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Behavior

Avaliando a insuficiência da memória espacial em um modelo de mouse de lesão cerebral traumática usando um labirinto de roda de água radial

Published: July 17, 2017 doi: 10.3791/55986

Summary

Aqui apresentamos um protocolo para um teste de cognição específico do mouse que não requer natação. Este teste pode ser usado para distinguir com sucesso os camundongos de traumatismos cerebrais traumáticos induzidos pelo impacto cortical controlados dos controles simulados.

Abstract

Apesar do recente aumento no uso de modelos de mouse na pesquisa científica, os pesquisadores continuam a usar tarefas cognitivas que foram originalmente projetadas e validadas para o uso de ratos. O teste de labirinto de Raios Radiais (RWT) de memória espacial (projetado especificamente para camundongos e que não requerem natação) foi mostrado anteriormente para distinguir com sucesso os camundongos TBI induzidos pelo impacto cortical controlados e controles simulados. Aqui, é apresentado um protocolo detalhado para esta tarefa. O labirinto RWT capitaliza a tendência natural de camundongos para evitar áreas abertas a favor de abraçar os lados de um aparelho (thigmotaxis). As paredes do labirinto são alinhadas com nove furos de escape colocados acima do chão do aparelho, e os ratos são treinados para usar pistas visuais para localizar o furo de escape que sai do labirinto. O labirinto é preenchido com uma polegada de água fria, suficiente para motivar a fuga, mas não suficientemente profundo para exigir que o mouse passe a nadar. O período de aquisição leva apenas quatro treinamentosDias, com um teste de retenção de memória no dia cinco e um teste de memória de longo prazo no dia 12. Os resultados relatados aqui sugerem que o labirinto RWT é uma alternativa viável para os testes cognitivos baseados na natação, validados por ratos, na avaliação do espaço Déficits de memória em modelos de mouse de TBI.

Introduction

As deficiências de memória estão entre os sintomas mais comuns relatados por pacientes após lesão cerebral traumática (TBI) 1 , 2 . A identificação e avaliação precisas de déficits de memória análogos em modelos animais de TBI, portanto, são essenciais para a nossa compreensão desta condição e sua gestão. Aqui, apresentamos um protocolo para testar a memória espacial em um modelo de mouse de TBI usando um labirinto de roda de água radial (RWT). Este aparelho foi previamente demonstrado para avaliar os déficits cognitivos em modelos de ratos de TBI 3 induzido por impacto cortical controlado (CCI) e representa uma alternativa potencial para testes de cognição com base em natação e validados por ratos.

A crescente diversidade e disponibilidade de modelos de ratos transgênicos levou a um aumento recente no uso de camundongos sobre ratos na pesquisa científica 4 . Apesar desta mudança, os pesquisadores continuam a depender de um comportamentoTarefas cognitivas que foram originalmente projetadas e validadas para o uso de ratos. Os ensaios mais comuns actualmente utilizadas para avaliar a cognição em ratinhos, o labirinto de água de Morris (MWM) e do labirinto circular Barnes, foram especificamente concebidos para capitalizar comportamentos instintivo encontrados em ratos 5, 6. Considerando as diferenças genéticas, neuroeológicas e cognitivas que existem entre essas duas espécies 4 , não é surpreendente que os ratos continuem de forma consistente nessas tarefas 7 , 8 .

As diferenças dependentes de espécies na habilidade de teste são particularmente importantes em testes cognitivos baseados na natação, como o MWM. Enquanto os ratos e os ratos são nadadores proficientes, os pesquisadores identificaram várias cepas de mouse que desempenham notavelmente mal nas tarefas cognitivas baseadas na natação 9 , 10 , 11 , 12 , 13 . Mesmo em animais de tipo selvagem, os ratos geralmente superam os ratos 7 , 8 . Embora isso possa ser interpretado como uma diferença específica da espécie na memória espacial, testes de seguimento análogos usando um labirinto seco não revelaram diferenças dependentes de espécies no desempenho cognitivo 8 . Uma série de fatores não relacionados à cognição podem explicar esse achado, incluindo diferenças dependentes de espécies na capacidade de natação ou na estratégia de busca. Na verdade, a análise fatorial de estratégias de pesquisa específicas do mouse no MWM mostra que fatores não cognitivos (em particular, thigomotaxis e passividade [ isto é , flutuante]) podem desempenhar um papel mais significativo no desempenho de MWM do que a aprendizagem espacial 14 .

Aqui, demonstramos o uso de um teste cognitivo projetado para capitalizar oComportamento incisivo dos camundongos, e que não requer natação, para medir o comprometimento da memória espacial em um modelo de mouse do TBI induzido por CCI. Enquanto o labirinto RWT (Figura 1 A-B) foi concebida como um novo híbrido do labirinto circular MWM e Barnes, que foi especificamente desenhado para tirar vantagem de comportamento instintivo thigmotactic para ratos 15, 16. O aparelho consiste em uma cuba de aço galvanizado de 32 polegadas de diâmetro, na qual nove orifícios de saída uniformemente espaçados foram aborrecidos. Os orifícios são centrados a 2-1 / 4 polegadas acima do chão da banheira e são dimensionados para caber adaptadores disponíveis de 1/2 polegadas ABS DWV SPG x SJ. Oito das saídas são limitadas do lado de fora e cegadas até uma profundidade de 1 polegada com rolhas de borracha. O nono é conectado por um cotovelo de acrilonitrilo e nitrogênio (ABS) de 90 ° a uma caixa de plástico opaco a partir da qual o mouse pode ser facilmente removido após o teste. Ao longo de umBreve período de aquisição, o mouse é treinado para usar as pistas visuais únicas que alinham o labirinto para localizar esta caixa de fuga. Durante o teste, o labirinto é preenchido com uma polegada de água fria (12-14 ° C), suficientemente aversivo para promover a fuga, mas não suficientemente profundo para que o mouse seja obrigado a nadar.

O labirinto RWT representa uma alternativa de baixo custo e de baixa manutenção para o MWM, e tem sido utilizado com sucesso em ratos envelhecidos e transgênicos 15 , 17 , 18 , 19 e modelos de ratos induzidos por CCI de TBI 3 . O protocolo descrito aqui representa um método simples e eficaz para medir o comprometimento da memória espacial que não requer treinamento pré-lesão e pode ser facilmente modificado para atender às necessidades particulares de um laboratório de pesquisa.

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Protocol

Todos os procedimentos e manipulação de animais foram conduzidos de acordo com as diretrizes de cuidados com animais emitidas pelos Institutos Nacionais de Saúde e pelo Comitê de Uso e Cuidados com Animais da Universidade de Washington.

1. Cirurgia

  1. Anestesiar o mouse a 5% de isoflurano em uma caixa de indução até inconsciente. Confirme a anestesia por uma redução na taxa de respiração e na ausência de um reflexo de retirada após a pitada do dedo do pé.
  2. Manter a anestesia através do cone do nariz em 2-2,5% ao longo da cirurgia. Monitore a taxa de respiração durante a cirurgia para garantir que o mouse permaneça inconsciente.
  3. Coloque o propenso ao mouse sobre uma almofada de aquecimento e posicione o mouse no dispositivo estereotáxico usando barras de ouvido, garantindo que a cabeça seja segura e plana.
  4. Remova o cabelo do couro cabeludo usando creme de depilação. Enxaguar o couro cabeludo com solução salina.
  5. Limpe o local cirúrgico com iodo alternado e 70% de lavagem com etanol.
  6. AdministradorInjeção subcutânea de Lidocaína e Bupivacaína (1 mg / kg) no couro cabeludo.
  7. Com tesoura cirúrgica, faça uma incisão longitudinal longitudinal e retraia a pele para revelar o crânio.
  8. Usando uma serra de trebina de 5 mm, prepara uma craniotomia sobre o córtex frontoparietal esquerdo com ponto central a 2,5 mm atrás da bregma e 2,5 mm à esquerda da linha média. Remova cuidadosamente o círculo de osso para expor o cérebro.
  9. Coloque o dispositivo do pêndulo em uma velocidade de 6 m / s e tempo de espera de 200 ms.
  10. Posicione o dispositivo do pêndulo até que a ponta de impacto convexa de 3 mm toque levemente a superfície do cérebro a 2,5 mm atrás da bregma e 2,55 mm à esquerda da linha média. Retirar a ponta de impacto e diminuir em 1 mm (profundidade de impacto). Quando estiver pronto, dispare o dispositivo, gerando o impacto desejado.
  11. Cubra a craniotomia com um disco de polipropileno estéril cimentado a derma com adesivo de tecido e sutura a incisão fechada.
  12. Remova o mouse da anestesia e dê injeção de IP de BuprEnorfina (0,5 mg / kg).
  13. Permita que o mouse se recupere em uma gaiola limpa, aquecida por uma almofada de aquecimento. O mouse deve ser monitorado quanto a sinais de dor ou dificuldade nas próximas 24 h.
    NOTA: Os controles Sham devem receber tratamento idêntico ao descrito acima, com as etapas 1.8-1.9 omitidas.

2. Construção de labirinto de roda de água radial

  1. Orifícios de saída de orifício 9, grandes o suficiente para acomodar adaptadores de travagem DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 polegadas, em intervalos iguais ao redor da circunferência de uma banheira de aço galvanizado de 32 polegadas de diâmetro. Centralize esses orifícios de saída aproximadamente 2-1 / 4 polegadas acima do chão da banheira.
  2. Coloque um adaptador de tração ABS DWV SPG x SJ de 1-1 / 2 polegadas em cada um dos orifícios de saída e segure com as porcas de anel incluídas.
  3. Com rolhas de borracha, tampa oito das nove saídas do exterior do aparelho. A saída final, não aberta, servirá como a rota de fuga. Não importa qual saída seja designada como a rota de fuga.
  4. Anexe um ABS de 90 °Cotovelo para o exterior da saída restante. A curva de 90 ° serve para evitar que os sujeitos de teste determinem visualmente a rota de fuga correta do interior do labirinto.
  5. Construa a caixa de escape de qualquer caixa opaca capaz de ser higienizada e com aproximadamente 30 cm x 15 cm x 15 cm de tamanho. Corte um buraco no lado da caixa, diretamente acima do chão, grande o suficiente para acomodar um cotovelo ABS de 90 °.
  6. Anexe a caixa de escape à extremidade do cotovelo 90 ° ABS.
  7. Levante ligeiramente a caixa de escape (menos de uma polegada) acima da superfície do chão. Isso permite um amplo espaço para uma almofada de aquecimento elétrico, ou outra fonte de aquecimento, para ser colocado sob a caixa de fuga.
  8. Imprima e elimine pelo menos 5 sugestões visuais únicas. Use imagens simples e de alto contraste que possam ser facilmente discernidas dentro do aparelho. São recomendadas formas de clipart em preto e branco (triângulo, quadrado, círculo).
  9. Usando ímãs, aderir as pistas visuais às paredes internas doaparelho. As indicações devem ser aproximadamente iguais à distância, em torno da circunferência do aparelho.

3. Protocolo de labirinto de roda de água radial

NOTA: O teste de labirinto de água deve começar apenas após o local cirúrgico ter cicatrizado (aproximadamente uma semana após a cirurgia).

  1. Preparando-se para testes.
    1. Permita que os ratos aclimatem a sala de testes durante pelo menos 30 min antes de iniciar o teste.
    2. Desinfecte o aparelho usando um spray de etanol a 70%.
    3. Encha o aparelho com aproximadamente 1 polegada de água fria (12-14 ° C).
    4. Coloque uma almofada de aquecimento elétrico, ou outra fonte de aquecimento, diretamente embaixo da caixa de fuga. Mantenha a caixa de escape escura e quente ao longo da duração do teste.
    5. Posicione uma fonte de luz brilhante sobre o aparelho.
      NOTA: se estiver usando uma lâmpada que possa ser visível para pesquisar animais do próprio aparelho, tenha cuidado para garantir que a lâmpada seja colocada no mesmo poTodos os dias. A lâmpada em si pode representar outra sugestão visual para que os ratos usem para localizar a caixa de fuga, e movê-la drasticamente do dia a dia pode complicar os resultados.
  2. Protocolo de Teste
    1. Retire o mouse da gaiola suavemente pela cauda e coloque no centro do aparelho.
    2. Assim que o animal estiver no aparelho, comece o tempo.
    3. Uma vez que o animal encontrou a saída correta e localizou / entrou na caixa de fuga, pare o tempo e grave o número de segundos necessários para encontrar o caminho correto.
    4. Se o animal tentar subir de um buraco de terminação e não voltar a entrar espontaneamente no labirinto após 10 s, guie o animal de volta ao centro do labirinto à mão.
    5. Se o animal não conseguir encontrar o caminho correto para a caixa de escape dentro de 3 min (180 s), marque o teste como uma falha e registre como 180 s. Guie cuidadosamente o animal em direção ao caminho correto à mão.
    6. Permitir oMouse para permanecer na caixa de fuga por 1 minuto, resto inter-trial.
    7. Uma vez que o restante de 1 min passou, remova o animal da caixa de fuga e regresse à sua gaiola de casa.
    8. Desinfecte completamente a caixa de fuga e saia com um spray de etanol a 70% para evitar que o mouse use as pistas olfativas para localizar a rota de fuga correta. Este passo não deve demorar mais do que alguns segundos.
    9. Retorne o mouse para o labirinto para o próximo teste.
    10. Repita as Etapas 3.2.1-3.2.9 até que o mouse complete um total de três ensaios e tenha localizado ou sido conduzido à caixa de fuga três vezes.
    11. Após o último final de 1 min, volte o mouse para a sua gaiola de casa.
    12. Drenar e substituir a água no aparelho entre animais para garantir uma temperatura constante durante o teste.
    13. Repita as etapas 3.2.1-3.2.12 para cada mouse a ser testado.
    14. No dia seguinte, repita as etapas de preparação 3.2.1-3.2.5. Tenha especial cuidado em garantir que as pistas visuais permaneçamEm posições consistentes entre dias de teste.
    15. Teste os animais usando o protocolo de teste diário acima para três ensaios por dia durante quatro dias (período de treinamento), com um teste final de três testes para retenção de memória no quinto dia. Um sexto teste de três testes (retenção de memória de longo prazo) pode ser dado no dia doze.
    16. Não realize testes entre os dias de teste cinco e doze.
  3. Análise
    1. Se um mouse falhar ao completar o labirinto em menos de 180 s durante um período de dois dias ( ou seja, um total de 6 testes consecutivos, todos obtidos a 180 s), considere o mouse insuficientemente motivado pelas condições de teste e remova da análise.
    2. Calcule a latência média para completar o labirinto para cada assunto, testando a data, com a média de seus três ensaios diários para esse dia.
    3. Obtenha diferenças grupais na retenção de memória utilizando t-testes padrão para comparar grupos no teste do quinto dia e data de teste de memória de longo prazo. Se mMais do que dois grupos estão sendo comparados, a ANOVA unidirecional seguida de uma análise pós-hoc apropriada (como o teste de Tukey) para acompanhar qualquer significância obtida deve ser empregada.
    4. Obtenha diferenças de grupo no período de aquisição (dias 1-4) através de análise de variância de medida repetida.

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Representative Results

O labirinto RWT ( Figura 1 ) foi utilizado para investigar os déficits de memória espacial dependentes de lesões em camundongos atribuídos aleatoriamente para receber um TBI induzido por impacto cortical controlado ou uma cirurgia simulada. A lesão foi gerada usando um impacto cortical accionado por solenóide com uma ponta convexa de 3 mm e os seguintes parâmetros de lesão: velocidade de ataque de 6 m / s, 1 mm de profundidade de penetração e 200 ms de tempo de contato. Os ratos receberam testes cognitivos a partir dos 35 dias após a cirurgia e receberam quatro dias de treinamento (período de aquisição), seguido de um teste de retenção de memória no dia 5 e um teste de memória de longo prazo no dia 12, conforme descrito no acima protocolo. A Figura 2 mostra uma clara distinção de grupo em latência para completar o labirinto ao longo do tempo entre ratos TBI e controles falsos. A análise dos dados apresentados aqui revelou que a latência foi significativamente reduzida em controles simulados em comparação com ratos TBI No dia 5 e no dia 12 ( Figura 2 ). Nenhum sujeito atendeu aos critérios para ser considerado insuficientemente motivado pelas condições de teste e, portanto, nenhum dos ratos foi removido da análise.

figura 1
Figura 1: labirinto de roda de água radial.
O labirinto consiste em uma banheira de aço galvanizado de 32 polegadas com nove saídas, cada 2-1 / 4 polegadas acima do piso do aparelho. Destas saídas, oito terminam depois de cerca de 1 polegada (o chamariz sai), e um conduz a uma caixa de escape aquecida (30 cm x 15 cm x 15 cm) escondida atrás de uma inclinação angular de 90 ° para evitar a confirmação visual da rota de fuga. Ao chegar na caixa de fuga, os sujeitos receberam um descanso interino de 1 minuto. O aparelho é preenchido com uma polegada de água fria (12-14 ° C) para motivar o comportamento de escape e revestido com cinco sugestões visuais únicas para orientação espacial./ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55986/55986fig1large.jpg "target =" _ blank "> Clique aqui para ver uma versão maior dessa figura.

Figura 2
Figura 2: Resultados representativos do labirinto do piso de água radial.
Os ratinhos C57BL / 6J, 10 semanas de idade, receberam choque de controle controlado (n = 11) ou cirurgia simulada (n = 6). Os parâmetros de lesão foram os seguintes: ponta de impacto convexa de 3 mm, velocidade de 6 m / s, profundidade de penetração de 1 mm e tempo de espera de 200 ms. Os ratos começaram a receber testes de labirinto RWT 35 dias após a lesão. O protocolo de teste consistiu em três ensaios por dia durante quatro dias (período de aquisição), seguido de um teste de retenção de memória de três testes no dia cinco e um teste de memória de longo prazo de três ensaios no dia 12. Análise de variável de variância repetida encontrada não Diferenças de grupo durante o período de aquisição (dias 1-4) (F [1,15] = 1,844, p> 0,05). A latência para completar o labirinto foi significativamente elevada em camundongos TBI em comparação com os controles simulados no dia 5 (t [15] = 1,907, p <0,05) e no dia 12 (t [15] = 2,242, p <0,05). Os pontos de dados representam meios de grupo (± SEM). A significância foi determinada pelo teste t padrão (de uma só cauda, ​​com base na hipótese a priori de diferenças de grupo) e é relatado como p <0,05 (*) Clique aqui para ver uma versão maior dessa figura.

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Discussion

O protocolo de labirinto RWT apresentado aqui distingue com sucesso os camundongos TBI induzidos por CCI e os controles simulados, e representa uma alternativa viável, centrada no mouse, ao labirinto circular MWM e Barnes. Enquanto os resultados relatados aqui falam apenas do uso do labirinto RWT em um modelo de mouse TBI, este aparelho foi utilizado com sucesso em modelos idosos e transgênicos, onde o incumprimento induzido pelo estresse resultante de testes baseados em natação feitos usando o MWM impraticável 15 , 17 , 18, 19. Outros modelos de mouse em que o incumprimento ou os déficits motores são potenciais preocupações de pesquisa também podem se beneficiar dessa tarefa cognitiva.

Além das vantagens de projeto discutidas anteriormente, um dos benefícios do labirinto RWT é a sua simplicidade, tanto em termos de construção como de uso. O próprio aparelho é facilmente construído usando relMateriais de baixo custo e podem ser higienizados sem danificar seus componentes, tornando-o ideal para instalações específicas de patógenos livres (SPF). O período de aquisição requer apenas quatro dias de testes, sem treinamento pré-lesão necessário. O teste diário envolve compromisso de tempo mínimo (~ 10 min / animal) e requer pouca experiência antes do domínio. Devido à sua simplicidade em construção e uso, o labirinto RWT é ideal para um laboratório constrangido por um orçamento relativamente apertado e com pouca ou nenhuma experiência de teste comportamental ou cognitivo.

Há várias etapas que os pesquisadores podem tomar para reduzir a variância potencial ao usar o protocolo que descrevemos aqui. Algumas recomendações para obter resultados consistentes e de qualidade incluem testes em horários semelhantes em todas as coortes, usando a mesma pessoa / pessoas para realizar testes sempre que possível, mantendo um ambiente de teste silencioso e silencioso e tratamento extensivo de camundongos antes do teste. Também deve ser enfatizadoDimensionou que enquanto a temperatura da água indicada neste protocolo resultou em condições de teste bem-sucedidas para camundongos C57BL / 6J masculinos, a preferência de temperatura e a hipotermia são fortemente dependentes de deformação e de gênero 20 . Os laboratórios devem realizar seus próprios testes preliminares se estiver usando outras cepas ou camundongos para determinar um intervalo de temperatura efetivo que não induz a hipotermia. Finalmente, as pistas visuais devem ser simples, facilmente distinguíveis e visíveis para os indivíduos durante o teste. Formas básicas em preto e branco (laminadas ou embainhadas em plástico, para que possam ser higienizadas) são preferíveis.

Enquanto o protocolo de teste descrito aqui é relativamente simples, ele poderia ser facilmente adaptado para fornecer aos pesquisadores uma infinidade de informações além da latência para escapar. O software de rastreamento de animais pode ser empregado para coletar uma grande quantidade de parâmetros adicionais e pode ser usado para identificar diferenças específicas do grupo no comportamento de pesquisa. Esse software não é inerenteNecessário para o teste, no entanto, como demonstrado aqui. Além disso, ensaios de sondagem, em que a saída para a caixa de escape é bloqueada ou as indicações visuais foram giradas para indicar saída em um orifício de terminação, podem ser usadas para complementar o protocolo descrito aqui. Enquanto um período de aquisição de quatro dias era tudo o que era necessário para gerar os resultados representativos apresentados aqui, incentivamos os pesquisadores a testar outros parâmetros / modelos de TBI ou cepas genéticas para realizar seus próprios testes piloto e encurtar ou estender o período de treinamento conforme necessário .

Existem limitações com este protocolo de teste que merece ser mencionado. Primeiro, substituir a água fria e desinfetar o aparelho entre os sujeitos pode ser simultaneamente intensivo em tempo e fisicamente exigente. Para minimizar o esforço e o tempo do pesquisador, os testes devem ser conduzidos em uma sala com um dreno de piso disponível para facilitar a drenagem da água e acesso fácil a um coletor de água fria com uma mangueira anexada. Em segundo lugar, o uso deO tempo da mão sem gravação de vídeo apresenta um risco de erro humano. Como o software de rastreamento pode ser proibitivamente caro para alguns laboratórios, no entanto, esse risco é inevitável se o tempo da mão deve ser usado. Além disso, como no MWM, a memória espacial não pode ser reanalisada nos mesmos assuntos usando o labirinto RWT ( ou seja , uma vez que o labirinto foi aprendido, não pode ser aprendido para permitir mais testes de memória espacial). Além disso, pode haver efeitos de déficits motores relacionados ao TBI que podem alterar a capacidade dos ratos TBI para realizar o labirinto em comparação com os shams. Com isso em mente, no entanto, pode ser que todos os testes de memória espacial de roedores que exigem movimento tenham uma limitação similar. O software de rastreamento de movimento poderia ser empregado com o RTM para avaliar o comprimento e a velocidade do caminho total e para quantificar tais diferenças. Finalmente, os pesquisadores devem estar cientes de que o labirinto RWT descrito aqui não representa o único teste de não-natação disponível para testar cognição em modelos de mouse de TBI. Outros tEsts, como o y-labirinto, foram usados ​​para distinguir com sucesso a farsa de ratos TBI 21 . Os pesquisadores devem pesar os prós e contras de cada teste antes de decidir qual o uso em seu laboratório.

O protocolo de labirinto RWT descrito aqui representa uma nova alternativa específica do mouse para os testes cognitivos validados por ratos atualmente utilizados na pesquisa com modelos de mouse e não requer natação. À medida que o uso de modelos de mouse na pesquisa científica continua a aumentar, a eventual adoção de ferramentas de pesquisa validadas com mouse pode levar a resultados de pesquisa mais precisos.

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Disclosures

Os autores não têm nada a divulgar.

Acknowledgments

Esta pesquisa foi apoiada pela oportunidade de bolsa de projeto piloto do Instituto para Ciências da Saúde de Translational (UL1TR000423), o Centro de Desenvolvimento Humano e Deficiência da Universidade de Washington, e o Core and Behavior Core da Universidade de Washington, Core and Brain Imaging Core. Gostaríamos de agradecer o Dr. Warren Ladiges por seu papel no desenvolvimento e divulgação do projeto e protocolo de labirinto Radial Water Tread original aqui apresentado. Agradecemos também a Toby Cole por sua assistência neste projeto.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
35 Gal. Hot Dipped Steel Round Tub Home Depot Internet #206638142 Needed: 1
1-1/2 in. ABS DWV SPG x SJ Trap Adapter Home Depot Internet #100344703, Store SKU #188956 Needed: 9
1-3/4 in. x 1-7/16 in. Black Rubber Stopper Home Depot Internet #100114974 Store SKU #755844 Needed: 8
1-1/2 in. ABS DWV 90 Degree Hub x Hub Elbow Home Depot Internet #100346663 Store SKU #188603 Needed: 1
HDX
10 Gal. Storage Tote
Home Depot Internet #202523587 Store SKU #258804 Store SO SKU #258804 Needed: 1
Impact One Stereotaxic Impactor for CCI Leica Biosystems 39463920 Needed: 1
Vernier Stereotaxic w/ Manual Fine Drive Stereotaxic Instrument for Small Animals Leica Biosystems 39463001 Needed: 1

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Tags

Comportamento Problema 125 lesão cerebral traumática testes cognitivos testes comportamentais labirinto aquático impacto controlado-cortical neurociência modelo de mouse camundongos
Avaliando a insuficiência da memória espacial em um modelo de mouse de lesão cerebral traumática usando um labirinto de roda de água radial
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Cline, M. M., Ostlie, M. A., Cross,More

Cline, M. M., Ostlie, M. A., Cross, C. G., Garwin, G. G., Minoshima, S., Cross, D. J. Assessing Spatial Memory Impairment in a Mouse Model of Traumatic Brain Injury Using a Radial Water Tread Maze. J. Vis. Exp. (125), e55986, doi:10.3791/55986 (2017).

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