비 인간 영장류 일반 비단 (Callithrix jacchus)에서 내가 의약품의 관리에 대 한 수술

Summary

우리는 둥근 창 막 통해 비 인간 영장류, 일반적인 마모 셋 (Callithrix jacchus)의 내가 약물을 관리 하는 수술 방법을 보고 합니다.

Abstract

청각 연구는 오래 되었습니다 의해 촉진 설치류 모델, 비록 일부 질병에 인간의 증상 지 수 없습니다. 일반적인 마모 셋 (Callithrix jacchus)는 설치류의 비교 보다 중간 귀 ossicular 사슬과 인 간에 게 내가 포함 한 측 뼈의 유사한 해부학 작은, 쉬운 핸들 신세계 원숭이입니다. 여기, 우리는 일반적인 마모 셋의 내가 약물 전달에 대 한 인공 둥근 창 틈새에 재현할 수, 안전 하 고 합리적인 수술 접근을 보고합니다. 우리 후부 tympanotomy를, 전도성 청력 손실이 발생할 수 있습니다 약화 멤브레인의 조작 피하기 위해 인간의 수술 임상 사용 하는 프로시저를 채택 했다. 이 수술은 어떤 중요 한 청력 감소에 지도 하지 않았다. 이 이렇게 비록 측면 반원형 운하 및 안 면 신경의 수직 부분 주의깊게 고려 되어야 한다 일반적인 마모 셋의 큰 물집 구조 때문에 가능 했다. 이 수술 방법 매우 중요 변환 연구에 대 한 개념의 전 임상 증거를 얻기에서 청력 손실 없이 약물의 안전 하 고 정확한 관리를 수행할 수 있습니다.

Introduction

감각 청각 손실 (SNHL) 손상 또는 달팽이 관에서 결핍에서 주로 발생합니다. SNHL의 일반적인 원인은 포함 에이징 (예: 노인 성 난청), 유전적 결함, 감염, 시끄러운 소음과 ototoxic 약물¹에 노출. 세계 보건 기구 (WHO) 추정 360 백만 이상 사람들, 세계의 인구의 5.3%를 나타내는 청각 손실²에서 고통. 그것은 또한 그 1에 2500 신생아에서 900 1 적당 한, 심한, 있고 심오한 선천적인 영구적인 청력 손실, 그리고 65 세 이상의 약 1에 3 성인 청력 손실³의 어느 정도 추정. 그러나, 이러한 환자에 대 한 청력 손실의 효과적인 임상 치료가입니다.

청각 연구 오래 수행한 설치류 또는 기니 피그 모델을 사용 하 여 그리고 유전자 치료와 재생 치료 등 많은 방법을 청력 손실에 대 한 새로운 치료법으로 제안 되었습니다. 그러나, 인간과 설치류 청각 시스템 측면에서 큰 차이 이며 동물 모델 인간의 응용 프로그램을 번역 하는 것이 매우 어렵습니다. 일반적인 마모 셋 (C. jacchus), 신세계 원숭이 아마존에서 발생 하는 여러 가지 이유로 다양 한 기초 연구 연구에 대 한 매력적인 비 인간 영장류 모델 되고있다. 첫째, 해부학과 생리학은 그 설치류 보다는 인간 더 비슷합니다. 둘째, 질병, 신경 네트워크, 행동, 및 게놈를 포함 하 여,이 종족에 대 한 기본적인 생물 학적 정보 잘 특징 이다. 청각 음성 처리, 주기, 피치, 표현 및 일반적인 marmosets의 청각 음성 상호 작용의 외피 코딩도 있다 보고^{4,5,,67 , 8 , 9 , 10}. 최근 조직학 학문에서는, 연구원 20 난청 유전자와 일반적인 마모 셋의 달팽이 관에서 음이온 교환기의 독특한 식 패턴을 식별 하 고 5 발견 진보적인 청각, 및 3의 원인이 되는 유전자 음이온 교환기, 설치류^11,12의 다른 식 패턴을 했다. 이러한 프로필 일반적인 마모 셋 청각 연구를 위한 강력한 도구 임을 믿고 우리를 리드.

실험 동물으로 일반적인 마모 셋의 가장 현저한 특성은 다음과 같습니다.

• 작은 몸 크기와 쉬운 취급 일부 수 종에 비해 오래 된 세계 원숭이: 성인 자그마한 300-400 g 무게 그리고 쥐와 비슷한 높이 약 60cm.
• 높은 생식 영장류: 자그마한 18 개월의 나이에 성적인 성숙을 달성 하 고 일년에 두 번 고 매년 4 ~ 6 자손을 생산할 수 있습니다.
• 유전 수정 사용할 수 있습니다: 유전자 변형¹³ 및 노크 아웃¹⁴ 영장류 연루 신경 장애 (예를 들어, 파 킨 슨 병의 유전 수정에 의해 marmosets를 사용 하 여 만들기에 성공 하는 사사키 전자 외. 질환과 Alzheimer의 질병)입니다.
• 배아 줄기 (ES) 세포와 유도 만능 줄기 (iPS) 세포 설립된^15,16되었습니다. 그것은 오히려 어려운 자그마한 설치류에 비해의 동일한 수를 유지, 줄기 세포 나 iPS 세포의 가용성을 vivo에서 분석 요구의 수를 줄일 것 이다 생체 외에서 분석을 제공 합니다.

난청 및 그것의 잠재적인 치료의 분야에서 더 나은 변환 연구 촉진, CT 및 MRI, 전신 마 취와 청각 뇌 간 응답 (Abr)를 사용 하 여 청력 테스트를 사용 하 여 이미징 연구 프로토콜을 설립 했습니다. 이러한 실험 시스템 설치류 연구와 임상 사이의 격차를 브리징에 필수적인 개념 연구의 전 임상 증거를 더 나은 기회와 함께 우리를 제공할 수 있습니다. 여기, 우리는 둥근 창 막 통해 일반적인 마모 셋의 내가 약물을 관리 하는 수술 방법을 보고 합니다. 봐서 고 막 전도성 청력 손실이 발생할 수 있는 조작 없이 둥근 창 주변 명확한 보기를 얻으려면, 그것은 유용한 접근 유 구멍에서. 임상으로,이 이렇게, “후부 tympanotomy” 잘 설립 하 고 인공 와우 이식 및 cholesteatoma 수술에 대 한 일반적으로 사용 되는 것 이라고 합니다. 우리는 그 후부 tympanotomy 청력 상실을 유발 하지 않고 약물의 정확한 관리를 수행할 수 있습니다 믿습니다.

Protocol

모든 실험 절차는 도쿄 일본 지케이 대학에서 수행 했다. 동물 취급 및 실험 절차 기관 동물 관리 및 사용 지케이 대학 위원회에 의해 승인 (승인 없음: 26-060)는 지케이에 실험 동물의 사용에 대 한 제도적 지침에 따라 수행 대학, 적절 한 실시 동물 실험의 일본의 과학 위원회 (2006 년)에 대 한 지침과 동의 하는. 동물 보호 관리 및 실험 동물 사용 (연구소의 실험실 동물 자원, 1996)에 대 한 가이드의 권고에 따라 실?…

Representative Results

후부 tympanotomy 혈관 상해, 또는 vestibular 부전, 가끔 중이 조작으로 발생 하는 출혈, 수술 부위의 감염 등 어떤 합병증이 없이 수행 되었다. 우리 7-올해-옛 일반적인 마모 셋의 오른쪽 귀에 후부 tympanotomy를 수행 하 고 둥근 창 틈새를 버퍼링 하는 인산 염의 1 µ L를 관리. Abr 전과 2 개월 후 수술 (그림 5A-B)를 측정 했다. 파형 및 Abr의 임계값 ?…

Discussion

인공 혈액 흐름의 볼륨은 매우 작은 인간, 총 심장 산출의 1/1000000 순서 것으로 추정 하 고 액세스 일반 순환^{19에서에서 내가 분리 하는 혈액-달팽이 관 방 벽의 존재에 의해 제한 됩니다. ,20}. 이러한 이유로 들어, 약물 또는 내가 바이러스 성 벡터 관리 하지 하지만 대신 직접 관리 하 여 조직의 관리를 통해 유리한입니다. 마우스, 기니 피그 실험에서 다?…

Materials

common marmoset	CLEA Japan	EDM:C.Marmoset(Jic)
isoflurane	Phizer
medetomidine	ZENOAQ
midazolam	astellas
butorphanol	Meiji Seika
ampicillin	Meiji Seika
lidocaine hydrochloride	AstraZeneca
6-0 absorbent thread	ETHICON	RD-1
atipamezole hydrochloride	ZENOAQ
phosphate buffered saline	Wako	045-29795
Surge Wave	Morita	TR-900-OR
Diamond Bar 006	Morita	14070057
Diamond Bar 010	Morita	14070081
intensive care unit	Menix	P-100