Heri vi presentere en metode for å mate plantevernmidler forurenset mat til både en individuell honningbie og en bikube koloni. Fremgangsmåten evaluerer pesticid virkning på individuelle honningbier ved in vivo tilførsel av basisk larve diett og også på den naturlige tilstand av bikube koloni.
The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.
Tilstedeværelsen av plantevernmidler i miljøet er en av de mest alvorlige problemer som påvirker livet til en honningbie en, to, tre. Flere studier har demonstrert den felles nærvær av preparatet rester i honningbie kolonier og bier. I Taiwan, gjennomsnittlig bruk av plantevernmidler var 11-12 kg / ha hvert år (2005-2013). Mengden av plantevernmidler som brukes i Taiwan er høyere enn EU-landene, og de latinamerikanske landene 4, 5. Med andre ord, er apicultural miljøet lider alvorlig plantevernmiddel stress, spesielt i Taiwan og muligens i andre land.
Honey Bee Apis mellifera er en av de store pollinatorer i jordbrukssystemer 6 og det gir også verdifulle produkter som honning. Men honningbier er exposed til ulike plantevernmidler og disse plantevernmidler kan bringes tilbake til bikuber etter beite på blomster som har blitt sprayet med plantevernmidler ved innsamling nektar og pollen 7, 8. De kan også bli utsatt for plantevernmidler av birøktere seg som mål å kontrollere skadedyr inne i elveblest 9, 10, 11. Fordi honningbie larvene blir matet av sykepleier bier for deres utvikling, larver, droner og til og med dronning kan bli eksponert for disse plantevernmiddel-forurenset nektar og pollen 12. Giftigheten av ulike plantevernmidler til honningbier må tas opp 13.
Mange forsøk har vært gjort for å vurdere spørsmål om miljøsprøytemiddelrester. Yang et al. testet påvirkning av nevrotoksiske insektmiddel imidakloprid på utvikling av honningbie larver ibikube og rapporterte at en sub-letal dose av imidakloprid resulterte i olfaktorisk assosiativ oppførsel av voksen bier 14. Også Urlacher et al. undersøkte subletale effekter av en organophosphate plantevernmiddel, chlorpyrifos, på en honningbie arbeidstaker læring ytelse under laboratorieforhold 15. I vår forrige undersøkelse, vurderte vi effekten av et insekt vekst regulator (IGR), pyriproksyfen (PPN), på larvehonningbier 16.
I denne artikkelen presenterer vi metoder for å vurdere de kjemiske virkninger på utviklingen av honningbier. Honningbie foringsmetoder er beskrevet og anvendt for å enten individuelle honningbier eller til en koloni. Til å begynne med ble det undersøkt forskjellige konsentrasjoner av pesticid-forurenset basislarve diett (F, L) på larver i koloniene for å evaluere virkningen av preparatet på individuelle honningbier in vivo. Vi fortsatte deretter å simulere den naturlige Conditioner av pesticidet ved anvendelse av plantevernmiddel-forurenset sirup i bikuber. I denne metoden, vil PPN, som er mye brukt mot skadeinsekter 17 og er skadelige for utvikling av honningbie larver og pupper 16, 18, 19, være en indikator for å representere den negative effekten av preparatet i felten.
Den Queen begrensede egg-leggende metode og dronning-utskiftingsmetode er kritiske trinn for å sette opp honningbie grupper for felttesting innen denne protokollen. Den Queen begrensede egg-leggende metode muliggjør synkronisering av livssyklusen til honningbier. Dermed kan forskerne velge en dag gamle larver på samme alder for behandling med forskjellige doser av plantevernmidler. For dronning-utskiftingsmetode ble dronning utvekslet mellom del A (4 rammer) og B (5 frames) for å oppnå forskjellige utviklingsstadie…
The authors have nothing to disclose.
Denne forskningen ble støttet av Grant 105AS-13.2.3-BQ-B1 fra Bureau of Animal og plantehelse inspeksjon og karantene, Rådet for landbruk, konsern Yuan og Grant 103-2313-B-197-002-My3 fra departementet for naturvitenskap og teknologi (MOST).
Honey bee box | SAN-YI Honey Factory | W1266 | Honeybees rearing |
Queen excluder (between frames) | SAN-YI Honey Factory | I1575 | Queen limitation |
Queen excluder (on top ) | SAN-YI Honey Factory | I1566 | Queen limitation on top |
Bee brush | SAN-YI Honey Factory, Taiwan | W1414 | clean the bees on frame gently |
Bee feeder | SAN-YI Honey Factory, Taiwan | P0219 | feed sugar syrup to colony |
Transparent slide | Wan-Shih-Chei, Taiwan (http://www.mbsc.com.tw/a01goods.asp?s_id=40) | 1139 | Mark the larval area on the frames (Material: Polyethylene Terephthalate, PET) (Size= Length*Width*thick= 29.7mm*21mm*0.1mm) |
24 well tissu culture plate | Guangzhou Jet Bio-Filtration Co., Ltd | TCP011024 | Rearing pupae from extraction |
Autoclave | Tomin medical equipmenco., LTD. | TM-321 | Make sterilized distilled deionized water (ddH2O) |
P20 pipetman | Gilson | F123600 | Add PPN into bee larval food pool |
Incubator | Yihder Co., Ltd. | LE-550RD | Rearing pupae from extraction |
Kimwipes | COW LUNG INSTRUMENT CO., LTD | KCS34155 | Rearing pupae from extraction |
Royal jelly | National Ilan University (NIU) | NIU | Make basic larval diet (BLD) |
D-(+)-Glucose | Sigma | G8270 | Make basic larval diet (BLD) |
D-(-)-Fructose | Sigma | F0127 | Make basic larval diet (BLD) |
Yeast extract | CONDA, pronadisa | 1702 | Make basic larval diet (BLD) |
Sucrose | Taiwan sugar coporation | E01071010 | Make sugar syrup for bee food |
Pyriproxyfen (11%) | LIH-NUNG CHEMICAL CO.. LTD. | Registration No. 1937 | Insect growth regulator (IGR) used in the experiment |