탠포드 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인을 연구 동물의 사용과 관련된 모든 기관 윤리 지침을 준수하고 있습니다. 복부 유착 1. 창조 일주 전 과정에 항생제 우 다이어트에 마우스를 시작합니다. 수술 악기와 사전 따뜻한 식염수 관개 솔루션을 압력솥. 2 % 흡입 이소 플루 란을 이용하여 마우스를 마취. 짧은 ?…

Representative Results

수술, 맹장 가능성이 상승 대장, 간, 작은 창자의 루프 후 7 일에서 오른쪽 양면 복부 벽에 부착해야한다. (그림 8) 절제된 조직은 임베디드 및 절단 및 우수한 조직 학적 슬라이드를 보장 할 수 있습니다. (그림 11, 12) 절차가 적절히 수행되면, 마우스의 100 % 이레에서 상당한 유착을 가져야한다. 사?…

Discussion

이 과정에서 중요한 단계는 다음과 같습니다 철저하게, 천공의 원인이되는 복부 측벽에 봉합을 배치하고, 전분의 오른쪽 금액을 적용하지 않고 맹장을 연마. 만 맹장, 또는 창자의 작은 특정 부분에 사포을 적용합니다. 소장 대량에 샌드 페이퍼의 광범위한 사용은 상당한 장폐색증을 유발하는 경향이있다. 표면이 거칠어집니다 충분한 힘과 맹장을 연마하는데주의를 기울여야하지만, 벽 눈물이 ?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

CDM은 외과 의사의 미국 대학 (ACS) 주민 연구 장학금에 의해 지원되었다. MSH는 캘리포니아 재생 의학 연구소 (CIRM) 임상 연구원 교육 보조금 TG2-01159에 의해 지원되었다. MSH, HPL, 그리고 MTL은 악안면 외과의 미국 사회 (ASMS) / 악안면 외과 재단 (MSF) 연구 그랜트 수상에 의해 지원되었다. HPL은 NIH 보조금 R01 GM087609와 안토니 슈 경의를 잉그리드 라이와 빌 슈의 선물에 의해 지원되었다. HPL 및 MTL은 소아 재생 의학에 대한 Hagey 연구소와 오크 재단에 의해 지원되었다. MTL는 건 / 올리비에 기금에 의해 지원되었다.

Materials

Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" Fisher Scientific 14-206-62
Polylined Sterile Field, 18" x 24" Busse Hospital Disposables 696 Cut a rectangular hole of the appropriate size
Isothesia isoflurane Henry Schein  050033
Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" Fisher Scientific 22-415-469
Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube Dechra Veterinary Products NDC 17033-211-38
Nair depilatory cream Church & Dwight Co. 22339-05
Buprenex buprenorphine  0.3 mg/mL Reckitt Benckiser Pharmaceuticals Inc. NDC 12496-0757-5
1 cc insulin syringe, 27G Becton  Dickinson 329412
Povidone Iodine Prep Solution Medline MDS093944H
Webcol alcohol prep swabs Covidien 6818
General-Purpose Labarotory Labeling tape VWR 89097-912
BioGel PI surgical gloves Mölnlycke Health Care ALA42675Z
Micro Forceps with teeth Roboz RS-5150
Fine scissors- sharp Fine Science Tools 14060-09
Straight serrated forceps Fine Science Tools 11050-10
Castro-Viejo needle driver Fine Science Tools 12565-14
100 grit 1/4 sheet sandpaper ACE Hardware 1010446 Cut into strips
4-0 silk suture, 30", SH needle Ethicon K831
7-0 PDS II absorbable monofilament suture, 30", BV-1 needle Ethicon Z135 Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures.
Rice starch MP Biomedicals 102955
0.9% Sodium Chloride Irrigation Baxter BHL2F7121 Warm to 37° C prior to use
10 mL syringe Becton Dickinson 309604
6-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", RB-1 taper needle Ethicon J212H
6-0 Ethilon nylon monofilament  suture, 18", P-3 needle,  Ethicon 1698G
Tegaderm Transparent Film Dressing Frame Style, 6 cm x 7 cm 3M 1624W Cut in half lengthwise

References

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Cite This Article
Marshall, C. D., Hu, M. S., Leavitt, T., Barnes, L. A., Cheung, A. T., Malhotra, S., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. Creation of Abdominal Adhesions in Mice. J. Vis. Exp. (114), e54450, doi:10.3791/54450 (2016).

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