Protocol
1. Stillas Fabrication
- Grind NaCl i en laboratoriemikser i 20 min og tørk det på et varmeapparat ved 100 ° C.
- Sette den tørkede NaCl (45 g på tidspunktet) i en siktemaskin i 30 minutter ved den høyeste tilgjengelige frekvens uten forekommende i resonans. Samle seks saltfraksjoner, som strekker seg fra 500 um til 1000 um (M 500); fra 300 um til 500 um (M 300); fra 100 pm til 200 pm (M 100); fra 90 um til 100 (M 90); fra 45 um til 65 um (M 45) og til slutt M 10 med saltpartikler størrelse mindre enn 45 um som skjematisert i figur 1.
- Vakuum tørke over natten alle materialer for å unngå hydrolytiske spalting under behandlingen. For hvert materiale, velge temperatur for å maksimere graden av tørking uten vinne - i tilfellet av polymerer - glassovergangs. Derfor velger T = 90 ° C for PLA og T = 25 ° C for PEG, T = 105 ° C for NaCl.
- MatePLA, PEG og NaCl, med en vektprosentvise sammensetning av 20/5/75 henholdsvis, til en batch-blander drevet ved T = 190 ° C og n = 60 rpm, og deretter behandle dem til å oppnå en konstant verdi av moment, vanligvis etter ca. 10 minutter. Deretter hurtig samle det resulterende materiale.
- Fremstilling av de mono-lag ved å bruke en laboratoriepresse som arbeider ved 210 ° C, satte blandingene i passende sylindriske former med en diameter på 10 mm og en høyde på 3 mm og holde dem i 60 sekunder ved omgivelsestrykk og 3 minutter ved 180 bar . Deretter avkjøles blandingene ved romtemperatur, opprettholde trykket på 180 bar.
- Montering av Tre-lag via kompresjonsstøping
- Fremstille hvert enkelt lag på samme måte som den som er beskrevet i (1.5), men ved bruk av forskjellige støpeformer, det vil si med en diameter på 10 mm og en høyde på 1 mm. Til slutt, får 6 disker med en diameter på 10 mm og en høyde på 1 mm, inneholdende seks forskjellige partikkelstørrelser: M 500, M 300, M 100,
- for montering av tre-lags stillas A (TLS A), hoper seg opp M 500, M 300 og M 100 inne i det sylindriske formen og kompresjons forme dem i en laboratoriepresse som arbeider ved 210 ° C i 60 sekunder ved omgivelsestrykk og 3 minutter ved 180 bar og ble deretter avkjølt ved romtemperatur, opprettholde trykket på 180 bar.
MERK: Klargjør TSL B ved å stable på hverandre M 90, M 45 og M 10 i de samme formene, og utføre kompresjonsstøpeoperasjon ved å følge den samme prosedyre som den som benyttes for TLS A.
- Fjern disker fra de sylindriske formene og legg dem i en kokende demineralisert vannbad, uten omrøring. 3 timer etter, fjerne de resulterende porøse strukturer fra badet og la dem tørke i 12 timer ved romtemperatur i en kjemisk hette.
2. morfologisk analyse
- Vurdere morfologi av stillasene ved elektronmikroskopi.
- Bryt ned prøvene under flytende nitrogen og deretter festeprøver på en aluminiumstuss ved hjelp av et klebekarbon bånd. Til slutt, frese-bela med gull i 90 s under argonatmosfære før avbildning, for å unngå elektrostatisk utladning i løpet av testen.
3. Stillas Pore Size
- Utdype bildene innhentet ved SEM-analyse med et bildebehandlingsprogram i stand til å gjenkjenne den porestørrelsesfordeling av stillaset.
MERK: I dette arbeidet ble utført porestørrelsesfordeling analyse ved hjelp av et MATLAB-basert programvare tidligere beskrevet 33
4. Porøsitet
- Veie prøvene før utlutning og evaluere den teoretiske porøsiteten i henhold til følgende uttrykk:
MERK: M NaCl, m PEG og m PLA, er henholdsvis den teoretiske massen av NaCl, PEG, og PLA, ved å anta homogene blandinger. Than tettheter (ρ) NaCl, PEG og PLA er henholdsvis 2,16 g / cm 3, 1,12 g / cm3 e 1,24 g / cm3. - Veie prøvene etter utlutning og tørking for å vurdere den tilsynelatende tetthet av prøvene (ρ stillas), og deretter behandle den virkelige porøsiteten som den resiproke verdi av forholdet mellom den tilsynelatende tetthet av stillaset og tettheten av ikke-porøs PLA etter ved hjelp av uttrykket (2).
MERK: det uttrykker forholdet mellom det tomme volumet av stillaset, og hele volumet av stillaset (tom + full).
5. Mekaniske egenskaper
- Test prøvene i henhold til trykkmodus ved bruk av en strekkmaskin, utstyrt med en 1 kN lastcelle. Sett en konstant tøyning av 1 mm min -1.
- For å undersøke den mekaniske ytelsen av prøvene i fysiologisk miljø, utstyre dynamometer med et bad inneholdende (PBS) (pH = 7,4) ved 37 ° C og utføre testen med det samme oppsett som den som er beskrevet i punkt 5.1.
- Før hver måling i våte omgivelser, suge prøvene med PBS i en termosflaske i 5 minutter for å la PBS fylle alle porene. Deretter lar stillasene til å forbli i PBS ved 37 ° C i 15 min for å nå den innstilte punkttemperaturen.
- Bestemme grenseflate adhesjonsstyrken (IAS) mellom lagene av TL TL A og B ved hjelp av en spesialkonstruert grensestyrketestutstyr som er forbundet med en mekanisk Testing Machine å følge en fremgangsmåte som er beskrevet i litteraturen 32,34.
- Fest stillaset på riggen og sikre riktig justering med maskinens veiecelle og baseplaten. Fest stillas prøvene til aluminium test stubber ved hjelp av en høy viskositet lim og legg dem inn i utstyret for testing.
- For våt tilstand testen, hydrat prøvene i PBS i 1 time prieller for testing. Bruke en 1 kN lastcelle, under en strekkbelastning påført ved en tøyningshastighet på 1 mm min -1.
MERK: ta hensyn til at svikt kan finne sted enten ved den maksimale strekkfasthet av ett av lagene eller på grunn av delaminering ved grensesnittene. Evaluere IAS som den maksimale styrke av stress-belastningskurve.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Påvirkningen av NaCl partikkelstørrelse på pore-arkitekturen av stillasene ble bedømt kvalitativt og kvantitativt ved å undersøke morfologien av prøvene og beregning av porestørrelsesfordelingen ved bildeanalyse, henholdsvis Figur 2a -. F viser SEM mikrografer av mono-lag stillasene resulterende fra salt-utvasking av materialer som inneholder forskjellige NaCl partikkelstørrelser.
Mer i detalj, M 500 (figur 2a) viste porer med en gjennomsnittlig diameter på 500 um, sannsynligvis på grunn av brekkasje av saltpartikler med diameter større enn 500 pm under smelte blanding. Som klart synlig fra den samme figuren er pore arkitekturen karakteriseres ved et lavt antall uregelmessige porer, dårlig sammenhengende, omgitt av vegger av omtrent 10 pm. Figur 2b rapporterer morfologi M 300. I dennetilfellet porene ble funnet å ha en gjennomsnittlig diameter innenfor samme område av saltpartiklene fylt under smelteblande (300-500 um), noe som bekrefter at ingen partikkel brudd oppstod i løpet av smelteblandeprosessen. Poreveggene ble funnet å være tynnere (omtrent 5 um) enn de som ble observert i M 500 lag. M 100, (figur 2c), viser en bimodal porøs struktur, karakterisert ved et heterogent nettverk sammensatt av store porer (100-200 um) omgitt av små. Dette pore arkitektur gir en bedre tilkoblinger og en økt pore tetthet for volumenhet, selv om fastsettelse av en drastisk tynning av vegger tykkelse. Morfologien av M 90, gitt i figur 2d, viser omtrent kubiske porer, homogent fordelt i hele polymermatriksen, på grunn av den mindre saltstørrelsesområde (90-100 um) som brukes i dette tilfellet. Mikroporer, på grunn av PEG-oppløsnings var tilstede som mikro tunneler inne i veggene som faktisk synes meget ujevn. SEM mikrofotografi av M 45, er vist på figur 2e, viser en høy tetthet av porer, som diameter varierer fra 45 um til 65 um. M 10 (figur 2f) viste den høyeste tetthet av porer pr volumenhet, en midlere porestørrelse omtrent lik 20 um, med en høy grad av sammenkopling og svært tynne (<1 um) vegger.
Figur 3a, en "en" viser et tverrsnitt av TLS A, etter luteprosessen, ved forskjellige forstørrelser. I figur 3a er det mulig å klart identifisere de tre lag, hver av dem karakterisert ved forskjellig gjennomsnittlig porestørrelse, mens paneler a 'og en "refererer til M 100-M 300 og M 300-M 500-grensesnitt regioner, henholdsvis. Som tydelig synlig, må hele enheten ikke viser noen interne splittelser eller matrise diskontinuitet mellom de ulike lagene. På analog måte TLS B og tilhørende grensesnitt rapportert i figur 3b, b ',b ". Bildene viste en morfologi som minner om TLS A. Faktisk tre lag med porer av forskjellig størrelse lett kan gjenkjennes (panel b), mens både M 10-M 45 (panel b ') og M 45-M 90 (panel b ") grenseområdene viste ingen flassing eller diskontinuitet. Som forventet, beholder hver enkelt lag samme pore arkitektur etter montering og utlekkings trinn.
Tabell 1 rapporterer kompresjonselastisitetsmoduler av materialene, målt i luft (tørr) og i PBS (våt) miljø. Denne egenskapen ble funnet å følge en monoton øker med midlere porestørrelse. Den elastiske moduli av de siste enhetene er i hovedsak bestemt av deres respektive svakere lag (dvs. M 100 for TLS A og M 10 for TLS B) for både TLSs undersøkt. Tabell 2 rapporter IAS for TLS A og TLS B i tørre og våte omgivelser . Ingen folien delaminerings fenomener ble observert, siden sviktalltid forekom i midten av de svakeste lag av TLS A (M 100) og TLS B (M 10). TLS A vises best IAS ytelse.
Figur 1:. Skjematisk av NaCl kornkorn av siktede NaCl partikler og tilsvarende sample koder.
Figur 2: Morfologi av monolags stillaser SEM mikrografer av monolagsstillasene preget av ulike porestørrelse distribusjoner:. M 500 (a), Scale bar = 400 mikrometer; M 300 (b), Scale bar = 400 mikrometer; M 100 (c), Scale bar = 400 mikrometer; M 90 (d), Scale bar = 200 mikrometer; M 45 (e), Scale bar = 40081; m. Og M 10 (f), Scale bar = 100 mikrometer Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Fig. 3: Morfologi av tre-lags stillasene (a, a ', en' ') SEM mikrografer av tre-lags stillas type A (TLS A): (a) hele tverrsnittet, Skala bar = 500 um; (A ') M 100-M 300-grensesnitt, Scale bar = 250 mikrometer; (A '') M 300-M 500-grensesnitt, Scale bar = 250 mikrometer. (B, b ', b' ') SEM mikrografer av tre-lags stillas type B (TLS B): (b) hele tverrsnittet, skala bar 500 mikrometer; (B ') M 10-M 45-grensesnitt, Scale bar; = 100 mikrometer; (B '') M 45-M 90-grensesnitt, Scale bar = 100 mikrometer. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
| Eksempelkode kode~~POS=HEADCOMP | Dry - E (MPa) | Wet - E (MPa) |
| M 500 | 40.33 ± 6.04 | 33.23 ± 4.96 |
| M 300 | 37.62 ± 6.89 | 31,42 ± 5,83 |
| M 100 | 32.12 ± 5.11 | 28.03 ± 4.04 |
| M 90 | 30.87 ± 4.93 | 26.91 ± 3.79 |
| M 45 | 25.36 ± 5.82 | 22.83 ± 5.01 |
| M 10 | 21 0,76 ± 3,91 | 19.87 ± 3.93 |
| TL A | 33.08 ± 5.21 | 29.55 ± 4.09 |
| TL B | 22.31 ± 5.46 | 20,54 ± 3,87 |
Tabell 1: Trykk mekaniske resultater Trykk Young modulus av mono og tre-lags stillasene med forskjellige porestørrelser i vått og tørt miljø.. Verdiene er gitt som gjennomsnitt ± SD.
| Eksempelkode kode~~POS=HEADCOMP | Tørr - IAS (kPa) | Våte - IAS (kPa) |
| TL A | 350,8 ± 51,2 | 299,6 ± 35,1 |
| TL B | 262,3 ± 62,2 | 220,5 ± 31,3 |
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den første kritiske trinnet er optimalisering av sikting effektivitet. Den høye kontroll av partikkelstørrelsen NaCl er grunnleggende for fremstilling av stillas med ønsket porestørrelsesfordeling. Et annet viktig trinn er å unngå brudd i de tynne PLA monolagene i løpet av prøven uttrekking fra støpeformen. Bildebehandlings analyse kanskje ikke være representativ for hele innretningen.
Under strekkprøver, kan prøven rive bort fra utstyret.
Før sikting trinn, konstatere at saltet er godt tørket for å få en bedre kontroll av partikkelstørrelsen NaCl. Dette problemet er spesielt viktig for den minste salt partikkelstørrelse, på grunn av sin ekstremt høye hygroskopisitet. Før kompresjon støping trinn påføres et tynt Teflon spray-belegg på formene for å lette prøven fjerning fra støpeformene. Bildebehandlings analysen må utføres ved å vurdere forskjellige bilder tattfra ulike regioner i stillaset for å være sikker på at de er representative for hele enheten. Til slutt, før strekkprøver (spesielt de utføres i fuktig miljø), nøye kontrollere klebemiddel for å prøve adhesjon.
Den viktigste begrensning av teknikken ligger i at det er umulig å oppnå en kontinuerlig gradient av porestørrelsen. Faktisk fremgangsmåten som her er beskrevet gjør det mulig å oppnå en diskret gradient av porestørrelse, siden den er basert på montering av forskjellige lag. I de fleste tilfeller kan en veldefinert flerlags stillaset bli foretrukket til en kontinuerlig gradert en, men ikke alltid. Denne begrensningen kan være delvis overskrides ved å øke antall lag, som i sin tur ville resultere i tynnere lag, åpenbart mer vanskelig å håndtere.
Til forskjell fra mange andre produksjonsteknologier, kan strategien her vedtatt anses miljøvennlig, siden den ikke krever noen giftige løsemiddel potensielt farligfor miljøet og for levende celler og vev. Videre tilveiebringer partikkelformet utluting en høy kontroll av både porestørrelse og porøsitet ved å justere henholdsvis størrelsen og mengden av NaCl blandet med PLA.
Fremtidige fremskritt i denne teknikken stole på muligheten for å samle lagene presentere andre chemo-fysiske forskjeller. For eksempel kan en montere forskjellige biopolymerer eller forsterke hvert lag med forskjellige nanopartikler, så som hydroksyapatitt 28, nanocellulose 27, graphene 35 eller dets derivater 9,36,37 for å gi enda ytterligere funksjonalitet 38. Faktisk, sikrer denne metoden et høyt kontroll og dermed gir for enkelt å tune hver region av flerlags stillaset. Denne utfordringen spiller en avgjørende rolle i den ITE, da tilstedeværelse av multi-fasisk og / eller anisotrope bio-strukturer som gradvis endres fra ett vev til et annet, er typiske trekk ved grensesnitt vev, slik som ligament-til-ben, sene-til-ben og brusk-til-ben.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Poly(lactic acid) | NatureWorks | PLA 2002D | |
| Poly(ethylene glycol) | Sigma | 83797-1KG-F | |
| Sodium Cloride | Sigma | 793566-5KG-D | |
| Phosfate Buffer Solution | Sigma | P5368-10PAK | |
| Laboratory Mixer | Brabender | PLE 330 - Plasticorder | |
| Laboratory Press | Carver | ||
| Scanning Electron Microscopy | Phenom-world | ProX | |
| Universal Testing Machine | Instron | 3365 (UK) | |
| BioPuls Bath | Instron, Norwood | ||
| Sieving Machine | Endecotts | E.V.F.1. | |
| Vacuum Oven | ISCO | NSV9035 | |
| Precision Balance | Sartorius | AX224 |
References
- Scaffaro, R., Morreale, M., Lo Re, G., Mantia, F. P. La Degradation of Mater-Bi®/wood flour biocomposites in active sewage sludge. Polymer Degradation and Stability. 94 (8), 1220-1229 (2009).
- Scaffaro, R., Botta, L., Passaglia, E., Oberhauser, W., Frediani, M., Di Landro, L. Comparison of different processing methods to prepare poly(lactid acid)-hydrotalcite composites. Polymer Engineering & Science. 54 (8), 1804-1810 (2014).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent advances in graft copolymerization and applications of chitosan: A review. ACS Sustainable Chemistry and Engineering. 2 (12), 2637-2652 (2014).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent advances in green hydrogels from lignin: A review. International Journal of Biological Macromolecules. 72, 834-847 (2015).
- Thakur, V. K., Kessler, M. R. Self-healing polymer nanocomposite materials: A review. Polymer. 69, 369-383 (2015).
- Thakur, V. K., Thakur, M. K. Recent trends in hydrogels based on psyllium polysaccharide: a review. Journal of Cleaner Production. 82, 1-15 (2014).
- Voicu, S. I., Condruz, R. M., et al. Sericin Covalent Immobilization onto Cellulose Acetate Membrane for Biomedical Applications. ACS Sustainable Chemistry & Engineering. 4 (3), 1765-1774 (2016).
- Scaffaro, R., Botta, L., Sanfilippo, M., Gallo, G., Palazzolo, G., Puglia, A. M. Combining in the melt physical and biological properties of poly(caprolactone) and chlorhexidine to obtain antimicrobial surgical monofilaments. Applied Microbiology and Biotechnology. 97 (1), 99-109 (2013).
- Scaffaro, R., Maio, A., et al. Synthesis and self-assembly of a PEGylated-graphene aerogel. Composites Science and Technology. 128, 193-200 (2016).
- Scaffaro, R., Botta, L., Gallo, G., Puglia, A. M. Influence of Drawing on the Antimicrobial and Physical Properties of Chlorhexidine-Compounded Poly(caprolactone) Monofilaments. Macromolecular Materials and Engineering. 12 (300), 1268-1277 (2015).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., et al. Effect of PCL/PEG-Based Membranes on Actinorhodin Production in Streptomyces coelicolor Cultivations. Macromolecular bioscience. 16 (5), 686-693 (2016).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Rigogliuso, S., Ghersi, G. Melt Processed PCL/PEG Scaffold With Discrete Pore Size Gradient for Selective Cellular Infiltration. Macromolecular Materials and Engineering. 301 (2), 182-190 (2016).
- Yousefi, A. -M., Hoque, M. E., Prasad, R. G. S. V., Uth, N. Current strategies in multiphasic scaffold design for osteochondral tissue engineering: A review. Journal of Biomedical Materials Research Part A. 103 (7), 2460-2481 (2015).
- Gillette, B. M., Rossen, N. S., et al. Engineering extracellular matrix structure in 3D multiphase tissues. Biomaterials. 32 (32), 8067-8076 (2011).
- Seidi, A., Ramalingam, M., Elloumi-Hannachi, I., Ostrovidov, S., Khademhosseini, A. Gradient biomaterials for soft-to-hard interface tissue engineering. Acta Biomaterialia. 7 (4), 1441-1451 (2011).
- Son, J. S., Kim, S. G., et al. Hydroxyapatite/polylactide biphasic combination scaffold loaded with dexamethasone for bone regeneration. Journal of Biomedical Materials Research - Part A. 99 (4), 638-647 (2011).
- Sundararaghavan, H. G., Burdick, J. A. Gradients with depth in electrospun fibrous scaffolds for directed cell behavior. Biomacromolecules. 12 (6), 2344-2350 (2011).
- Zou, B., Liu, Y., Luo, X., Chen, F., Guo, X., Li, X. Electrospun fibrous scaffolds with continuous gradations in mineral contents and biological cues for manipulating cellular behaviors. Acta biomaterialia. 8 (4), 1576-1585 (2012).
- Nedjari, S., Schlatter, G., Hébraud, A. Thick electrospun honeycomb scaffolds with controlled pore size. Materials Letters. 142, 180-183 (2015).
- Yusong, P., Qianqian, S., Chengling, P., Jing, W. Prediction of mechanical properties of multilayer gradient hydroxyapatite reinforced poly(vinyl alcohol) gel biomaterial. Journal of Biomedical Materials Research - Part B Applied Biomaterials. 101 (5), 729-735 (2013).
- Kim, Y. B., Kim, G. Functionally graded PCL/β-TCP biocomposites in a multilayered structure for bone tissue regeneration. Applied Physics A: Materials Science and Processing. 108 (4), 949-959 (2012).
- Sudarmadji, N., Tan, J. Y., Leong, K. F., Chua, C. K., Loh, Y. T. Investigation of the mechanical properties and porosity relationships in selective laser-sintered polyhedral for functionally graded scaffolds. Acta biomaterialia. 7 (2), 530-537 (2011).
- Molladavoodi, S., Gorbet, M., Medley, J., Kwon, H. J. Investigation of microstructure, mechanical properties and cellular viability of poly(L-lactic acid) tissue engineering scaffolds prepared by different thermally induced phase separation protocols. Journal of the mechanical behavior of biomedical materials. 17, 186-197 (2013).
- Oh, S. H., Kim, T. H., Il Im, G., Lee, J. H. Investigation of pore size effect on chondrogenic differentiation of adipose stem cells using a pore size gradient scaffold. Biomacromolecules. 11 (8), 1948-1955 (2010).
- Lin, L., Gao, H., Dong, Y. Bone regeneration using a freeze-dried 3D gradient-structured scaffold incorporating OIC-A006-loaded PLGA microspheres based on β-TCP/PLGA. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 26 (1), 3 (2015).
- Yoo, D. Heterogeneous minimal surface porous scaffold design using the distance field and radial basis functions. Medical engineering & physics. 34 (5), 625-639 (2012).
- Soon, Y. -M., Shin, K. -H., Koh, Y. -H., Lee, J. -H., Choi, W. -Y., Kim, H. -E. Fabrication and compressive strength of porous hydroxyapatite scaffolds with a functionally graded core/shell structure. Journal of the European Ceramic Society. 31 (1-2), 13-18 (2011).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Maio, A. Mechanical behavior of Polylactic acid/Polycaprolactone porous layered functional composites. Composites Part B: Engineering. 98, 70-77 (2016).
- Halili, A. N., Hasirci, N., Hasirci, V. A multilayer tissue engineered meniscus substitute. Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 25 (4), 1195-1209 (2014).
- Bai, H., Wang, D., et al. Biomimetic gradient scaffold from ice-templating for self-seeding of cells with capillary effect. Acta Biomaterialia. 20, 113-119 (2015).
- Algul, D., Sipahi, H., Aydin, A., Kelleci, F., Ozdatli, S., Yener, F. G. Biocompatibility of biomimetic multilayered alginate-chitosan/β-TCP scaffold for osteochondral tissue. International Journal of Biological Macromolecules. 79, 363-369 (2015).
- Scaffaro, R., Lopresti, F., Botta, L., Rigogliuso, S., Ghersi, G. Preparation of three-layered porous PLA/PEG scaffold relationship between morphology , mechanical behavior and cell permeability. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 54, 8-20 (2016).
- Lo Re, G., Lopresti, F., Petrucci, G., Scaffaro, R. A facile method to determine pore size distribution in porous scaffold by using image processing. Micron. 76, 37-45 (2015).
- Levingstone, T. J., Matsiko, A., Dickson, G. R., O'Brien, F. J., Gleeson, J. P. A biomimetic multi-layered collagen-based scaffold for osteochondral repair. Acta Biomaterialia. 10 (5), 1996-2004 (2014).
- Scaffaro, R., Botta, L., Maio, A., Mistretta, M. C., La Mantia, F. P. Effect of Graphene Nanoplatelets on the Physical and Antimicrobial Properties of Biopolymer-Based Nanocomposites. Materials. 9 (5), 351 (2016).
- Maio, A., Fucarino, R., Khatibi, R., Rosselli, S., Bruno, M., Scaffaro, R. A novel approach to prevent graphene oxide re-aggregation during the melt compounding with polymers. Composites Science and Technology. 119, 131-137 (2015).
- Maio, A., Agnello, S., et al. A rapid and eco-friendly route to synthesize graphene-doped silica nanohybrids. Journal of Alloys and Compounds. 664, 428-438 (2015).
- Maio, A., Giallombardo, D., Scaffaro, R., Piccionello, A. P., Pibiri, I. Synthesis of a fluorinated graphene oxide-silica nanohybrid: improving oxygen affinity. RSC Advances. 6 (52), 46037-46047 (2016).
