Summary
Nous présentons ici un protocole pour un test de cognition spécifique à la souris qui ne nécessite pas de nage. Ce test peut être utilisé pour distinguer avec succès les souris traumatiques traumatiques provoquées par l'impact cortical contrôlé par des témoins simulés.
Abstract
Malgré l'augmentation récente de l'utilisation des modèles de souris dans la recherche scientifique, les chercheurs continuent à utiliser des tâches cognitives qui ont été initialement conçues et validées pour l'utilisation des rats. Le test de labyrinthe de la mémoire spatiale (spécialement conçu pour les souris et ne nécessitant pas de baignade) a été démontré précédemment pour distinguer avec succès les souris TBI induites par impact cortical contrôlées et les contrôles simulés. Ici, un protocole détaillé pour cette tâche est présenté. Le labyrinthe RWT capitalise sur la tendance naturelle des souris à éviter les zones ouvertes en faveur de l'étreinte des côtés d'un appareil (thigmotaxis). Les murs du labyrinthe sont bordés de neuf trous d'évacuation placés au-dessus du sol de l'appareil, et les souris sont entraînées à utiliser des repères visuels pour localiser le trou d'évacuation qui sort du labyrinthe. Le labyrinthe est rempli d'un pouce d'eau froide, suffisant pour motiver l'évasion mais pas assez profond pour exiger que la souris nage. La période d'acquisition ne prend que quatre formationsJours, avec un test de rétention de mémoire au jour cinq et un test de mémoire à long terme au jour 12. Les résultats rapportés ici suggèrent que le labyrinthe de RWT est une alternative possible aux tests cognitifs validés par le rat et basés sur la natation dans l'évaluation de l'espace Déficits de mémoire dans les modèles souris de TBI.
Introduction
Les troubles de la mémoire sont parmi les symptômes les plus courants signalés par les patients après une lésion cérébrale traumatique (TCE) 1 , 2 . L'identification et l'évaluation exactes des déficits de mémoire analogues dans les modèles animaux de TBI sont donc essentielles à notre compréhension de cette condition et de sa gestion. Ici, nous présentons un protocole pour tester la mémoire spatiale dans un modèle de souris de TBI en utilisant un labyrinthe de roulement à eau radiante (RWT). Cet appareil a précédemment évalué les déficits cognitifs dans les modèles de souris du TBI 3 induit par l'impact cortical contrôlé (CCI) et représente une alternative potentielle aux tests de cognition validés par le rat et basés sur la nage.
La diversité croissante et la disponibilité de modèles de souris transgéniques a entraîné une augmentation récente de l'utilisation de souris sur des rats dans la recherche scientifique 4 . Malgré ce changement, les chercheurs continuent à compter sur un comportementNd tâches cognitives initialement conçues et validées pour l'utilisation des rats. Les tests les plus courants actuellement utilisés pour évaluer la cognition chez la souris, le Morris Water Maze (MWM) et le labyrinthe circulaire de Barnes ont été spécifiquement conçus pour capitaliser sur les comportements instinctifs trouvés chez les rats 5 , 6 . Compte tenu des différences génétiques, neuroethologiques et cognitives qui existent entre ces deux espèces 4 , il n'est pas surprenant que les souris continuent régulièrement à se baser sur ces tâches 7 , 8 .
Les différences dépendantes de l'espèce dans les capacités de test sont particulièrement préoccupantes dans les tests cognitifs basés sur la natation, tels que le MWM. Alors que les rats et les souris sont des nageurs compétents, les chercheurs ont identifié plusieurs souches de souris qui se comportent remarquablement mal sur les tâches cognitives basées sur la natation 9 , 10 , 11 , 12 , 13 . Même chez les animaux de type sauvage, les rats dépassent généralement les souris 7 , 8 . Bien que cela puisse être interprété comme une différence spécifique de l'espèce dans la mémoire spatiale, des tests de suivi analogues utilisant un labyrinthe à terre sèche n'ont révélé aucune différence dépendante des espèces dans les performances cognitives 8 . Un certain nombre de facteurs non liés à la cognition pourraient expliquer cette découverte, y compris les différences dépendantes de l'espèce dans la capacité de nage ou la stratégie de recherche. En effet, l'analyse factorielle des stratégies de recherche spécifiques à la souris dans le MWM montre que les facteurs non cognitifs (en particulier, la thigomotaxis et la passivité [ c'est -à- dire flottants]) peuvent jouer un rôle plus important dans la performance MWM que l'apprentissage spatial 14 .
Ici, nous démontrons l'utilisation d'un test cognitif conçu pour capitaliser sur leComportement stuctif de la souris, et qui ne nécessite pas de nage, pour mesurer l'altération de la mémoire spatiale dans un modèle de souris de TBI induite par CCI. Bien que le labyrinthe de RWT (figure 1 A-B) a été conçu en tant que nouvel hybride du labyrinthe circulaire MWM et Barnes, il a été spécialement conçu pour tirer parti du comportement pulsionnel thigmotactisme à des souris 15, 16. L'appareil se compose d'un tube en acier galvanisé de 32 pouces de diamètre dans lequel neuf trous de sortie régulièrement espacés ont été ennuyés. Les trous sont centrés à 2-1 / 4 pouces au-dessus du plancher de la baignoire et sont dimensionnés pour s'adapter aux adaptateurs antiparasites ABS DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 pouces couramment disponibles. Huit des sorties sont coiffées de l'extérieur et aveuglées jusqu'à une profondeur de 1 pouce avec des bouchons en caoutchouc. Le neuvième est relié par un coude en styrène à styrène (ABS) à 90 ° d'acrylonitrile à une boîte en plastique opaque dont la souris peut être facilement retirée après test. Au cours d'unBrève période d'acquisition, la souris est formée pour utiliser les repères visuels uniques qui bordent le labyrinthe pour localiser cette boîte d'évacuation. Au cours du test, le labyrinthe est rempli d'un pouce d'eau froide (12-14 ° C), suffisamment aversif pour favoriser l'évasion, mais pas assez profond pour que la souris soit obligée de nager.
Le labyrinthe RWT représente une alternative peu coûteuse et à faible entretien au MWM, et a été utilisé avec succès chez les souris âgées et transgéniques 15 , 17 , 18 , 19 et les modèles de souris induites par CCI de TBI 3 . Le protocole décrit ici représente une méthode simple et efficace pour mesurer l'altération de la mémoire spatiale nécessitant une formation préalable à la blessure et pourrait être facilement modifiée en fonction des besoins particuliers d'un laboratoire de recherche.
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Protocol
Toutes les procédures et la manipulation des animaux ont été menées conformément aux directives sur les soins des animaux délivrées par les National Institutes of Health et par le Comité de l'élevage et de l'utilisation des animaux de l'Université de Washington.
1. Chirurgie
- Anesthésier la souris à 5% d'isoflurane dans une boîte d'induction jusqu'à l'inconscience. Confirmer l'anesthésie par une réduction de la fréquence respiratoire et l'absence d'un réflexe de retrait après le pincement.
- Maintenir l'anesthésie par le cône du nez à 2-2,5% tout au long de la chirurgie. Surveillez le taux de respiration tout au long de la chirurgie pour vous assurer que la souris reste inconsciente.
- Placez la prothèse de la souris sur un coussin chauffant et placez la souris dans l'appareil stéréotaxique à l'aide de barres d'oreille, en vous assurant que la tête est bien fixée et à plat.
- Retirer les cheveux du cuir chevelu à l'aide de crème anti-épilation. Rincer soigneusement le cuir chevelu avec de la solution saline.
- Nettoyez le site chirurgical avec un iode en alternance et un lavage à 70% d'éthanol.
- AdministrateurInjection sous-cutanée de Lidocaïne et de Bupivacaïne (1 mg / kg) au cuir chevelu.
- Avec des ciseaux chirurgicaux, effectuez une incision longitudinale longitudinale et rétractez la peau pour révéler le crâne.
- En utilisant une préforme de scie tridée de 5 mm, une craniotomie sur le cortex frontoparietal gauche avec un point central à 2,5 mm derrière bregma et 2,5 mm à gauche de la ligne médiane. Retirez soigneusement le cercle des os pour exposer le cerveau.
- Réglez le dispositif de frappe à une vitesse de 6 m / s et 200 ms.
- Placez le dispositif de frappe jusqu'à ce que la pointe d'impact convexe de 3 mm touche légèrement la surface du cerveau à 2,5 mm derrière le bregma et 2,55 mm à gauche de la ligne médiane. Rétracter la pointe d'impact et abaisser de 1 mm (profondeur d'impact). Lorsque vous êtes prêt, éteins le périphérique, générant l'impact désiré.
- Couvrir la craniotomie avec un disque de polypropylène stérile cimenté au derma avec un adhésif tissulaire et suturer l'incision fermée.
- Retirez la souris de l'anesthésie et donnez une injection IP de BuprL'énorphine (0,5 mg / kg).
- Permettre à la souris de récupérer dans une cage propre, réchauffée par un coussin chauffant. La souris doit être surveillée pour détecter des signes de douleur ou de détresse au cours des 24 h suivantes.
REMARQUE: Les contrôles Sham devraient recevoir un traitement identique comme ci-dessus, les étapes 1.8-1.9 étant omises.
2. Construction de labyrinthe de la marche à eau radiante
- Les trous de sortie d'alésage 9, assez grands pour accueillir des adaptateurs de trappe ABS DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 pouces, à intervalles égaux autour de la circonférence d'un tube en acier galvanisé de 32 pouces de diamètre. Centrez ces trous de sortie à environ 2-1 / 4 pouces au-dessus du plancher de la baignoire.
- Installez un adaptateur de traction ABS DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 pouces dans chacun des trous de sortie et fixez-le avec les écrous torsadés inclus.
- Avec des bouchons en caoutchouc, capuchon huit des neuf sorties de l'extérieur de l'appareil. La sortie définitive, non pliée, servira de voie d'évacuation. Peu importe quelle sortie est désignée comme voie d'évacuation.
- Fixez un ABS 90 °Coude à l'extrémité extérieure de la sortie restante. Le virage à 90 ° permet d'empêcher les sujets de test de déterminer visuellement la bonne voie d'évacuation à l'intérieur du labyrinthe.
- Construire la boîte d'échappement à partir d'une boîte opaque capable d'être désinfectée et d'une taille approximative de 30 cm x 15 cm x 15 cm. Couper un trou sur le côté de la boîte, directement au-dessus du sol, assez grand pour accueillir un coude ABS 90 °.
- Fixez la boîte d'évacuation à l'extrémité terminale du coude ABS 90 °.
- Élevez légèrement la boîte d'évacuation (moins d'un pouce) au-dessus de la surface du sol. Cela permet d'installer une caisse chauffante électrique, ou une autre source de chauffage, dans le cadre de la boîte d'évacuation.
- Imprimez et stratifiez au moins 5 repères visuels uniques. Utilisez des images simples et à haute contraste qui peuvent être facilement discernées à l'intérieur de l'appareil. Des formes de clipart en noir et blanc (triangle, carré, cercle) sont recommandées.
- En utilisant des aimants, adhérer les repères visuels aux parois intérieures de laappareil. Les cotes devraient être à peu près égales à distance, autour de la circonférence de l'appareil.
3. Protocole de labyrinthe à l'eau radiante
REMARQUE: Les essais sur le labyrinthe d'eau ne devraient commencer qu'après avoir guéri (environ une semaine après la chirurgie).
- Préparation aux tests.
- Laissez les souris s'acclimater dans la salle d'essai pendant au moins 30 minutes avant de commencer les tests.
- Désinfecter l'appareil en utilisant un jet d'éthanol à 70%.
- Remplissez l'appareil avec environ 1 pouce d'eau froide (12-14 ° C).
- Placez un coussin chauffant électrique, ou une autre source de chauffage, directement sous la boîte d'évacuation. Gardez la boîte d'évacuation sombre et chaude tout au long de la durée de l'essai.
- Placez une source lumineuse lumineuse sur l'appareil.
REMARQUE: Si vous utilisez une lampe qui pourrait être visible pour rechercher des animaux de l'appareil lui-même, veillez à ce que la lampe soit placée dans le même poChaque jour. La lampe elle-même pourrait représenter une autre indication visuelle pour les souris à utiliser pour localiser la boîte d'échappement, et le déplacer de façon drasculaire du jour au jour pourrait compliquer les résultats.
- Protocole de test
- Retirez la souris de sa cage doucement par la queue et placez-la au centre de l'appareil.
- Dès que l'animal est entré dans l'appareil, commencez le temps.
- Une fois que l'animal a trouvé la sortie correcte, et a situé / entré dans la boîte d'échappement, arrête le temps et enregistre le nombre de secondes requis pour trouver le chemin correct.
- Si l'animal tente de grimper dans un trou de terminaison et ne rentre pas spontanément dans le labyrinthe après 10 s, guidez l'animal dans le centre du labyrinthe à la main.
- Si l'animal ne parvient pas à trouver le chemin correct de la boîte d'échappement en moins de 3 min (180 s), notez l'essai en tant que défaillance et enregistrez 180 s. Guidez soigneusement l'animal vers le bon chemin à la main.
- Autoriser leSouris pour rester dans la boîte d'évacuation pendant 1 min, repos inter-essai.
- Une fois le repos de 1 min passé, retirez l'animal de la boîte d'évacuation et retournez dans sa cage de maison.
- Bien désinfecter la boîte d'échappement et sortir avec un jet d'éthanol à 70% pour empêcher la souris d'utiliser des indices olfactifs pour localiser la voie d'évacuation correcte. Cette étape ne doit pas dépasser quelques secondes.
- Retournez la souris au labyrinthe pour l'essai suivant.
- Répétez les étapes 3.2.1-3.2.9 jusqu'à ce que la souris ait terminé un total de trois essais et qu'elle soit localisée ou a été conduite à la boîte d'échappement trois fois.
- Après le 1 min de repos final, remettez la souris dans sa cage à domicile.
- Égoutter et remplacer l'eau dans l'appareil entre les animaux afin d'assurer une température constante tout au long des essais.
- Répétez les étapes 3.2.1-3.2.12 pour chaque souris à tester.
- Le lendemain, répétez les étapes de préparation 3.2.1-3.2.5. Veillez à ce que les signaux visuels demeurentDans des positions cohérentes entre les jours de test.
- Testez les animaux en utilisant le protocole de test quotidien ci-dessus pour trois essais par jour pendant quatre jours (période de formation), avec un test final de trois essais pour la rétention de mémoire au cinquième jour. Un sixième test de trois essais (rétention de la mémoire à long terme) peut être donné le jour douze.
- Ne effectuez aucun test entre les jours de test cinq et douze.
- Une analyse
- Si une souris ne parvient pas à compléter le labyrinthe en moins de 180 s pendant une période de deux jours ( c.-à-d. Un total de 6 essais consécutifs tous marqués à 180 s), considérez la souris insuffisamment motivée par les conditions d'essai et supprimez de l'analyse.
- Calculez la latence moyenne pour compléter le labyrinthe pour chaque sujet à la date de test en faisant la moyenne de ses trois essais quotidiens pour ce jour.
- Obtenez des différences de groupe dans la rétention de mémoire en utilisant des tests T standard pour comparer les groupes au test du cinquième jour et à la date de test de la mémoire à long terme. Si mPlus que deux groupes sont comparés, l'ANOVA à sens unique suivie d'une analyse post-hoc appropriée (comme le test de Tukey) pour donner suite à toute signification obtenue devrait être utilisé à la place.
- Obtenir des différences de groupe dans la période d'acquisition (jours 1-4) par analyse de variance de mesure répétée.
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Representative Results
Le labyrinthe RWT ( Figure 1 ) a été utilisé pour enquêter sur les déficits de mémoire spatiale dépendant de la lésion chez des souris assignées de manière aléatoire pour recevoir soit une TBI contrôlée par impact cortical contrôlé, soit une chirurgie simulée. La blessure a été générée à l'aide d'un impact cortical à solénoïde avec une pointe convexe de 3 mm et les paramètres de blessure suivants: vitesse de frappe de 6 m / s, 1 mm de profondeur de pénétration et 200 ms de temps de contact. Les souris ont reçu des tests cognitifs à partir de 35 jours après la chirurgie et ont reçu quatre jours de formation (période d'acquisition) suivies d'un test de rétention de mémoire au jour 5 et d'un test de mémoire à long terme au jour 12, tel que décrit ci-dessus protocole. La figure 2 montre une nette distinction de groupe en latence pour compléter le labyrinthe au fil du temps entre les souris TBI et les contrôles simulés. L'analyse des données présentées ici a révélé que la latence était considérablement réduite dans les contrôles simulés par rapport aux souris TBI Le jour 5 et le jour 12 ( figure 2 ). Aucun sujet n'a satisfait aux critères pour être considéré comme insuffisant par les conditions d'essai, et donc aucune souris n'a été retirée de l'analyse.
Figure 1: Labyrinthe de roulement à eau radiante.
Le labyrinthe se compose d'une baignoire en acier galvanisé de 32 pouces avec neuf sorties, chaque 2-1 / 4 pouces au-dessus du plancher de l'appareil. De ces sorties, huit se terminent après environ 1 pouce (démarche sort), et l'on conduit à une boîte d'échappement chauffée (30 cm x 15 cm x 15 cm) cachée derrière un angle de 90 ° pour empêcher la confirmation visuelle de la voie d'évacuation. En arrivant à la boîte d'échappement, les sujets ont reçu un repos interministériel de 1 minute. L'appareil est rempli d'un pouce d'eau froide (12 - 14 ° C) pour motiver le comportement de l'évasion et bordé de cinq repères visuels uniques pour l'orientation spatiale./ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55986/55986fig1large.jpg "target =" _ blank "> Cliquez ici pour voir une version plus grande de cette figure.
Figure 2: Résultats représentatifs du labyrinthe de roulement de l'eau radiante.
Les souris C57BL / 6J, âgées de 10 semaines, ont eu un impact de contrôle contrôlé (n = 11) ou une chirurgie simulée (n = 6). Les paramètres de blessure étaient les suivants: pointe d'impact convexe de 3 mm, vitesse de 6 m / s, profondeur de pénétration de 1 mm et temps de séjour de 200 ms. Les souris ont commencé à recevoir des tests de labyrinthe RWT 35 jours après la blessure. Le protocole de test consistait en trois essais par jour pendant quatre jours (période d'acquisition), suivis d'un essai de trois semaines de rétention de mémoire au jour cinq et d'un test de mémoire à long terme de trois essais au jour 12. Analyse de variance à plusieurs reprises constatée non Différences de groupe pendant la période d'acquisition (jours 1-4) (F [1,15] = 1,844, p> 0,05). La latence pour compléter le labyrinthe était significativement élevée chez les souris TBI par rapport aux témoins simulés à la fois le jour 5 (t [15] = 1,907, p <0,05) et le jour 12 (t [15] = 2,242, p <0,05). Les points de données représentent les moyens de groupe (± SEM). L'importance a été déterminée par le test t standard (à une queue, basé sur l'hypothèse a priori des différences de groupe) et est déclaré p <0,05 (*) Cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.
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Discussion
Le protocole de labyrinthe RWT présenté ici distingue avec succès les souris TBI induites par CCI et les contrôles simulés, et représente une alternative viable, axée sur la souris, au lézard circulaire MWM et Barnes. Alors que les résultats rapportés ici ne parlent que de l'utilisation du labyrinthe RWT dans un modèle de souris TBI, cet appareil a été utilisé avec succès dans des modèles âgés et transgéniques où la non-conformité induite par le stress résultant d'essais basés sur la nage effectués à l'aide du MWM impraticable 15 , 17 , 18 , 19 . D'autres modèles de souris dans lesquels la non-conformité ou les déficits moteurs sont des préoccupations de recherche potentielles peuvent également bénéficier de cette tâche cognitive.
En plus des avantages décrits précédemment, l'un des avantages du labyrinthe RWT est sa simplicité, tant en termes de construction que d'utilisation. L'appareil lui-même est facilement construit en utilisant relÀ des matériaux peu coûteux et peuvent être désinfectés sans endommager ses composants, ce qui le rend idéal pour des installations spécifiques de pathogènes (SPF). La période d'acquisition ne nécessite que quatre jours de tests, sans formation préalable à la blessure. Les tests quotidiens impliquent un minimum de temps d'engagement (~ 10 min / animal) et nécessitent peu d'expérience avant la maîtrise. En raison de sa simplicité dans la construction et l'utilisation, le labyrinthe RWT est idéal pour un laboratoire contraint par un budget relativement serré et avec peu ou pas d'expérience de test comportementale ou cognitive.
Il existe plusieurs étapes que les chercheurs peuvent prendre pour réduire la variance potentielle lors de l'utilisation du protocole que nous avons décrit ici. Certaines recommandations visant à obtenir des résultats cohérents et de qualité incluent des tests à des moments similaires à travers les cohortes, en utilisant la même personne / personnes pour effectuer des tests lorsque cela est possible, en maintenant un environnement de test calme et calme et une manipulation extensive de la souris avant le test. Il faut aussi soulignerA été dimensionné alors que la température de l'eau indiquée dans ce protocole entraînait des conditions d'essai réussies pour les souris mâles C57BL / 6J, la préférence de température et l'hypothermie sont fortement dépendantes et dépendantes du sexe 20 . Les laboratoires devraient effectuer leurs propres tests préliminaires si vous utilisez d'autres souches ou des souris femelles pour déterminer une gamme de température efficace qui n'induit pas l'hypothermie. Enfin, les indices visuels doivent être simples, faciles à distinguer et visibles pour les sujets pendant les tests. Les formes noires et blanches de base (stratifiées ou gainées en plastique, pour qu'elles puissent être désinfectées) soient préférables.
Bien que le protocole de test décrit ici soit relativement simple, il pourrait facilement être adapté pour donner aux chercheurs une pléthore d'informations au-delà de la latence pour échapper. Le logiciel de suivi des animaux peut être utilisé pour collecter une multitude de paramètres supplémentaires et pourrait être utilisé pour identifier les différences spécifiques au groupe dans le comportement de recherche. Un tel logiciel n'est pas inhérentNécessaire pour tester, cependant, comme cela a été démontré ici. En outre, les essais de sonde, dans lesquels la sortie de la boîte d'échappement est bloquée ou les signaux visuels ont été tournés pour indiquer la sortie dans un trou de terminaison, pourraient être utilisés pour compléter le protocole décrit ici. Bien qu'une période d'acquisition de quatre jours soit tout ce qui était nécessaire pour générer les résultats représentatifs présentés ici, nous encourageons les chercheurs à tester d'autres paramètres / modèles de TCE ou des souches génétiques pour mener leurs propres tests pilotes, et raccourcir ou prolonger la période de formation au besoin .
Il existe des limites à ce protocole de test qui mérite d'être mentionné. Tout d'abord, le remplacement de l'eau froide et l'assainissement de l'appareil entre les sujets peuvent être à la fois exigeants en temps et physiquement exigeants. Pour minimiser l'effort et le temps du chercheur, les essais devraient être effectués dans une pièce avec un drain de plancher disponible pour faciliter le drainage de l'eau et un accès facile à un évier à eau froide avec un tuyau attaché. Deuxièmement, l'utilisation deLe chronométrage manuel sans enregistrement vidéo introduit un risque d'erreur humaine. Comme le logiciel de suivi peut être prohibitif pour certains laboratoires, cependant, un tel risque est inévitable si le temps de la main doit être utilisé. En outre, comme pour le MWM, la mémoire spatiale ne peut pas être retestée dans les mêmes sujets en utilisant le labyrinthe RWT ( c. -à- d. , Une fois que le labyrinthe a été appris, il ne peut pas être averti pour permettre d'autres tests de mémoire spatiale). En outre, il peut y avoir des effets des déficits moteurs liés au TBI qui pourraient altérer la capacité des souris TBI à effectuer le labyrinthe par rapport aux shams. Dans cet esprit, cependant, il se peut que tous les tests de mémoire spatiale des rongeurs nécessitant un mouvement aient une limitation similaire. Le logiciel de suivi de mouvement pourrait être utilisé avec le RTM pour évaluer la longueur et la vitesse totale du trajet et pour quantifier ces différences. Enfin, les chercheurs doivent être conscients que le labyrinthe RWT décrit ici ne représente pas le seul test de non-natation disponible pour tester la cognition dans les modèles souris de TBI. Autre tLes ests, tels que le y-labyrinthe, ont été utilisés pour distinguer avec succès les souris TBI 21 . Les chercheurs devraient peser les avantages et les inconvénients de chaque test avant de décider de leur utilisation dans leur laboratoire.
Le protocole de labyrinthe RWT décrit ici représente une nouvelle alternative spécifique à la souris aux tests cognitifs validés par le rat actuellement utilisés dans la recherche par modèle de souris et ne nécessite pas de nage. À mesure que l'utilisation de modèles de souris dans la recherche scientifique continue d'augmenter, l'adoption éventuelle d'outils de recherche validés par la souris pourrait conduire à des résultats de recherche plus précis.
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Disclosures
Les auteurs n'ont rien à dévoiler.
Acknowledgments
Cette recherche a été soutenue par l'opportunité de projet pilote de l'Institut pour les sciences de la traduction (UL1TR000423), le Centre de l'Université de Washington sur le développement humain et l'incapacité, et l'Université de Washington Animal Behavior Core and Brain Imaging Core. Nous tenons à remercier le Dr Warren Ladiges pour son rôle dans le développement et la diffusion du design et du protocole original du labyrinthe Radial Water Tread présentés ici. Nous remercions également Toby Cole pour son aide à ce projet.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 35 Gal. Hot Dipped Steel Round Tub | Home Depot | Internet #206638142 | Needed: 1 |
| 1-1/2 in. ABS DWV SPG x SJ Trap Adapter | Home Depot | Internet #100344703, Store SKU #188956 | Needed: 9 |
| 1-3/4 in. x 1-7/16 in. Black Rubber Stopper | Home Depot | Internet #100114974 Store SKU #755844 | Needed: 8 |
| 1-1/2 in. ABS DWV 90 Degree Hub x Hub Elbow | Home Depot | Internet #100346663 Store SKU #188603 | Needed: 1 |
| HDX 10 Gal. Storage Tote |
Home Depot | Internet #202523587 Store SKU #258804 Store SO SKU #258804 | Needed: 1 |
| Impact One Stereotaxic Impactor for CCI | Leica Biosystems | 39463920 | Needed: 1 |
| Vernier Stereotaxic w/ Manual Fine Drive Stereotaxic Instrument for Small Animals | Leica Biosystems | 39463001 | Needed: 1 |
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