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Medicine

다시는 vivo에서 선박 지향 70% 쥐 부분 간 이식 Arterialized Hepatectomy

Published: April 8, 2018 doi: 10.3791/56392
* These authors contributed equally

Summary

여기, 다시 arterialized 쥐 부분 간 이식 관련 프로토콜 제공 됩니다. 특히, 70% 간 선박 지향 hepatectomy의 업데이트 기술을 사용 하 여 절제 vivo에서 했다. 간 동맥은 엔드-투-사이드 방식으로 개축 되었다. 팔목 기술 infrahepatic 베 나 정 맥 문 합 시간을 수정 했습니다.

Abstract

분할된 간 이식 및 살아있는 간 기증자 간 이식 간 장기에서 더 효율적인 방법으로 활용 하는 병원에서 개발 되었다. 더 잘 이해 하려면 이러한 수술 절차 뒤에 메커니즘, 쥐 부분 간 이식 (PLTx) 모델 관련 수술 연구를 위해 설립 되었다. 쥐 PLTx 모델의 복잡성 때문에 자세한 설명과 함께 프로토콜이 필요 합니다. 게시 된 문서 이전 프로토콜 hepatectomy 비보 전 50% 쥐 PLTx를 달성 하기 위해 사용 되었다 보고. 이 프로토콜을 달리 vivo에서 70 %hepatectomy 다시 arterialized PLTx를 도입 했습니다. 업데이트 된 선박 지향 hepatectomy 쥐 microsurgical 절차를 수정 하기 위해 PLTx에 통합 되었다. 포털 정 맥과 간 동맥 왼쪽된 측면 엽과 중간 엽의 개별적으로 해 부 되었고 나머지 간 그 루터 기에서 출혈의 확률 감소는 간 실질의 제거 하기 전에 출혈. 또한, 일반적인 간 동맥 확대 적절 한 간 동맥 사이 엔드-투-사이드 혈관 문 합 간 동맥을 다시 arterialize을 소개 했다. 이 엔드-투-사이드 혈관 문 합 기법을 사용 하 여 그로 인하여 손 봉합의 어려움을 감소 하 고 anastomotic patency의 높은 속도 유지 하는 문 합의 직경 확대 했다. 또한, infrahepatic 베 나 정 맥의 갑 문 합을 약간 수정 했습니다. 받는 사람의 베 나 정 맥 주위 원주 간 실질의 섹션 갑 문 합 혈관 루멘의 3 차원 모양을 유지 하는 동안 보존 되었다. 간 실질의이 섹션은 문 합을 완료 한 후 제거 되었습니다. 이 수정, 숙박 봉합의 배치와 관련 된 단계 갑 문 합 시간을 단축 함으로써 추가 생략 되었다. 쥐 PLTx의이 프로토콜을 사용 하 여 낮은 간 효소 수준, 그대로 간 lobular 건축과 높은 생존 율은 미세 후 달성 했다.

Introduction

현재, 기증된 간 기다리는 환자의 수와 간 기증된 장기의 수 사이 큰 차이가 있다. 간 장기의 부족은 세계적인 문제 이다. 기증자의 수영장을 확장, 분할 간 이식 (LTx), 살아있는 기증자 LTx 부분 간 이식1로 사용 하 여 개발 되었다.

추가 부분 간 이식 (PLTx) 뒤에 메커니즘을 조사, 관련 동물 모델 설립된2,3,,45되었습니다. 쥐 PLTx에서 간 엽 있으며 절제 vivo에서 ex vivo LTx 살아있는 기증자의 상태를 모방 하 여 인간의 LTx, 각각, 분할. 시각 실험의 저널에 에서 발표 된 논문 50% 쥐 PLTx는 ex vivo hepatectomy5를 사용 하 여 관련 된 상세한 프로토콜을 제시. 그러나, vivo에서 hepatectomy와 쥐 PLTx 하지 아직 알려졌다 시각화 된 문학에서.

Vivo에서비보 전 hepatectomies 차이 자체 hepatectomy 수행의 기술 또한 많은 외과 연구 쥐 PTLx를 사용 하 여 현재, PLTx. 결과 결정에 중요 한 역할 담당 모델, 간 엽 간 엽2,3,6,7,,89의 작은 꽃 자루에는 간단한 결 찰 후 절제 했다. 그러나, 다른 모양 및 크기는 간단한 결 찰 절제술 다른 간 엽으로 모든 간 엽에 적합 하지 않습니다 하기 전에 배치. 중간 엽의 기지에서 간단한 결 찰 결국 부분 간 이식10,11의 유출에 영향을 미칠 수 있습니다 베 나 정 맥의 수축이 발생의 높은 위험을 운반 합니다. 따라서, 쥐 간 해부학의 지식을 바탕으로 하는 업데이트 hepatectomy 기법 쥐 PTLx의 분야에서 필요 합니다.

이 연구에서 설명 하는 프로토콜에 업데이트 선박 지향 70 %hepatectomy 쥐 PLTx의 절차에 통합 되었다. 포털 정 맥과 왼쪽된 측면 엽 (LLL) 및 중간 엽 (ML)의 간 동맥 해 부 되었고 간 실질의 제거 하기 전에 개별적으로 분할. 그런 다음, LLL와 ML의 간장 혈관 봉합을 피어 싱으로 출혈 했다. 개별 ligations 여러 날카로운 봉합을 사용 하 여 보다 간단한 결 찰을 배치, 여는 ML의 나머지 그 루터 기 베 나 정 맥에 걸쳐 수 있었습니다. 따라서, infrahepatic 베 나 카바 수술 결 찰으로 인 한 수축 피할 수 있었다. 또한, 개별 ligations 간 실질의 감소는 간 남은 그 루터 기 실험11혈액 손실의 영향을 최소화에 출혈의 속도 전에 의해 LLL와 ML의 혈액 공급의 폐색.

Microsurgeons에 대 한이의 매우 작은 직경 때문에 간 이식의 적절 한 간 동맥 (PHA)를 재구성 하 중요 한 도전 이다. 간 동맥을 재구성을 위해 수많은 microsurgical 기술 제안된14 되었습니다 비록 LTx 재 arterialization 인지 진정으로 필요한의 질문은 아직 논쟁12,,1314, . 여기, 우리는 엔드-투-사이드 방식 확대 PHA를 anastomoses 일반적인 간 동맥 (차) 간 이식의 다시 arterialization에 대 한 새로운 기술을 소개 합니다. 이 엔드-투-사이드 기법을 사용 하 여 두 간 동맥 더 큰 직경의 문 합으로 연결 됩니다. 큰는 문 합의 직경은, 쉽게 손을 봉합 수행 이며 큰는 문 합의는 patency에 개선 된다.

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Protocol

모든 절차는 설치류 수술 15원 의료 대학 동물 정책 및 복지 위원회 의해 승인의 지침을 따 랐 다.

1입니다. 동물

  1. 남성 루이스 쥐 기증자와 받는 사람으로 250-350 g를 무게를 사용 합니다.

2. 신 환경

  1. 20 X 7 X에서에서까지 확대와 함께 수술 현미경 microsurgical 모든 절차를 수행 합니다. 작업에서 사용 하기 전에 모든 수술 기구를 소독.
    참고: 수술 실 및 운영 테이블은 깨끗 하지만 하지 살 균.

3. 기본 Microsurgical 기동

  1. 해 부, 및 선박을 동원 합니다.
    1. 첫째, 바로 마이크로-집게를 사용 하 여 혈관 주변 조직이 들어.
    2. 둘째, 반복 및 부드럽게 열고는 좋은 팁 수 자르면 선박의 앞쪽 벽에 주변 조직을 껍질 곡선된 마이크로 집게의 팁을 닫습니다.
    3. 셋째, 바로 마이크로-집게를 사용 하 여 클램프 및 후부 공간 폭로 선박을 리프트. 그런 다음 곡선된 마이크로 집게의 끝을 사용 하 여 주위 조직의 혈관의 후부 벽에 껍질. 마지막으로, 연결 된 모든 주변 조직 없이 대머리 선박을 제시 해야 합니다.
  2. 분할 또는 이중 선 하 고 선박 또는 조직 분열.
    1. 첫째, 선박 또는 두 개의 마이크로 집게16를 사용 하 여 조직에 두 광장 매듭을 묶어. 둘째, 선박 또는 마이크로-가 위를 사용 하 여 두 개의 광장 매듭 사이 조직 잘라.

4. 갑 및 담 즙 텐트의 준비

  1. 포털 정 맥의 수 갑을 확인 하 고 각각 담 즙 텐트 사용 하는 동안 12 게이지와 14 게이지 정 맥 카 테 터를 사용 하 여 infrahepatic 베 나 정 맥은 22 게이지 정 맥 카 테 테 르. 수 갑 바디 부분과 손잡이 부분으로 이루어져 있다. 팔목 (그림 1)에 혈관 벽을 보호 하는 신체 부분에는 fillister를 사용 합니다.

5. 마 취와 쥐의 정착

  1. 부드럽게 유도 상자에 흡입 마 취 유도를 0.5 L/min의 산소와 혼합 5 %isoflurane 루이스 쥐를 넣습니다. Isoflurane의 과다에 의해 발생 하는 예기치 않은 죽음을 방지 하기 위해 쥐의 호흡 주파수를 모니터링 합니다. Isoflurane 쥐 통증 자극에 응답 하지 않는 경우 마 취를 유지 하기 위해 2%의 농도 줄일 수 있습니다.
  2. 멸 균된 외과 매트 수건 적용 30 cm x 30 cm 참나무 판자로 쥐를 이동 하 고 부정사 위치에 쥐를 놓습니다. 내측 테이프를 사용 하 여 쥐의 4 개의 사지 고 이후 4 개의 압정으로 테이프를 수정. 한 70% 알코올을 사용 하 여 피부를 소독 시간과 iodophors 세 번.

6. 기증자 작업

  1. 신 필드 노출
    1. 전기 coagulator를 사용 하 여 양측 열 등 한 상 복 부 혈관 transect에 상단 복 부에 작은 가로 절 개를 잘라.
    2. 수술가 위를 사용 하 여 상단 복 부에 늑 골 여백 가까이 가로 절 개를 확장 합니다.
    3. 역 및 두개골 측면에 상단 복 부 벽과 칼 프로세스를 각각 수정.
    4. 2 개의 젖은 면 지팡이와 복 부 구멍에서 소장을 이동 합니다. 거 즈의 젖은 조각을 사용 하 여 내장을 커버.
  2. 인 대를 잘라 하 고 트리밍 suprahepatic 베 나 정 맥 (SHVC)
    1. 순서에 falciformal 인 대, 관상 인 대와 삼각 인 대를 잘라.
    2. 무료 마이크로 집게를 사용 하 여 횡 경 막에서 왼쪽된 횡 격 막 정 맥. 다음, 이중 6-0 비단 봉합을 사용 하 여 선.
      참고:이 단계에서이 정 맥을 분할 하지 않습니다.
    3. 열 등 한 꼬리가 엽 hepatoesophageal 인 대와 동맥을 마이크로-가 위를 사용 하 여 gastrohepatic 인 대를 잘라.
  3. 절제 (그림 2) 전에 LLL와 ML의 혈액 공급 경색
    1. 첫째, 곡선된 겸 자 사용 하 여 신중 하 게 해 부하는 실질에서 LLL와 왼쪽된 중간 엽 (내 인생을 사랑)를 공급 하는 태양광 발전의 일반적인 간선의 후부 벽. 둘째, 더블 선과 함께 해당 담 관 그리고 간 동맥으로 나누어.
    2. 해 부하 고이 정 맥 간 실질에 밀접 하 게 부합 하기 때문에 부드럽게는 RML의 PV를 나눕니다.
      참고: 14의 X 확대 것이 좋습니다. RML의 태양광에 가까운 오른쪽 우수한 엽의 PV를 다치게 하지 않습니다.
    3. 간 동맥 및 담 즙 덕트는 RML의 증후군 사이 위치한 RML의 식별 하 고 내 인생을 사랑. 이중 선 고 간 동맥 및 담 즙 덕트의 6-0 비단 봉합을 사용 하 여 RML 나눕니다.
      참고: 어두운 빨간색 빨간색에서 LLL와 ML의 색상에 변화를 혈액 공급의 성공적인 폐색의 지표 이다. 혈관 해부학의 철저 한 지식을 식별 하 고 해당 선박을 해 부에 필수적 이다. 쥐에서 이전 연구는 명확 하 게 부식 캐스트10간 해부학 그림.
  4. Resecting는 LLL
    1. 작은 꽃 자루를 사용 하 여 원주를 3-0 비단 봉합 왼쪽된 측면 간 정 맥의 혈액 흐름을 막다 LLL의 선 마이크로-가 위를 사용 하 여 바로 위에 간 질량 제거를 결 찰 간 잘라.
  5. Resecting 사랑 내 인생
    1. 모기 hemostatic 집게 (그림 3A) 중간 균열을 따라 배치 하 여 왼쪽된 중간 간 정 맥을 클램프. 모두 제거 사랑의 간 실질 내 인생 바로 위의 마이크로-가 위를 사용 하 여 집게.
    2. 장소 간 왼쪽된 중간을 둘러싼 집게 아래 즉시 간 실질을 침투 날카로운 봉합 정 맥. 그런 다음에 집게를 해제 하기 전에 선 광장 매듭 넥타이.
    3. 집게를 둘러싸고 사랑 오픈 절 개의 나머지 내 인생에서 또 다른 2 개의 날카로운 봉합을 놓습니다. 그런 다음 절 개의 나머지 부분을 두 광장 매듭 넥타이. 출혈에 대 한 확인 하기 모기 hemostatic 집게를 놓습니다.
  6. RML (그림 4) resecting
    1. 장소를 SHVC (그림 4B)에 0.5 cm의 거리에서 RML의 기지를 둘러싸고 모기 hemostatic 집게. 다음, 크로스-클램프 가리고 오른쪽 중간 간 정 맥을 모기 hemostatic 집게를 사용 하 여 기본.
    2. 마이크로-가 위를 사용 하는 집게의 위쪽 표면 따라 RML의 간 실질의 모두 제거 합니다. 매우는 ML의 평범 하 고 얇은 그 루터 기를 떠나 집게의 표면에 가까이 작동 해야 합니다.
    3. 장소는 겸 자에서 간 실질을 침투 첫 날카로운 봉합을 둘러싸고 중간 중간 간 정 맥. 그런 다음, 중간 중간 간 정 맥 선 하 광장 매듭 넥타이. 동일한 방법을 사용 하 여 오른쪽 중간 간 정 맥 선에 두 번째 피어 싱 봉합을 놓습니다. 6.5.2에 설명에 따라 절 개의 나머지에 가까운 또 다른 2 개의 날카로운 봉합을 놓습니다.
  7. 트리밍 infrahepatic 베 나 정 맥 (IHVC)
    1. IHVC 노출 retroperitoneum 오픈 컷. 곡선된 마이크로-집게를 사용 하 여 IHVC 및 주위 조직에서 오른쪽 신장 정 맥. 해 부와 후방에서 IHVC로 빼낸 바로 부 신 정 맥 선.
    2. 오른쪽 신장 정 맥 및 충분 한 혈관 길이 나중 단계에는 IHVC에 팔목을 설치 하기 바로 신장 동맥 ligating 후 오른쪽 신을 수행 합니다.
  8. 담 즙 텐트 설치
    1. 마이크로-집게를 사용 하 여 첫 번째 간 hilum에서 일반적인 담 관 (CBD)를 동원. Pyloric 정 맥의 교차 지점에서 도심 및 도심 6-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 선.
    2. 도심에서 결 찰의 근 위 측에의 앞쪽 벽에 가로 절 개를 잘라. 22 게이지 정 맥 카 테 터, 도심 절 개를 통해의 루멘으로 만들어진 담 즙 스 텐트를 삽입 합니다. 보안을 완곡으로 담 즙 텐트 6-0 비단 봉합 합니다. 2 6-0 비단 봉합 사이 도심 transect
  9. PV를 트리밍
    1. 6-0 비단 봉합 원심 PV를 사용 하 여 pyloric 정 맥 선 다음으로, 태양광에 가까운 7-0 폴 리 프로필 렌 봉합 사를 사용 하 여 pyloric 정 맥 선. 이러한 두 개의 ligations 사이 pyloric 정 맥 transect 더블 선 하 고 같은 방식으로 비장 정 맥을 나눕니다.
      참고: 7-0 폴 리 프로필 렌 봉합 사를 사용 하 여 6-0 비단 봉합의 저것과 비교 된 작은 결 찰 매듭을 만들 그릇을 위하여. 큰 매듭 마지막 단계에서 팔목 설치를 방해할 수 있습니다. Pyloric 정 맥과 비장 정 맥의 혈관 벽은 얇은, 부드러운 조작 해 부 동안 필수적입니다 그래서. 더 많은 기술적인 설명와 일러스트 pyloric 정 맥과 비장 정 맥을 나누어 하는 해 부에 대 한 이전 게시 문서 작업17전에 읽어야 합니다.
  10. 일반적인 간 동맥 (차) 트리밍
    1. 신중 하 게 무료는 차 및 그것의 2 개의 bifurcations는 PHA와 gastroduodenal 동맥 (GDA), 두 개의 마이크로-집게를 사용 하 여 주변 조직에서. 이중에 GDA GDA 차의 분기점에서 6-0 비단 봉합을 사용 하 여 선.
  11. Heparinizing와 perfusing 간 이식
    1. 음 경 정 맥을 통해 염 분의 1 mL에 헤 파 린 50 IU를 주사. 조직의 heparinization을 달성 하기 위해 5 분을 기다립니다.
    2. 크로스-클램프 PV, IHVC 및 차 간 혈액 흐름을 막다에 세 곡선된 마이크로-serrefines를 사용 하 여. 22-게이지 카 테 터를 삽입 하는 PV의 앞쪽 벽에 작은 절 개를 수행 합니다. Perfuse 20 cmH2오의 압력 하에서 카 테 터를 통해 4 ° C에 식 염 수와 부분 간 이식
    3. 빠르게 잘라 열고 흉 강 intrathoracic 베 나 카바 수술가 위를 사용 하 여 혈액과 perfusate에 밖으로 배출 하. 전체 부분 간 이식의 색 노란색 획 일 하 게 될 때까지 관류를 중단 하지 마십시오.
  12. Explanting 부분 간 이식
    1. 마이크로-가 위를 사용 하 여 두 개의 ligations (에서 설명된 6.2.2) 사이 왼쪽된 횡 격 막 정 맥 transect
    2. 다음, transect 혈관 길이 가능한 한 길게 지키기 위하여 횡 경 막에 가까운 SHVC. 마이크로-가 위를 사용 하 여 비장 정 맥의 수준에서 PV transect 이중 ligations 사이 GDA를 분할 하 고 transect celiac 트렁크에 가까운 차.
    3. 6.7.2에 실크 결 찰 배치 6-0의 원심 측에 부 신 혈관 transect 수술가 위를 사용 하 여 왼쪽된 신장 정 맥의 수준에서 IHVC transect
    4. 다시 테이블 접시 (30mm 문화 접시) 부분 간 4 ° c.에 염 분 가득한 소비 세 및 전송

7. 다시 테이블 작업 (이식 준비)

  1. 혈관 수 갑 (그림 5) 설치
    1. 12 게이지 정 맥 카 테 터 마이크로 집게를 사용 하 여 만든 팔목의 루멘을 통해 PV를 당겨. 일시적으로 팔목 핸들과 PV 선박 클램프를 사용 하 여 함께 해결. 팔목의 외부 표면을 커버 하 버트 PV 배 벽. 보안 혈관 벽 및 완곡 한 6-0 비단 봉합 사 위치에 커 프.
      참고: 선박을 트위스트 하지 마십시오. 팔목 핸들 12 시 방향으로 유지 되어야 한다.
    2. IHVC 갑 7.1.1의 설명에 따라 설치 합니다.
  2. 미리는 SHVC에 두 개의 숙박 봉합
    1. SHVC의 혈관 벽에 침투에서 외부에 2 개를 사용 하 여 내부 7-0 폴 리 프로필 렌 봉합은 3 시와 9 시 방향에 따라 각각.
      참고: 매듭에 연결 하지 마십시오.
  3. 유지는 이식
    1. 부분 간 이식 보존 백 테이블 작업 후 4 ° C에 식 염 수에 담가.

8. 받는 사람 작업

  1. 6.1-6.2 및 요원 필드를 표시 하려면 받는 사람에서 오른쪽 신을 제외한 6.7 절차 transect 인 대 및 혈관 트림 반복 합니다.
  2. IHVC, 담 관, 간 동맥과 문맥 받는 준비
    1. 먼저, 오른쪽 신장 정 맥으로 IHVC의 섹션을 동원. 둘째, 6-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 바로 부 신 혈관 선. 셋째, 마이크로-집게를 사용 하 여 첫 번째 간 hilum에서 도심 동원.
      참고: 도심 주위 지방 조직에서 트림 하지 마십시오.
    2. 6-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 이중 결 찰 후 간장 hilum에서 첫 번째 분기에 도심 transect 다음, 6-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 이중 결 찰 후 마이크로-가 위를 사용 하 여 PHA transect. 동원 pyloric 정 맥을 간 hilum에서 태양광의 섹션.
  3. 간 뒤 동원
    1. 간 2 개의 면 지팡이 사용 하 여 왼쪽 받는 사람을 철회. 다음, 잘라 간 뒤쪽에서 인 대는 SHVC에서 바로 부 신 정 맥을 이전 시각화 된 제18에 설명 된 대로. 이 후, 고무 밴드는 SHVC의 뒤 공간을 통해 소개 합니다.
  4. Anhepatic 단계 동안 악기와 자료를 준비
    1. 다시 모든 악기 및 anhepatic 단계 곡선 바늘 5 mL 주사기 등에서 요구 되는 물자의 가용성, 마이크로-가 위, 마이크로 바늘 홀더, 마이크로-집게, 두 개의 마이크로 hemostatic 집게, 두 개의 7-0 폴 리 프로필 렌 봉합 및 6-0 실크 봉합 사 물자입니다.
      참고: 자료 또는 악기에 대 한 검색 anhepatic 단계를 연장할 수 있습니다.
  5. 받는 사람에서 간 절 개
    1. 크로스 클램프 바로 위에 신장 정 맥 혈관 클램프 pyloric 정 맥 바로 위에 태양광을 사용 하 여 IHVC PV에 클램프 해제 될 때까지이 순간에서 anhepatic 단계 기간을 기록 합니다.
    2. 즉시 isoflurane 0.5%의 농도 줄일 수 있습니다.
    3. 미리 설정 된 고무 밴드 SHVC과 횡 경 막 아래로 당겨. 클램프는 SHVC에 0.5 c m의 거리를 유지 하는 불독 클램프를 사용 하 여 intrathoracic 베 나 정 맥과 횡 경 막의 부분.
      참고: 쥐의 폐를 클램프 하지 마십시오.
    4. 마이크로-가 위를 사용 하 여 혈관 벽을 최대한 오래 유지 하는 간 실질의 위쪽 가장자리를 따라 신중 하 게 SHVC의 혈관 벽을 잘라.
    5. 마이크로-가 위를 사용 하 여 간장 hilum의 첫 번째 분기에 PV transect 다음, 열 등 한 베 나 정 맥 혈관 벽, 베 나 정 맥 주위 원주 간 실질을 떠나 보다는 바로 열 등 한 엽의 실질 transect. IHVC에 4 m m의 거리에서 바로 열 등 엽에서 최첨단을 유지. Transecting 혈관, 후 복 부 구멍에서 전체 간을 이동 합니다.
  6. SHVC을 재구성
    1. 복 부 구멍 orthotopically에 부분 간 이식 장소. 피어스는 SHVC에서 안쪽에 밖으로 두 미리 숙박 봉합을 사용 하 여 3 시와 9 시 방향에 따라 혈관 벽. 오른쪽과 왼쪽을 당겨 두 숙박 봉합 후 그들은 그들의 자신의 끝을 매듭에 묶여있다.
    2. SHVC 혈관 벽에서 외부에 내부 매듭 주변 혈관 루멘으로 오른쪽 숙박 봉합 바늘을 소개 하는 3 시 방향에 피어스.
    3. 9 시 방향으로 3 시 방향에서 혈관 루멘 내부 실행 봉합으로는 SHVC의 후부 벽 anastomose.
    4. 9 시 방향의 모서리에 혈관 벽에서 내부에 외부 혈관 루멘에서 바늘을 소개 하는 매듭에 가까운 피어스.
    5. 이 봉합 사를 사용 하 여 3 9 시 방향에서 혈관 루멘 외부 실행 봉합 사를 사용 하 여 앞쪽 벽 anastomose는 시 방향. 마지막으로, 넥타이 그것의 자신의 끝을 봉합 3 번 (그림 6).
      참고: 2-3 바늘 마지막 전에 공기 방울 밖으로 강제로 복원된 SHVC의 루멘으로 염 분의 3-5 mL를 주사. SHVC 문 합에 대 한 더 자세한 설명은 Delriviere 그 외 여러분 에 의해 문서에서 찾을 수 있습니다. 19.
  7. PV를 재구성
    1. 장소 2 7 0 폴 리 프로필 렌 봉합 7.2에서 설명에 따라 받는 사람의 PV의 끝에 있어. 혈관 벽을 확장 하는 반대 방향으로 두 개의 숙박 봉합을 당겨. 두 개의 마이크로-모기 hemostatic 집게를 사용 하 여 두 개의 숙박 봉합을 수정 합니다.
    2. 공기 방울 밖으로 강제로 받는 태양광의 혈관 루멘으로 염 분의 약 1 mL를 주사. 신속 하 게 마이크로 집게를 사용 하 여 열 때 강제로 받는 태양광의 혈관 루멘으로 문맥 팔목을 삽입 합니다. 갑 문 합 원주 6-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 보호 합니다. 크로스 클램프는 차
  8. 간 이식 하는 reperfusion
    1. 간 이식 reperfuse 순서로 SHVC와 PV에 클램프를 놓습니다. Anhepatic 위상의 시간을 기록 합니다. 문 합의 출혈에 대 한 확인 합니다. Isoflurane 통증 자극에 대 한 쥐의 반응에 따라 1-2%의 농도 증가.
  9. IHVC을 재구성
    1. 공기 방울 밖으로 강제로 받는 IHVC의 혈관 루멘으로 염 분의 1 mL를 주사. 원주 간 실질 (그림 7)에서 지원 되는 IHVC의 원통형 관 루멘에 팔목을 삽입 합니다. 6-0는 IHVC의 뒤 공간을 통해 실크 봉합 사를 소개 합니다. 신속 하 게 갑 문 합 6-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 보호 합니다.
    2. 두 선박 클램프를 관류를 다시 시작 하려면 IHVC에 놓습니다. 마이크로-가 위를 사용 하 여 원주 실크 봉합 사 위의 신중 하 게 주변 간 실질에서 트림.
  10. 간 동맥을 재구성
    1. 차 간 이식에서의 혈관 벽에 침투에서 외부를 사용 하 여 두 내부 11-0 폴 리 프로필 렌 봉합은 3 시와 9 시 방향에 각각. 혈액의 흐름에 차 및 GDA의 두 곡선된 마이크로-serrefines를 사용 하 여 받는 사람에 가리고
    2. 루트에서 받는 사람 혈관 루멘 마이크로-가 위를 사용 하 여 노출의 PHA transect 경도 차 간 이식에서의 직경에 맞게 혈관 벽의 절단 부분에서 받는 PHA의 혈관 루멘 확대.
    3. SHVC 문 합 (8.6.2-8.6.7)에 대 한 설명 실행 봉합 기술을 사용 하 여 엔드-투-사이드 방식에서 확대 PHA에 간 이식의 차 anastomose.
      참고: 자세한 그림과 찾을 수 있습니다 문서에 황 외14.
  11. CBD를 재구성
    1. 담 즙 덕트의 두 끝 사이의 거리를 줄이기 위해 복 부 구멍으로 내장을 다시 이동 합니다. 받는 사람에서 담 즙 덕트의 앞쪽 벽에 가로 절 개를 수행 합니다.
    2. 가로 절 개를 통해 받는 사람에는 담 즙 덕트의 루멘에 삽입 하는 부분 간 이식에 담 즙 스텐 아래로 당겨. 텐트는 6-0 원주 실크 봉합 사를 사용 하 여 보호 합니다.
    3. 서로 문 합의 긴장을 줄이기 위해 담 즙 덕트에서 두 6-0 원주 실크 봉합 넥타이.
  12. 복 부를 폐쇄
    1. 실행 중인 봉합 패턴에서 3-0 비단 봉합 사를 사용 하 여 2 개의 층에 복 부를 닫습니다.

9. 수술 후 치료 (진통 및 항생제)

  1. 피하 0.1 mg/kg buprenorphine 가진 모든 받는 사람을 처리 합니다. 진통 약물 뿐만 아니라 피하 세 (16 mg/kg)를 관리할 수 있습니다. 수도 물과 표준 실험실 쥐 광고 libitum에 동물 차를 제공 합니다.

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Representative Results

총, syngeneic arterialized 쥐 PLTx의 31 경우가이 프로토콜을 사용 하 여 완료 되었습니다. 모든 받는 사람에 게 관찰 시간의 끝까지 살아남았다. 받는 사람의 몸 무게는 수술 후 다음날 (포드) 4 복구 하기 시작 했다. 몸 무게의 기울기 포드 6 (그림 8), 받는 사람의 복구를 직접 암시 후 일반 루이스 쥐의 가까이 이었다. 조직학, 담 즙 덕트의 약간의 확산은 받는 사람에 관찰 하 고는 받는 사람 간 lobular 아키텍처는 그대로. 아니 괴 사 또는 명백한 정현파 팽창 (그림 9) 관찰 되었다. 알라닌 aminotransferase (ALT)의 혈 청 수준은 정상 범위 내에 포드 30 (그림 10)에서 했다. 황 달으로 인 한 노란색 소변의 없음의 경우는 이러한 받는 사람, 매일 침구 케이지를 확인 하 여 표시 했다, 담 즙 텐트의 patency 나타내는에서 관찰 되었다. 포드 30에 빌리 루빈의 정상적인 혈 청 수준의 추가 담 즙 덕트 (그림 11)의 성공적인 재건을 확인 했다. 간 동맥의 patency PHA는 문 합의 근 위 측에 희생 동안에 transecting에 의해 확인 되었다. PHA에서 출혈 암시 하는 문 합의 patency 받는 사람 모두에서 관찰 되었다. 모든 이러한 결과 간 이식 잘 작용을 제안 했다.

Anhepatic 위상의 평균 기간 이었다 23.03 ± 2.3 분. PV의 갑 문 합은 IHVC의 갑 문 합 2.05 ± 0.71 PV, 숙박 봉합 배치 단계를 저장 하는 IHVC의 갑 문 합의 갑 문 합을 분 비해 했다 아나 스 그로 인하여 더 단축 하는 동안 4.68 ± 0.77 분 했다 tomosis 시간 (표 1)입니다.

70 %hepatectomy 중는 ML의 나머지 그 루터 기에서 출혈의 두 경우는 선박 지향 hepatectomy의 31 사건 가운데 관찰 되었다. 이전 실험에서 8 중 18 배 지향 hepatectomy 실질 보존 (그림 12)의 경우에 관찰 되었다는 ML의 나머지 그 루터 기에서 출혈. 이 결과 70 %hepatectomy 배 지향을 사용 하 여 후는 ML의 나머지 간 그 루터 기에서 출혈의 더 낮은 비율을 가리킨다.

Figure 1
그림 1 . 수 갑 그리고 담 즙 텐트입니다.
(A, C) 수 갑의 크기입니다. (팔목에 B) fillister입니다. (D)는 본문 및 팔목의 손잡이 부분입니다. (E) (a) IHVC 갑; (PV b) 커 프 스입니다. (F) 담 즙 텐트입니다. 눈금 막대 = 5 m m. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 2
그림 2 . LLL와 ML의 혈액 공급을 막다에.
(A) PV, 간 동맥 및 담 즙의 일반적인 간선 덕트는 LLL의 고 내 인생을 사랑 해요.
(B) 변색은 LLL의 일반적인 트렁크 transecting 후 내 인생을 사랑 하 고.
(C) RML의 문맥입니다.
(D) 모든 PVs, 간 동맥 및 담 즙 덕트는 LLL는 ML의 transected 했다.
눈금 막대 = 5 mm. 약어: LLL 왼쪽 측면 엽, ML 중간 엽, 사랑 내 인생 왼쪽된 중간 엽, RML 오른쪽 중간 엽, RSL 우수한 엽, RIL 바로 바로 열 등 엽, SCL 우수한 꼬리가 엽. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 3
그림 3 . 왼쪽된 중간 엽 resect를
(A) resect 간 대량의 사랑 바로 집게 위에 내 인생.
(B) 절 개에 3 개의 날카로운 봉합을 놓습니다. (Image 1)
눈금 막대 = 5 mm. 약어: RML 오른쪽 중간 엽, RSL 바로 우수한 엽, RIL 바로 열 등 엽, SCL 우수한 꼬리가 엽. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 4
그림 4 . 오른쪽 중간 엽 (RML) resect에.
(A) RML의 기지입니다.
(B) RML의 기지 주변 모기 hemostasis 집게를 놓습니다.
(C) 바로 위에 집게 RML의 간 실질 resect
(D) SHVC에 남은 간 조직의 평범 하 고 얇은 레이어를 남겨 주세요.
눈금 막대 = 5 mm. 약어: ML 중간 엽, RSL 바로 우수한 엽. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 5
그림 5 . 하 커를 설치 합니다.
(A)는 갑의 루멘을 통해 PV를 당겨.
(B) 수정 팔목 핸들과 PV 함께 선박 클램프에 의해.
(C) 버트 PV 팔목의 외부 표면을 커버 하 혈관 벽.
(D) 보안 혈관 벽 및 위치에 커 프.
눈금 막대 = 5 m m. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 6
그림 6 . 재구성은 SHVC.
(A & B) 오른쪽과 왼쪽에 각각 두 개의 숙박 봉합을 당겨.
(C) 혈관 루멘에서 실행 봉합에 의해 SHVC의 후부 벽 Anastomose.
(D) 혈관 루멘에서 SHVC의 앞쪽 벽 anastomose.
눈금 막대 = 5 m m. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 7
그림 7 . 재구성은 IHVC.
(받는 사람에서 IHVC의 A)는 원통형 관 루멘.
(B)는 IHVC의 갑 문 합을 확보.
(C)는 reperfusion를 시작 합니다.
(D) 원주 실크 봉합 사 위의 주변 간 실질에서 트림.
눈금 막대 = 5 mm. 약어: PV 문맥, IHVC 열 등 한 infrahepatic 베 나 정 맥, RIL 바로 열 등 엽. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 8
그림 8 . 수술 후 몸 무게 회복입니다.
받는 사람의 몸 무게는 수술 후 4 일 후 복구 하기 시작 했다. 몸 무게의 기울기 6, 수술 후 다음날 받는의 복구를 직접 암시는 일반 루이스 쥐의 가까이 이었다.

Figure 9
그림 9 . 30 일 후 간 이식의 조직학.
조직학, 담 즙 덕트의 약간의 확산 받는 사람에서 관찰 되었다 하 고 받는 사람 간 lobular 아키텍처는 그대로 였다. 아니 괴 사 또는 명백한 정현파 팽창 (400 X) 관찰 되었다. 눈금 막대 음 20 = 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.

Figure 10
그림 10 . 대체의 혈 청 수준
ALT의 혈 청 수준 포드 30에 정상 범위 내에서 했다. (* *, P < 0.05).

Figure 11
그림 11 . 빌리 루빈의 혈 청 수준.
포드 30에 빌리 루빈의 혈 청 수준 일반 루이스 쥐의 비교 되었다 (P > 0.05).

Figure 12
그림 12 . Hepatectomy의 다른 방법의 출혈.
ML의 나머지 간 그 루터 기에서 출혈의 더 낮은 비율 70% 선박 지향 hepatectomy를 사용 하 여 메서드에서 관찰 되었다.

절차 간 제거 SHVC 문 합 태양광 발전 문 합 IHVC 문 합 Anhepatic 시간
시간 (분) 2.62±0.46 15.73±2.05 4.68±0.77 2.05±0.71 23.03±2.30
데이터 Mean±SD 표현 했다

표 1입니다. Anhepatic 단계 개별 수술 절차의 시간

Table 2
표 2입니다. 쥐 PLTx의 두 시각된 프로토콜 간의 차이. 이 테이블의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.


보충 자료

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Discussion

쥐 PLTx 훈련 프로그램을 비용에서 높고 긴 기간20에서 정교한 microsurgical 절차 이다. 쥐 PLTx 프로토콜의 복잡성 연구를이 동물 모델을 사용 하지 못했습니다. 전체 크기 쥐 LTx와 비교 하면, 이식 절차의 도전 뿐만 아니라 작은 동물에서 간 절제술의 도전으로 쥐 PLTx는 microsurgeon를 제공 합니다. 따라서, 세부 사항에 전체 절차를 설명 하는 시각된 microsurgical 프로토콜이 복잡 한 모델을 설정 하기 위한 필수적 이다. 나가 그 외 여러분 보고 이전 시각화 된 문서 쥐5 (표 2)에서 간 동맥 재건 50% 부분 orthotopic LTx 프로토콜 제시. 이 프로토콜 사용 하는 ex vivo hepatectomy, 임상의 절차와 비슷한 LTx 분할.

분할에 비해 기증자 LTx 생활 LTx resects 백 테이블 작업에서 간 분할 하는 것 보다는 살아있는 기증자에서 부분 간 이식. Vivo에서 간 절제는 더 수술 조작, 더 이상 포털 고혈압 및 부분 간 이식에 더욱 따뜻한 허 혈 부상 이어질 수 있습니다. 따라서, 몇몇 쥐 PLTx hepatectomy vivo에서 활용 하는 모델 관련 연구6,8,21,22에 설립 되었습니다. 많은 프로토콜 기본2,3,6,8,,2123또는 작은 꽃 자루에 간단한 결 찰 후 간 엽의 절제술을 포함 한다. 그러나, 다른 간 엽의 다른 모양입니다. 쥐의 ML 넓은 기초 그 반 주변 베 나 카바10,24있다. 쉽게는 ML의 기지에서 단순 결 찰을 배치 열 등 한 베 나 수축. 베 나 정 맥의 수축 방지, Madrahimov 그 외 여러분 개발는 실질 보존 용기 지향 hepatectomy는 실질에 4 날카로운 봉합, 플랫는 ML의 나머지 그 루터 기를 두고 만들어진 후 2 단계에는 ML을 제거 하 그러나 10., 날카로운 봉합 하 여 출혈 간 엽의 PVs는 실질에 숨긴. 남은 그 루터 기 나 PV의 작은 가지를 부상으로 인 한 출혈이 완전히 피할된 11에 수 없습니다. 우리의 프로토콜에 해당 증후군과 간 동맥은 더 해 부 먼저. 다음, 절제 간 엽의 혈액 공급은 절제 하기 전에 ligations에 의해 가려진 개별적으로 했다. 따라서, 남은 그 루터 기에서 출혈의 속도 우리의 프로토콜 (그림 10)를 사용 하 여 인하 했다. ML의 그 루터 기에 4 개의 날카로운 봉합을 배치의 기술 또한 선 간 정 맥만 하지는 PV 및 간 동맥을 우리의 프로토콜에 고용 되었다. 여러 개의 피어 싱 봉합 및 단계별 절제술을 사용 하 여 이러한 ligations, 함께 간 남은 그 루터 기의 평면 모양이 베 나 정 맥의 수축이 피할 유지 되었다.

IHVC 재건에 대 한 약간의 수정이 했습니다 지금도 그 외 여러분 에 의해 설명 된 갑 문 합 25. 받는 사람의 열 등 한 베 나 정 맥 IHVC 선박, 베 나 정 맥 주위 원주 간 실질 왼쪽 보다는 오른쪽 열 등 한 엽의 실질에 transected 했다. 베 나 정 맥 주변 간 실질 도움 받는 IHVC의 혈관 끝의 원통 모양 보다는 평면 모양 유지. 따라서,는 IHVC의 루멘 자연스럽 게 숙박 봉합 및 집게의 도움 없이 열렸다. 이 수정 숙박 봉합 배치 단계 저장 고는 받는 사람의 혈관 루멘으로 IHVC 갑의 삽입을 용이 하 게. 또한,이 수정 IHVC, 그로 인하여 갑 문 합 하는 동안 2 개의 끝 사이 긴장을 감소 시키기의 혈관 길이 연장 한다.

빠른 혈관 문 합의 장점과 함께 2 갑 기술은 PV와 IHVC anastomosing에 대 한 쥐 orthotopic LTx에에서 자주 사용 됩니다. 미 야 타 도 3 갑 기술을 anastomose PV, IHVC 및 SHVC를 포함 하는 프로토콜을 제안 했다. 그러나, 갑 기술 또한 그 단점이 있다. 첫째, 크기가 고정된 된 팔목에는 해당 선박의 크기를 적합 완벽 하 게 수 없습니다. 또한, 팔목 기술 혈, 혈전 증 및 갑26에 이물질 반응의 더 높은 부각에 따른 방해. SHVC, 쥐에 있는 주요 배 높은 혈액 흐름을 보여줍니다. 수축 또는이 혈관에 혈전 증 심각한 수술 후 합병증을 일으킬 수 있습니다. 따라서, 우리의 PLTx 프로토콜에 우리 손 봉합 기술을 사용 하 여 실제 설정에 최대한 가까이 문 합의 조정 수 있는 SHVC를 재구성 하기로. 그러나, 높은-품질 SHVC 문 합 손 봉합 기술에 의해 완료 높은 microsurgical 기술을 요구 한다. 초보자를 위한, Carrel의 삼각 측량 기술은 배 27anastomosing에 대 한는 것이 좋습니다. 이 기법을 사용 하 여 3 개의 숙박 봉합 정기적으로 SHVC의 둘레 주위에 배치 됩니다. SHVC의 3 차원 모양은 축소 하 여이 세 문 합 중 협에서 SHVC를 방지할 수 있는 3 개의 방향에 따라 봉합 머물 유지 됩니다.

간 이식의 재 arterialization 논쟁 적인 주제 이다. 우리의 의견에, 다시 arterialization 받는 사람의 높은 생존 율을 보장 하기 위한 주요 단계는 아니다 하지만 높은-품질 간 이식을 보장 하기 위한 주요 단계를 수 있습니다. 쥐 LTx 2 갑 기술 관련의 전통적인 프로토콜에서 간 동맥 했다 하지 재건,으로 간 동맥의 관류 부족 쥐 LTx12의 결과 영향을 주지 않았다. 또한, 마우스 LTx 이전 연구 장기 이식 생존, 조직학 변경, 허 혈 성 간 손상 및 초기 면역학 활성화 통로13에 다시 arterialization의 효과 조사 하기 위해 실시 됐다. 연구팀은 간 이식의 재 arterialization 생존 율 또는 면역학 활성화의 정도에 큰 영향을 미칠 하지 않았다 결론을 내렸다. 그러나, 최근 연구 황 에 의해 보고는 다시 arterialization은 유출28의 방해와 특히 hepatectomy 대상이 간 실질의 복구에 대 한 중요 한 제안 합니다. 비-arterialization 부분 간 이식의 간 손상을 악화 하 고 초점 괴에서 복구 지연. 따라서, 부분 간 이식의 다시 arterialization 것이 좋습니다. 같이, 이전 14우리의 저자 중 하나에 의해 기술 되었다 간 동맥을 재구성 하는 엔드-투-사이드 문 합 기법 사용 되었다. 이 기법의 장점은 anastomose 두 개의 굵은 동맥는 차 및 GDA, 보다 얇은 PHA는 간 동맥을 재구성의 어려움을 감소 하 고 문 합의 patency의 높은 비율 유지를 선택.

클래식 쥐 LTx 프로토콜 지금도 그 외 여러분 에 의해 제안 된 그것은 어떤 동물도 anhepatic 단계 지속 26 분의25이상 살아로 26 분 미만 그런 anhepatic 위상 제어 나왔다. 우리의 경험은 비록 우리가 이전 단계 시간 26 분 이상 여러 생존 경우는 anhepatic 관찰이 제안 일치 합니다. 우리의 생각에, 안정적인 anhepatic 단계 보다 우선 짧은 anhepatic 단계 수술 연구에서 합니다. 우리 그룹에서 anhepatic 단계 특정 시간 내에 정확 하 게 제어 됩니다. Anhepatic 단계는 중지 되지 않습니다 미리 anhepatic 시간에 도달할 때까지 SHVC와 PV의 문 합을 매우 먼저 완료 될 수 있지만. 그러나, 훈련 프로젝트에 짧은 anhepatic 단계는 권장 합니다.

훈련 단계를 단축 하 고 불필요 한 작업 제거에 많은 향상 되었습니다, 비록 쥐 LTx 및 PLTx는 여전히 복잡 한 microsurgical 작업20. 따라서, 시각화 된 프로토콜 이외에 계획-할-체크-액션 주기에 따라 단계별 훈련 프로토콜 높은 생존 율과 높은 작업 품질을 달성 하기 위해 중요 하다. 이 훈련 프로토콜을 사용 하 여 우리의 예비 경험 40-73 작업 쥐 orthotopic LTx 마스터 하는 데 필요한는 나타났다. 추가 9-13 작업 쥐를 마스터 하는 데 필요한 했다 다시 PLTx arterialized. Czigány에 의해 제안 된 훈련 프로토콜 외. 주장 50-60 LTxs 마스터 orthotopic LTx PLTx29충분 하다.

우리의 계획-할-체크-행동 훈련 프로토콜에 품질 관리에서 각 교육 단계 및 각 개별 조작에 강조 되어야 한다, 특히 복잡 한 모델에. 높은 생존 율 높은-품질 절차 것 아니다. 대표 결과 미세의 품질을 평가 하기 위한 여러 조건을 나열 했다, 조직학, 간 효소, 몸 무게 회복, 황 달 (혈 청 빌리 루빈과 노란색 소변), anhepatic 단계 그리고의 patency 등는 간 동맥입니다. 높은 품질 기준을 모두 충족 하는 경우에 이루어집니다.

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Disclosures

모든 저자는 공개를 전혀 상반 되는 관심사를 있다.

Acknowledgments

이 연구는 국립 자연 과학 재단의 중국 (보조금 번호 81501382)와 절 강 지방 자연 과학 재단의 중국 (부여 번호에 의해 지원 되었다 LQ13H100003 그리고 LQ16H100002)입니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Möller-Wedel, Germany 654359
Light source OSRAM (China) Lighting Co., Ltd 64627
Isoflurane Vaporizer MIDMARK Corporation VIP3000
Isoflurane Baxter Healthcare Corporation 40032609 For Inhalation anesthesia
Normal Saline Zhejiang Tianrui Pharmaceutical Co., Ltd. 716092103
Povidone Iodine Solution HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL H33021567 For disinfection
Hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J31020
Surgical scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd JC2116
Needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J32030
Dressing Forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd J42020
Mosquito hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40340 For liver resection; For retracting the stay sutures. 
Micro-scissors Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA1040
Micro needle-holder Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA2060
Curved micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3061
straight micro typing forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3060
Micro hemostatic forceps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd WA3020
Bulldog clamp Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd XEC350
Vessel clamps Shanghai Medical Instruments(Group) Ltd W40160
Micro Serrefine-curved  Fine Science Tools, Inc 18055-05
Dacryosyrinx Shi Zhuo medical instruments Co., Ltd. 5# curve Use as the curved needle for forcing out the air bubbles in the vascular lumen
Sterilized gauze swabs Fuqing Health & Integral Medical 20230R
5mL syringe Zhejiang Yusheng Medical Instrument Co.,Ltd 811932416
18G needles Shanghai Kindly Enterprise Development Group Co., Ltd 01-014 For fixing the upper abdomen wall
Intima II 22G intraveous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 383207y For making biliary stent; For infusing perfusate
7-0 polypropylene sutures Ningbo Medical Needle Co., Ltd 151026 For SHVC anastomsis
6-0 silk suture Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd 2650182 For ligation
Culture dish (100mm) Corning Incorporated 430165 used in back table for storage ice. The back table dish was placed on it. 
Culture dish (30 mm) Corning Incorporated 3296 As a vessel for organ preservation
Angiocath 12G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382277 For making a IHVC cuff
Angiocath 14G intravenous catheter Becton Dickinson Medical Devices (Shanghai) Co Ltd. 382269 For making a PV cuff
Buprenorphine (hydrochloride) Tianjin Institute of Pharmaceutical Research Pharmaceutical Co., Ltd H12020275 For analgesic
Cefuroxime sodium for injection Esseti FarmaceuticiS.r.l H20160013 As an antibiotics

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의학 문제점 134 간 이식 hepatectomy 다시 arterialization 간장 그릇 부분 간 이식 지향 선박 팔목 문 합
다시는 <em>vivo에서</em> 선박 지향 70% 쥐 부분 간 이식 Arterialized Hepatectomy
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Chen, X., Yu, R., Xu, Z., Zhang , Y., Liu, C., Chen, B., Jin, H. Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy. J. Vis. Exp. (134), e56392, doi:10.3791/56392 (2018).

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