Abstract
自由溶液的毛细管电泳（CE）在溶液中，通过电场的应用分离分析物，通常电荷的化合物。相对于其他的分析分离技术，如色谱法，CE是便宜，耐用和有效不需要样品制备（对于一些复杂的天然基质或聚合物样品）。 CE是快速和可用于实时跟踪（ 例如 ，化学反应动力学）的混合物的演进，作为用于分离的化合物中观察到的信号是直接正比于它们在溶液中的数量。
这里，CE的效率表现出用于监测肽的共价接枝到用于随后的生物医学应用的壳聚糖薄膜。脱乙酰壳多糖的抗微生物和生物相容特性使其用于生物医学应用，如细胞生长底物的有吸引力的材料。共价嫁接肽RGDS（精氨酸 - 甘氨酸 -天冬氨酸 - 丝氨酸）到脱乙酰壳多糖膜的表面旨在改善细胞附着。从历史上看，色谱法和氨基酸分析已经被用于提供接枝肽的量的直接测量。然而，通过CE提供样品制备的快速分离和不存在下使肽接枝过程同样准确但实时监控。 CE是能够分离和量化反应混合物的不同组成部分：（非接枝）肽和化学偶联剂。在这种方式中使用的CE导致下游应用改进的薄膜。
通过固态NMR（核磁共振）光谱的壳聚糖膜进行了表征。这种技术是比较耗时，并且不能在实时应用，但产生的肽的直接测量，从而验证了CE技术。
Introduction
自由溶液的毛细管电泳（CE）是分隔在根据它们的电荷对摩擦比1,2解化合物的技术。电荷-尺寸比通常在文献中所提到的，但这种简化并不适用于聚电解质，其中包括在这项工作中的多肽，并且也显示出不适合小有机分子3。 CE不同于其它分离技术，因为它不具有固定相，仅一个背景电解质（通常是缓冲液）。这使得该技术将在其分析大范围样本的复杂基质4，如植物纤维5，发酵酿造6接枝到合成聚合物7，食品样品8和难溶肽9无需繁琐的样品制备和能力强劲纯化。这是一个复杂的聚电解质具有的溶解问题（S特别显著UCH壳聚糖10和结冷胶11），因此，存在如凝集或在溶液中沉淀，并已成功地分析没有样品过滤。此外，早餐谷类食品糖的分析涉及的早餐麦片样品颗粒注入样品中水8沉淀。这还延伸至支链聚电解质或共聚物12,13的分析。大量的工作也已在CE技术的发展专门为蛋白质的蛋白质组学14，天然或合成的肽15和蛋白质和肽16的微芯片的分离的手性分离的分析完成。由于分离和分析发生在毛细管，样品只有小体积和溶剂被用于使CE为具有比其它分离技术包括色谱法5,6,17较低的运行成本。由于通过CE分离速度快，它允许monito反应动力学的环。这表现在肽的接枝改进细胞粘附18脱乙酰壳多糖膜的情况下。
脱乙酰壳多糖是从几丁质的N- -deacetylation衍生的多糖。脱乙酰壳多糖膜可用于各种生物医学应用，例如生物粘合剂19和细胞生长基板18,20，由于脱乙酰壳多糖的生物相容性21。细胞附着到特定的细胞外基质蛋白，如纤连蛋白，胶原和层粘连蛋白，直接关系到细胞22的存活。值得注意的是，不同的细胞类型往往需要连接到不同的细胞外基质蛋白生存和正常功能。结果表明细胞附着于壳聚糖膜，通过纤维连接蛋白23的嫁接得到加强;然而，制备，纯化和这样大蛋白质的接枝是在经济上不可行。或者一系列小肽甲肝È被证明能够模仿大胞外基质蛋白的性质。例如，肽如纤连蛋白模拟物的RGD（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）和RGDS（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸）已经被用于促进和增加细胞附着24。 RGDS到壳聚糖膜的共价嫁接导致已知附加到纤维连接蛋白在体内细胞18提高细胞附着。代较大的蛋白质喜欢和较小的肽具有相同的功能提供了一个显著成本降低纤维连接蛋白。
这里，如先前发表18进行肽接枝到壳聚糖。正如以前证明，这种方法通过使用偶联剂EDC盐酸（1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳化二亚胺）和NHS（N-羟基）官能的RGDS的羧酸是提供简单而有效的接枝接枝到壳聚糖薄膜。这种接枝方法的两个优点是，它不需要壳聚糖或肽的任何修改，并且在水性介质中进行的，以最大程度地与未来细胞培养应用18,20的兼容性。作为耦合剂和所述肽可以充电，CE是用于反应动力学的分析的合适方法。重要的是，经由CE中的反应动力学的分析，可以在接枝反应进行实时监控，并且因此能够既优化和量化接枝度。
虽然它不是常规必要，在CE分析的结果可以被离线由肽接枝到利用固体NMR（核磁共振）光谱25,26的脱乙酰壳多糖膜的直接测量验证以证明共价接枝的的肽到薄膜18。然而，随着固态NMR光谱法相比，实时分析由设置CE能够实时肽消耗，从而以评估反应的动力学的能力的定量。
上述方法是简单，并且允许肽的接枝到与接枝的程度的间接定量脱乙酰壳多糖膜的实时分析。所表现出的方法可以扩展到不同的化学反应，只要反应物或待分析可充电产品的实时定量评估。
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Protocol
1.壳聚糖膜的制备
- 称输出2克冰醋酸的，完整的100毫升的超纯水。
- 称出1.7克壳聚糖粉末，加入100毫升的2％M / M乙酸水溶液。搅拌5天，在室温下或用铝箔覆盖或在黑暗中搅拌棒和磁力搅拌板。
- 离心脱乙酰壳多糖分散液在1,076 xg离心在23℃1小时。收集用注射器上清液并丢弃沉淀物。
- 为每部影片，等分试样的10ml脱乙酰壳多糖的悬浮液成在室温下具有9厘米塑料培养皿中。离开覆盖干燥至少7天的电影。
- 用剪刀剪断干膜成1×1cm的正方形。注意：实验可在此阶段被暂停。
2.制备磷酸盐缓冲盐水的（PBS）中
- 称出8克氯化钠将0.2g氯化钾，1.44克氢二钠磷酸phate及0.24g的磷酸二氢钾。
- 溶解这些称量的化学品在800毫升的超纯水，用浓盐酸将溶液滴定至pH 7.4。
注意：实验可在此阶段被暂停。
在pH 9.2的75mM硼酸钠缓冲液3.制备
- 称取3.0915克硼酸。将其溶解于75ml超纯水中。
- 滴定硼酸溶液与氢氧化钠溶液的pH为9.2，以10 M或更高的浓度。
注意：浓缩的氢氧化钠溶液有腐蚀性，应带手套处理。 - 完全用超纯水，得到100毫升溶液中。这产生在pH 9.2的500mM硼酸钠缓冲液。
- 稀释用超纯水的500mM的硼酸钠缓冲液至75mM的硼酸钠缓冲液。注意：实验可在此阶段被暂停。
4.壳聚糖网络连接的研制LMS的接枝反应
- 冲洗在5ml PBS中进行2小时10平方壳聚糖膜（1×1厘米）在室温下在培养皿中。
- 在此期间，准备和验证的毛细管电泳仪（步骤5）。
5.编写和验证的毛细管电泳仪的
- 制备43.5厘米裸熔融石英毛细管50μm的内径（43.5厘米是总长度，有效长度的检测窗口通常为35厘米）通过在与所述设定的长度弱化毛细管的聚合物外涂层钝具则贴紧毛细管。
- 用打火机烧在从入口8.5厘米聚合物涂层创建毛细管一个窗口，它冷却后擦拭干净用乙醇。烧毛细管的涂层在每一端为用打火机几毫米，并且它冷却后擦拭干净，用乙醇。
- 地方毛细血管INSI德检测窗口，并将其在毛细管盒通过将它放置在该入口和出口相等的长度和卷绕它围绕带盒的转轴安装。然后安装在毛细管电泳仪的纸盒。
- 设置每个分离的方法的参数。在软件菜单中选择“方法”，然后“编辑整个方法”。设定温度，时间，电压，和用于分离（例如25℃，10分钟，30千伏）的小瓶中。
- 在预调节部分，设置连续刷新：10分钟，用1M氢氧化钠（在水中），5分钟用0.1M氢氧化钠（在水中），5分钟，用超纯水和5分钟，75毫硼酸钠缓冲液在一系列分析的第一方法pH为9.2。
- 用于后续的方法中，设置集在预处理部分连续刷新：1分钟用1M氢氧化钠（在水中），5分钟，75毫硼酸钠缓冲液在pH为9。2。
- 在注入部分，用于高压注射为10秒，所有的方法30毫巴压力设定参数。在分离部分中，9分钟为所有方法设置分离条件至30千伏在25℃。
注：请具体CE设备的用户手册，作为程序操作CE仪器制造商之间可能会有所不同。制备的当天1M氢氧化钠溶液。
- 注入和分离出中性内标（10％体积/体积的二甲基亚砜10微升（DMSO）中，在稀释到450微升的75mM硼酸钠缓冲液的水）。然后注入并以同样的方式分离的低聚丙烯酸酯标准（以10g∙L-1溶解在超纯水中;见材料清单）检查毛细管的有效性。在这里暂停序列，直到接枝反应准备开始。
6.嫁接到RGDS壳聚糖膜的
- 称出所述肽（1毫克RGDS）和偶联剂（3毫克EDC·HCl和2毫克NHS）。
- 在PBS中的脱乙酰壳多糖膜浸泡开始后2小时，溶解肽，并在5毫升的PBS的偶联剂。
- 取该溶液的50微升等分试样。在水中添加2微升的10％体积/体积的DMSO作为内部中性标准的等分试样。分析与CE等分（见第7步）。
- 除去5毫升的PBS用于冲洗从培养皿的脱乙酰壳多糖膜。 5 ml的溶液肽和偶联剂添加到含有脱乙酰壳多糖膜的培养皿。
- 覆盖培养皿用石蜡膜，并将其放置在室温下轨道摇床。以反应介质的50微升等分在设定的时间。
注：总的分析时间与CE为15分钟，从而将等分试样可以采取每15分钟（或每30分钟，如果两个反应并行监视， 等 ）。- 在水中添加2微升的10％体积/体积的DMSO作为内部中性标准对每个人iquot。
注：等分应该符合CE，尽快为他们取来分析（见第7步）。
- 在水中添加2微升的10％体积/体积的DMSO作为内部中性标准对每个人iquot。
- 后摇和分装去除4小时，取出从振动筛的培养皿。除去从培养皿反应介质中。加入5毫升的PBS冲洗壳聚糖薄膜。
- 从培养皿中取出PBS，漂洗用超纯水的脱乙酰壳多糖膜，并允许他们干燥过夜。除去超纯水，并在-20℃下的薄膜储存于塑料培养皿。
7.接枝反应监测使用CE
- 注射以及使用的分析条件，在部分5.2培养皿中取出后，立即反应介质的单独分装。
- 一旦分离完成漂洗用超纯水毛细管10分钟。干它通过与10分钟的空药瓶（空气）冲洗。
注：实验可以在此阶段被暂停。
8.数据TREA tment为CE
- 检查每个分离的有效性，通过检查这两个分离期间的电流和电渗流动性标记（DMSO在这种情况下）的迁移时间是类似的低聚丙烯酸酯标准分离所观察到的那些。
注：最多10-15％的变化是从约50微安和1.3分钟迁移时间值的预期电流值上可接受的（如需要更高的可重复性的电泳迁移率的值应该被用来代替迁移时间）。 - 对于每个成功的分离，通过选择一个特定的数据集，右键点击出口，并选择适当的信号输出从毛细管电泳软件的原始数据。
- 转换由CE记录的原始数据（表示为UV吸收为迁移时间的函数）。转换X轴（迁移时间t 米 ）到下面的等式1的电泳迁移率μ：
N + 1“SRC =”/文件/ ftp_upload / 54549 / 54549eq1.jpg“/>（1）
其中，L d是长度到检测器中，L t是毛细管的总长度，V是电压，而t EO为中性物种（在此情况下，DMSO的内标）27的迁移时间。
转换的原始数据（吸光度在AU）的Y轴的电泳迁移率W（μ）的分布下列公式2：28
（2）
（2） 9.肽接枝膜18的附加特性
- 将肽接枝壳聚糖膜，在自己周围转了转，采用4 mm固态核磁共振转子。填充转子用磷酸盐缓冲盐水溶胀膜，并关闭转子。等待了几个小时。
- 13分析了电影</ SUP> C-NMR光谱18。
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Representative Results
CE非常适合监测肽（ 例如 ，RGDS）接枝到壳聚糖膜。合适的偶联剂包括EDC·HCl和NHS其中激活肽接枝到壳聚糖（ 图1）。 CE是能够与感兴趣的不同的分子从反应介质中分离。要分配的电泳峰，纯RGDS，EDC-HCl和NHS溶解，注入并单独分开。峰值分配后，将反应介质注入和各种反应物进行鉴定（ 图2）。的EDC·HCl反应成副产物EDH盐酸（3 - （（（乙基氨基）（羟基）亚甲基）氨基） - N，N- -dimethylpropan -1-胺）。二甲基亚砜（DMSO）作为用于在CE分离的内标。脱乙酰壳多糖中存在不溶性薄膜形式接枝实验并因此不注射或在CE中观察到的。请注意，所有的原始数据，T他记录迁移时间轴被转换成的电泳迁移率轴（等式1）和紫外吸收轴成的电泳迁移率W（μ）（式2）的分布。
作为等分试样从反应介质中取它们被放置到CE仪器和注射。该反应的程度是通过与RGDS（ 图3）相关联的峰的下降监测。它也可以看出，EDC盐酸峰随时间降低，而EDH盐酸峰增加。要注意的是，没有可从肽的副反应被分配到一个乘积信号是很重要的，因此，假定从反应介质中除去RGDS被接枝到壳聚糖膜。覆盖电泳（ 图3A）允许肽消耗从开始到反应结束的定量。但应注意的是虽然动力学18小时（ 图3B）中的初始测量，4小时被认为足以使反应进行到其最大程度。以允许量化需要的最佳注射量，以确保信噪比足够高，同时防止超载（ 图4A）和在RGDS的情况下，被要求在注射用实时防止缩聚（ 图4B可完成）。
基于CE的技术，这里描述来分析肽嫁接壳聚糖膜是快速和简单;然而，它并不直接量化接枝过程。核磁共振光谱是用来证明接枝;该测定不能实时进行（其通常需要几个小时），并需要完成后反应。前和移植后的脱乙酰壳多糖膜的定性比较显示了肽的救援人员到场成功嫁接啊的信号在70 ppm的在对应于脱乙酰壳多糖和肽（ 图5）之间的酰胺键的接枝膜的外观。
图1.计划接枝反应。显示通过EDC-HCl和RGDS的后跟其嫁接到壳聚糖的薄膜表面羧酸官能团的NHS活化化学反应方案。 请点击此处查看该图的放大版本。
图2 存在于反应介质中的物种的峰值分配。 A.分离和峰值分配的部分水解EDC的解 -HCl（粉），RGDS（红），NHS（蓝色），以及为PBS（紫色），将反应介质（黑色）。B.呈现为迁移时间的函数的反应介质（黑色）的电泳（电泳流动性应该被用来克服迁移时间可重复性差）。 请点击此处查看该图的放大版本。
图3. CE监测RGDS消费的（A），它覆盖在反应时间30分钟（紫色固体线），60分钟（品红划线），90分钟（蓝色实线），120分钟（绿色虚线）肽峰，嫁接的150分钟（红色实线）和（B）动力学完成了超过18小时的重复（方形和圆形）。PLOAD / 54549 / 54549fig3large.jpg“目标=”_空白“>点击此处查看该图的放大版本。
图 中的反应介质 4. 覆肽峰示出次优的结果 （A）的变（流体动力）注射时间：5秒（蓝线），10秒（黑线），20秒（红色线）和30秒（品红线） 。注射前在CE小瓶离开的时间较长（B）反应介质：30分钟（红色线）和90分钟（蓝线） 请点击此处查看该图的放大版本。
图5. 13壳聚糖膜的Ç肿状态核磁共振光谱。在之前的电影（黑线）的比较后（蓝线）肽嫁接。目前仅在嫁接用星号指示后记录频谱信号。 请点击此处查看该图的放大版本。
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Discussion
这里所描述的协议的简单性使得它非常适合于广泛的应用。但是，需要特别注意支付给下面的关键步骤。
正确的CE仪器准备
它以分离已知的标准之前立即未知样品的分离（以及在一系列分离的结束时），检查在毛细管和仪器在当天的有效性是重要的。这个标准可以是低聚丙烯酸酯27或已知在宽范围的迁移时间，得到多个峰的任何样品。监测目前在所有的分离和分析每一个分离中性标记的迁移是确定问题的关键步骤。在当前的平稳值不稳定电流或大的变化（超过10％-15％），可能是由于在缓冲液（pH或浓度）不一致。如果它后跟延迟migration中的中性制造者的时间也可能是由于没有被充分地清洁毛细管。所述缓冲液的pH和毛细管的10分钟，用1M氢氧化钠（新鲜制备的）的额外冲洗的常规检查可以用来防止/修正这个问题。在实验过程中，可以采用额外的清洁步骤，以确保最佳的分离，通常包括或延长一个冲洗用浓氢氧化钠水溶液以再生保险丝石英毛细管表面。
正确的数据处理
在实验结束时，进行比较的结果，当原始数据的适当的处理是必不可少的。这涉及从CE仪器（步骤8.3）中得到的X和Y轴的转换。在CE确定的迁移时间有一个相对较差的可重复性和我们推荐使用的电泳迁移率代替，导致了更好的可重复性。正确T中的意义 reating数据已经与脱乙酰壳多糖10，聚（丙烯酸）29，嵌段共聚物13的分离和表征和糖在早餐谷物检测8通过实验之间观察的迁移率比迁移时间较小的标准偏差（RSD）前面所示。此外，CE已经显示出比HPLC更健壮在单糖的复杂基质5的分离。优化的其它步骤可以包括调节所述注入量（喷射时间），以允许具有良好的灵敏度的分离，而不会引起过载会阻止定量。较短的注射时间导致灵敏度降低而延长喷射时间导致指示毛细管超载的峰形失真：10秒的喷射时间，在30毫巴（ 图4B）被认为是最佳的。
实时监控的重要性
ove_content“>此基于CE的方法的一个关键的强度是实时监测的反应的能力。这需要检测和相关的反应物的分离和/或产品（第）。此外，对于最佳的CE条件化学反应的适当的时间零，必须采取作为反应的基准的数据;这一般由在所测量出的反应物之前，为了使反应开始的这可例如进行被引入一个特定的反应物之前，前分离。的温度升高，或紫外线照射之前开始以触发反应。在肽RGDS（到脱乙酰壳多糖或到另一衬底）的接枝的情况下，所述肽能够与自身反应通过缩聚18，以产生直链低聚物或支链结构。这是因为，RGDS同时包含胺和羧酸官能团。这些肽的低聚物不具有相同的电lectrophoretic流动作为初始肽RGDS，因此可能会导致不准确的定量，通过与其他物种例如共迁移。以确保该反应介质的等分试样注入和从反应介质中（ 图4B）所采取的几分钟之内分离它是重要的。
壳聚糖膜的适当准备
当与壳聚糖膜专门处理有一些步骤来坚持。在生产的脱乙酰壳多糖膜的，膜需要留待干燥至少7天（优选更多）。如果不结束，当薄膜被放置在PBS缓冲液冲洗它们会溶解，而不是形成一种溶胀的膜，然后防止了下一个步骤。此外，现有中和该膜接枝反应以除去任何剩余的乙酸可浸出的膜，并用竞争是很重要的该肽为接枝反应18。这可以通过在稀氢氧化钠水溶液或在PBS中浸泡来完成。用作溶剂为接枝反应的缓冲液的pH也很关键：如果它是酸性太强的薄膜会部分或完全溶解。在接枝反应是很重要的，该膜能够具有与反应溶液的最大接触。因此，含有该膜，将反应混合物在培养皿被放置在振荡器上。此外，还必须防止反应混合物中以防止产生不准确quantifications不受控制浓度变化的蒸发;使用石蜡膜覆盖培养皿是有效地防止了。
在CE技术的主要限制是，单独地它不能够确认接枝过程。在上述的化学接枝过程的上下文中，肽接枝的定量是间接的。这个可通过使用互补的技术来克服诸如固态核磁共振光谱如前所述。在CE技术的其它限制包括，它需要被充电的目标化合物。因此中性物种将迁移的同时。在某些情况下，这可以，如果兴趣配合物的硼酸盐的化合物来克服。最后，如果所关注的化合物不包含除紫外其他发色团的检测如导电性，可能需要使用。这需要额外购买，需要优化导检测器。
通过CE VS其它分析方法分析肽嫁接的优势
在CE方法具有优于其它间接的方法包括高效液相色谱法（HPLC），氨基酸分析（AAA）和核磁共振光谱的直接法的几个优点。相比AAA它是一种高通量，鲁棒方法whic^ h使得它能够有效地分析复杂样品无需繁琐的样品制备。这是有利的，特别是在实时的化学反应的分析。 HPLC已用于肽接枝分析30以前使用，但它被视为仅半定量的。 CE有比HPLC一个降低运行成本，并且不需要样品过滤分析之前，最小化样品损失5的风险。虽然13 C NMR光谱法是能够直接测量感兴趣的产物，它是一种昂贵的技术，无法测量它的实时性。
这里descripted的协议提供了优化的肽接枝到壳聚糖膜的快速，有效，廉价和可靠的方法。这种新的方法因此提供显著优势剪裁相比传统使用的方法如色谱法和AAA的脱乙酰壳多糖膜的细胞附着性能。此CE方法可用于监测一个数实时其它化学反应的，通常发生在几个小时，的量，反应物/产品感兴趣可以充电的时间段反应。在这种情况下，要注意，在CE方法应之前的不同的化学反应，以允许成功分析的分析来优化然而重要的。这包括在反应前的纯反应物和产物的分析以允许它们被识别，并确保它们可以检测和分离，以及确保无污染物可能防止量化。分离可改善，总分析时间通过改变毛细管长度，缓冲液组成和电压，并有可能使用具有涂覆壁毛细管改变。该检测可以通过修改，其中样品被注入，以有利于带电的反应物的条件或通过注入样品的较大量进入毛细管得到改善。此外，来自UV检测相距其它探测器可以b使用，包括荧光，非接触电导率检测器或在CE E可耦合到质谱仪。以实时监控反应的能力使得能够如果基板是在溶液中，并能够通过CE分析在一个CE的小瓶直接进行接枝反应。这可以直接发生的CE仪器内，因为我们最近执行它为聚（丙烯酸）氨基安替接枝7此外，该方法并不限于接枝反应，但可扩展到监视各种其他化学反应。此外，该反应的监测允许反应的优化，并且还可以用来验证该反应的产物。只要感兴趣的化合物可以溶解和充电，在CE方法允许快速，廉价和坚固的分离，检测和定量。
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Disclosures
作者宣称，他们没有竞争的经济利益。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Water | Millipore | All water used in the experiment has to be of Milli-Q quality | |
| Chitosan powder (medium molecular weight) | Sigma-Aldrich | 448877 | lot MKBH1108V was used. Significant batch-to-batch variations occur with natural products such as polysaccharides |
| Acetic acid - Unilab | Ajax Finechem | 2-2.5L GL | laboratory reagent |
| Dimethylsulfoxide | Sigma-Aldrich | D4540 | laboratory reagent, slightly hazardous to skin, hazardous if ingested |
| Sodium hydroxide | Sigma-Aldrich | 221465 | laboratory reagent, corrosive |
| 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide | Sigma-Aldrich | D80002 | Irritant to skin |
| N-hydroxysuccinimide | Sigma-Aldrich | 130672 | Irritant to skin |
| Sodium chloride | Ajax Finechem | 466-500G | laboratory reagent |
| Potassium chloride - Univar | Ajax Finechem | 384-500G | analytical reagent, slight skin irritant |
| Disodium hydrogen phosphate - Unilab | Ajax Finechem | 1234-500G | laboratory reagent, slight skin irritant |
| Potassium dihydrogen phosphate - Univar | Ajax Finechem | 4745-500G | analytical reagent, slight skin irritant |
| Oligoacrylate standard | custom made | See reference for synthetic protocol: Castignolles, P.; Gaborieau, M.; Hilder, E. F.; Sprong, E.; Ferguson, C. J.; Gilbert, R. G. Macromol. Rapid Commun. 2006, 27, 42-46 | |
| Boric acid | BDH AnalR, Merck Pty Ltd | 10058 | Corrosive |
| Hydrochloric acid - Unilab | Ajax Finechem | A1367-2.5L | laboratory reagent, corrosivie |
| Fused silica tubing | Polymicro (Molex) | TSP050375 | Flexible fused silica capillary tubing with standard polyimide coating, 50 µm internal diameter, 363 µm outer diameter |
| Agilent 7100 CE | Agilent Technologies | G7100CE | Capillary electrophoresis instrument |
| Orbital shaker | IKA | KS260 | |
| Electronic balance | Mettler Toledo | MS204S | |
| Milli-Q Synthesis | Millipore | ZMQS5VF01 | Ultrapure water filtration system |
| Parafilm | Labtek | PM966 | Parrafin wax |
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