Summary
המרכיב המשלים C1q היא מולקולה pro-דלקתיות מתבטאת במידה רבה בסביבה מיקרוסביבתית שיכולה לקיים אינטראקציה עם מטריצה החילוץ. כאן, אנו מתארים שיטה כדי לבדוק כיצד C1q הקשורים חומצה יאלורונית השפעות התא הדבקה.
Abstract
זה הוכח יותר ויותר כי מיקרוסביבה הגידול משחק תפקיד פעיל neoplasia צמיחה גרורות. באמצעות מסלולים שונים, תאים סרטניים יכול ביעילות לגייס סטרומה, תאים חיסוניים ואנדותל על ידי הפרשת גורמים מגירוי, נוגדנים ו ציטוקינים. בתורו, תאים אלה יכולים לשנות את מאפייני האיתות של הסביבה מיקרוידי שחרור הצמיחה-קידום אותות, מטבוליטים מטריקס רכיבים מטריצות כדי לקיים התפשטות גבוהה ויכולת גרורתית. בהקשר זה, אנו מזהים את המרכיב המשלים C1q, ביטוי מאוד באופן מקומי על ידי מגוון של גידולים ממאירים אנושיים, על האינטראקציה עם חומצה יאלורונית מטריצה המומנת, משפיע מאוד על ההתנהגות של תאים ראשוניים מבודדים מהגידול האנושי דגימות. כאן, אנו מתארים שיטה כדי לבדוק כיצד C1q כרוך חומצה יאלורונית (HA) משפיע על הדבקה תא הגידול, בבסיס העובדה המאפיינים הביולוגיים של רכיבי מפתח של מטריצה החילוץ (במקרה זה HA) יכול להיות מעוצב על ידי אותות אקטיביים לקראת הגידול תקדמות.
Introduction
מיקרוסביבה הגידול (TME) משפיע על התפתחות הסרטן והתקדמות מאז הוא יכול לספק נישה מתירני עבור הישרדות התא, צמיחה ופלישה. הזיהוי של נגני מפתח חדשים ב-TME עשוי להיות שימושי לגילוי כלים מולקולריים חדשים עבור טיפול היעד. TME כולל רשת מורכבת ודינמית של תאים שאינם ממאירים, כגון תאים אנדותל, פיברותקיעות ותאים של המערכת החיסונית, מוטבע בתוך מטריקס המקיפים (ECM) רכיבים כולל collagens, למינציה, fibronectins, . בסדר. הן הגידול והן תאים שאינם סרטניים לסנתז ולהפריש רכיבי ECM יחד עם ציטוקינים, נוגדנים, גורמי גדילה ושיפוץ מטריצה דלקתיות אנזימים הכולל לשנות את המאפיינים הפיזיים, כימיים, איתות של TME. בין המרכיבים האלה, חומצה יאלורונית (HA) התפתחה להפעיל תפקיד מכריע בביולוגיה הגידול. למרות ההרכב הכימי הפשוט שלה, HA, יחד עם המולקולות שלה הכריכה (היאלודונים), יכול לווסת אנגיוגנזה, תגובתיות המערכת החיסונית ו ECM שיפוץ בגודל וריכוז תלוי באופן1.
מערכת המשלים (C) היא גם חלק של TME המקומי, אשר קיבל לאחרונה את תשומת הלב הגוברת. מערכת C מקיפה סט של חלבונים מסיסים מאוגד קרום מעורב בשורה הראשונה של הגנה מפני תאים לא-עצמאיים, אלמנטים מארחים לא רצויים ופתוגנים. מבחינה פונקציונלית, C מקשרת את הזרועות שני-אפקטור של מערכות מולדת ואדפטיבית כדי לקדם או להרוג את התא הישיר או הרכבה של תגובה דלקתית2. C הפעלה יכול לדכא את צמיחת הגידול, על ידי השמדת תאים סרטניים או עיכוב outgrowth שלהם, אבל זה הפך יותר ויותר ברור כי זה יכול להחזיק הגידול קידום פעילות על ידי קיום דלקת כרונית, קידום הקמתה של מדכאים, הגורם לאנגיוגנזה, והפעלת מסלולים של אותות סרטניים הקשורים לסרטן3. בהקשר זה, C1q, את המולקולה הזיהוי הראשון של המסלול הקלאסי של מערכת C התפתחה להפעיל פונקציות חשובות מיקרוסביבה הגידול באופן עצמאי של הפעלת C4. C1q הוכח להיות מבוטא באופן מקומי על ידי מגוון של גידולים ממאירים האדם, שם הוא יכול לטובת הדבקה תא סרטן, הגירה והתפשטות בנוסף אנגיוגנזה גרורות5. מעניין C1q אינטראקציה עם המרכיבים העיקריים של ECM כגון HA.
פיתחנו טכניקה כדי לבודד את תאי הסרטן העיקריים ממסת הגידול. יתר על כן, יצרנו את המטריצה, אשר יכול לעורר מיקרוסביבה הגידול, במיוחד את האינטראקציה בין C1q ומשקל מולקולרי גבוה חומצה יאלורונית. C1q מאוגד HA היה מסוגל לגרום הדבקה של תאים סרטניים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
דגימות רקמות מחולים נאספו לאחר הסכמה מושכלת בעקבות אישור השיקולים האתיים על ידי הוועד המוסדי של בית החולים האוניברסיטאי של טריאסטה, איטליה.
1. בידוד תא גידול ותרבות (יום 1)
- בודד תאים מזותליומה האנושית מ MPM דגימות מוצקות. דק את הרקמה עם חותך להשיג שברים של כ 2-3 מ"מ2 בגודל ו-דגירה של 5 מ ל פתרון העיכול מורכב הנקס ' מאוזנת תמיסת מלח (HBSS) שיושלם עם 0.5 mm Ca2 +/Mg2 +, 0.5% טריפסין ו50 μg/mL DNase I, לילה ב -4 ° c.
- בידוד תא גידול ותרבות (יום 2)
- לאחר הדגירה של הלילה, מניחים את הרקמה המתעכלת במשך 30 דקות בחממה 37 ° c עם טלטול עדין.
- החלף את פתרון העיכול על צנטריפוגה (250 x g) עם 3 מ"ג/mL קולגן סוג 1 מומס 5 מ ל של בינונית 199 עם HBSS ו מודטה נוספת עבור 30 דקות ב 37 ° צ' עם רעד עדין.
- לחסום את התגובה אנזימטית על ידי הוספת 10% חום העובר מופעל סרום פרה (FBS). השהה מחדש את התאים בזהירות עם 5 מ ל pipet כדי להבטיח כי רוב התאים שוחררו מן הרקמה. אז, לסנן את ההשעיה התא באמצעות מסנן נקבובית 100 יקרומטר.
- זרע את התאים בבקבוקון 12.5 ס"מ2 בקבוקון ותרבות אותם ב 37 ° צ' עם התאים האנושיים סרום-בינונית חינם (hesf), עם 10% fbs ו שיושלם עם egf (10 Ng/ml), fbs בסיסי (20 Ng/ml), ו 1% פניצילין-סטרפטומיצין.
הערה: החלף במדיום טרי כל 2-3 ימים.
2. כיסוי HA (יום 1)
- השהה מחדש משקל מולקולרי גבוה HA (1.5 kDa) במים מזוקקים כפולים בריכוז של 1 מ"ג/mL6.
- דלל פתרון מניות HA כדי 50 μg/mL ב קרבונט/ביקרבונט מאגר (0.1 M, pH 9.6) עם pipetting עדין.
- מעיל 96-ובכן צלחת עם 100 μL של לדלל פתרון מניות HA ללילה ב 4 ° c.
הערה: חומצה Hyaluronic היתה מתנה מהסוג של פרופ ' איוואן דונטי, המחלקה למדעי החיים, אוניברסיטת טריאסטה7.
3. C1q (יום 2)
- לאחר הדגירה לילה, ואקום משאוב את הבארות התייחסו ולשטוף את 96-הצלחת לוחית עם 100 μL של ה-PBS של בדולקו (dPBS) לכל טוב.
- אפשר C1q (25 μg/mL או ריכוזים שונים עבור ניסויים התגובה מינון) או BSA (כפקד שלילי) כדי לאגד את הפלסטיק מאוגד-HA על-ידי דגירה חלבונים אלה בריכוז של 25 μg/mL ב 100 μL של dPBS + 0.5% BSA ו 0.7 mM Ca2 +/Mg2 + . לאחר מכן הדגירה הלילה ב 4 ° c.
- ואקום לשאוב את הבארות ולשטוף את הצלחת 96-טוב עם 100 μL/טוב של dPBS.
4. תא תיוג עם מהירות DiI
- השהה מחדש 1 x 105 תאים סרטניים ב 500 Μl של dpbs המכיל 10 μg/mL של צבע פלורסנט מהיר dii. מודטה עבור 15 דקות ב 37 ° c ב 5% v/v CO2 חממה עבור התוויות, ערבוב באופן ידני לאחר 5 דקות במרווחי זמן.
- כדי להסיר עודף מהיר DiI, להוסיף 10 מ ל של dPBS, פיפטה בעדינות למעלה ולמטה, צנטריפוגה ב 250 x g עבור 7 דקות. השהה את הגלולה בתא 1 מ ל של סרום האנדותל אנושי בינונית ללא תשלום המכיל 0.1% bsa (hesf + 0.1% bsa).
5. תא הדבקה על מטריצות HA/C1q (יום 1)
- ואקום לשאוב את הבארות מצופה מטריצות שונות (בארות היו מצופות בשלב 3.2).
- הפץ 100 μL של השעיית התא המסומנת לבארות מצופה, מודקת את הצלחת עבור 35 דקות ב 37 ° צ' ב 5% v/v שיתוף חממה2 .
- הסר את התאים הלא מחסיד על-ידי הסרת supernatant. לשטוף פעם אחת עם dPBS המכיל 0.5% BSA, 0.7 mM Ca2 + ו 0.7 mM Mg2 +.
- Lyse תאים חסיד על-ידי הוספת 200 μL/טוב של 10 מ"מ טריס-HCl, pH 7.4 + 0.1% v/v SDS ולקרוא מיד את הצלחת 96-באר עם קורא הזריחה (544 nm, פליטה 590 nm) באמצעות עקומת כיול שנוצר באמצעות העלאת מספר גדל והולך של מתויג תאים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
HA שלילית גבוה-מולקולרית משקל רב-שלילי, אשר מורכב של חוזר (β, 1-4)-D-חומצה גלוקורונית-(β, 1-3)-N-מרחריל-D-גלוקוסמיטין יחידות דיאכראמיד (איור 1B)7. המופע של הכריכה של HA על הצלחת 96-באר, כמו גם את היעילות של השתק שלה נבדקו לנצל את היתרונות של biotinylated HA (ביו-HA). ריכוזים שונים של ביו-HA, החל 10 μg/mL ל 1 מ"ג/mL, היו מחדש מושעה 100 mM קרבונט/ביקרבונט-מאגר pH 9.6 ו מודבטים לילה ב 4 ° c.
לאחר שוטף נרחב, ביו-HA מאוגד 96-בולס לוחית זוהה באמצעות streptavidin מצועם מעלה פוספספטאז אלקליין, בעוד הנוכחות של streptavidin היה בכמת באמצעות pNPP (1 מ"ג/mL) כמו מצע. הקריאה בוצעה באורך הגל של 405 ננומטר באמצעות קורא אליסה. ביו-HA היה מסוגל לאגד לצלחת 96-באר באופן תגובה מינון (נתונים לא מוצגים); 50 μg/mL נבחרה כרמת רוויה ולכן נעשה בה שימוש באספתנו.
הנתונים הקודמים שלנו הוכיחו כי C1q הוא מסוגל לאגד מגוון רחב של ליגניות היעד מקומי ב-ECM8. מאגד זה חזק במיוחד עם HA9. הבארות של צלחת microtiter היו מצופות עם 50 μg/mL HMW-HA ו-הדגירה עם ריכוז הולך וגובר של C1q. Bound C1q היה דמיינו על דגירה עם נוגדנים אנטי C1q שבטיים. C1q הוא מסוגל לאגד משקל מולקולרי גבוה HA באופן תלוי במינון (איור 1A), להגיע לרמה המקסימלית של הכריכה בריכוז של 50 μg/mL. לאחר שהוקמה כי C1q יכול לאגד HA, חקרנו את המשמעות של האינטראקציה הזאת בשינוי מאפייני האיתות של ECM ואת ההשלכות שלהם בהתפתחות הגידול. למטרה זו, הקמנו פרוטוקול בידוד תאים סרטניים מדגימות ביופטיים שהתקבלו מחולים מושפעים. תאים סרטניים ראשוניים היו מבודדים רקמות ביופסיה, כפי שסוכם באיור 2. היכולת של תאים סרטניים כדי אינטראקציה עם C1q הוערך על ידי ביצוע שיטת הדבקה תא באמצעות צירופים שונים מטריצה, כפי שמוצג באיור 3. תאים סרטניים היו מוכתם עם החללית הפלואורסצנט מהיר DiI ו הופרה על ידי קיבוע HA, HA מאוגד C1q או כדי BSA (משמש שליטה שלילית), עבור 35 דקות. אם בהשוואה HA, הציפוי עם HA-bound-C1q היה מסוגל להגדיל את כמות התאים העיקריים שמירה אך אינו מסוגל לעורר את הדבקה של קווי הגידול של הגידולים שבדקנו, כפי שמוצג בגרף הנציג באיור 3.
איור 1 . אינטראקציה של C1q עם חומצה יאלורונית. (א) איגוד של C1Q על HMW HA באופן תלוי במינון. הנתונים מבוטאים כממוצע של שלושה ניסויים עצמאיים בטרילקאט ± S.E.M. (ב) ייצוג סכמטי של המולקולה C1q והאזור רקומביננטי כדורי שרשרת בודד. C1q מורכב משלוש שרשראות פוליפפטיד (A, B, C): כל אחד המכיל מסוף N-מסופים רצף כמו קולגן וראש gC1q C-טרמינל כדורי. (ג) נוסחה כימית של חומצה יאלורונית, שרשרת מאוד פולימורית של חומצה גלוקורונית ו-N-acetylglucosamine. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2 . מערכת סיכום של בידוד ומורפולוגיה של תאים סרטניים. תאי הגידול היו מבודדים. מדגימות ביופסיה של הסרטן התאים הופרה ב 12.5 ס מ2 בקבוקון ומתורבת ב סרום התא האנושי בינונית ללא תשלום + 10% fbs. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3 . ההשפעה של C1q על תאים סרטניים הדבקה. תאים סרטניים (MES) או קו מזותליומה הראשי (msto-211h) היו מצופים microtiter בארות מראש עם חומצה יאלורונית (ha), HA מאוגד C1q או לסרום בשור (bsa). בחלק העליון של הדמות, ההיבט מורפולוגית של קו אחד של נציג הראשי העיקרי דבקה HA, HA מאוגד C1q או BSA הוצג. התמונות נרכשו באמצעות מיקרוסקופ לעומת פאזה, הגדלה מקורית: 200x. מהיר DiI מתויג תאים מזותליומה הראשי או קו מזותליומה (MSTO-211H) הורשו לדבוק microtiter בארות מצופה מראש עם HA, HA מאוגד C1q או כדי BSA. הנתונים מבוטאים כממוצע של שלושה ניסויים עצמאיים נעשה בטרילקטים ± S.E.M. * p < 0.01 vs HA. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של איור זה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
אנו מתארים שיטה קלה לחקור כיצד המשלים רכיב C1q, אינטראקציה עם חומצה יאלורונית, הוא מסוגל לווסת את ההתנהגות של תאים ראשוניים מבודדים מרקמות הגידול האנושי. שניהם HA ו C1q נמצאים בשפע בסביבה מיקרוברקמות הן בתנאים פיסיולוגיים ופתולוגיים, המשתתפים בתהליכים ביולוגיים מספר תאים. למשל, C1q הוכח להיות נוכח המיקרו הסביבה של השליה שבו הוא מעדיף הפלישה trophoillהפיצוץ של הדציבלים האימהי במהלך placentation8. C1q מופקד גם בעור הפצע-ריפוי שבו הוא מטפח את התהליך אנגיוגנטי הנדרש התחדשות רקמות ותיקון10. לבסוף, C1q זוהה במספר רקמות גידולים שונים4. משקל מולקולרי גבוה HA הוא מכשול טבעי עבור אנגיוגנזה והתפשטות הראיות האחרונות הראו כי C1q, מלבד תפקידה הקלאסי הפעלה משלימים, הוא מסוגל לפעול כמולקולה ECM, העדפה הגירה התא.
החידוש של עבודה זו מורכב במציאת כי הכריכה של C1q HA לשנות בחוזקה את האינטראקציה של תאים סרטניים עם HA. להגדרת שיטה זו, נחשבו מספר מחסומים. קודם כל, אנו מובטחים כי כמות מספקת של HA היה קשור פלסטיק של תרבות ובארות אליסה באמצעות הביוטיליס HA. כתמים כחול Alcian של הבארות אישר את התוצאות (נתונים לא מוצגים). הדגירה בוצעה לילה ב ביקרבונט מאגר, pH 9.6, והליך זה להבטיח את הרוויה המלאה של הבארות על ידי HA (נתונים לא מוצגים).
הצעד השני היה לאגד C1q HA. הכריכה של C1q HA בוצעה ב-pH פיזיולוגי (7.4) ובנוכחות Ca2 +. מסיבה זו, השתמשנו במאגר של dPBS-BSA עם יונים דו-דוטיות. בתחילה ביצעת ניסוי במינון תגובה כדי לזהות ולבחור את הכמות האופטימלית של C1q כי ניתן למצוא מצורף HA. למרות בעקומת המינון שלנו התגובה לא הגענו בדיוק ברמה, השתמשנו בריכוז של 25 μg/mL להיות קרוב יותר לריכוז הפיזיולוגי של C1q חינם, בהתחשב בכך כמות של C1q בדרך כלל הנוכחי בסרום הוא 75-150 μg/mL. זה כבר חישב כי סרום C1q חינם מ C1r ו C1s הוא כ 10%-20% של קומפלקס C111. C1q ידוע בשל יכולתה לאגד polyanions, זה כבר הוגדר בתור מולקולה זיהוי תבנית תשלום ו HA הוא פולימר ליניארי טעונה שלילית של יחידות חוזרות של (β, 1-4)-D-חומצה גלוקורונית-(β, 1-3)-N-מרחקסיל-D-glucosamine12, 13. מסיבה זו, חקרנו את הקשר החזק שאינו קוולנטי. התצפיות שלנו הראו כי תאים סרטניים לחוש את ההבדל בין HA ו HA כרוך C1q. התאים נראים מפוזרים יותר אם בהשוואה לתא הדבוק HA לבד. הבחנו כי השפעה זו אינה מתווכת על ידי C1q מסיסים, המציינת כי שינוי זה בתא הדבקה תלויה באינטראקציה של C1q עם HA, כנראה בשל השינוי הקונפורמציה של המולקולה המשלים כתוצאה של הכריכה.
אנחנו רוצים להדגיש את החשיבות של השימוש בתאים העיקריים כמו מודלים של התנהגות מתורבת של ההתנהגות הגידול עבור ניסויים הדבקה, מאז אנו מבחינים הבדל חזק ביכולת הדבקה בין תאים ראשוניים לעומת כמה קווי תאים, כפי שמוצג ב . איור 3 מודל אלטרנטיבי ומעניין מאוד להעריך את המאפיינים הביולוגיים של HA הוא השימוש במודלים תלת-ממדיים של הגרדום הידרוג'ל. הגרדום הזה עם שילוב של מולקולות ביולוגיות יכול לשמש להערכת אותות אקטיביים ועבור מספר יישומים ברפואה התחדשות14. המודל שאנו מציעים במחקר זה הוא שיטה קלה, מהירה וזולה יותר להערכת תגובות הסלולר לשילוב גירויים, והיא יכולה להיחשב כצעד ראשון להבנת המנגנונים המולקולריים המעורבים בסוג זה של אינטראקציה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים מצהירים כי המחקר נערך בהעדר קשרים מסחריים או פיננסיים שיכולים להתפרש כניגוד אינטרסים פוטנציאלי.
Acknowledgments
אנו מודים איוון Donati על מתן HA, לאונרדו Amadio, גבריאלה Zito (המחלקה של גינקולוגיה של IRCCS "Burlo Garofolo", טריאסטה, איטליה) ו אנדריאה רומנו (יחידת המחקר הקליני של האנטומיה והיסטולוגיה הפתולוגיים, קאטניארה בית החולים, טריאסטה, איטליה ) עבור אוסף דגימת הרקמה. אנו מודים גם ניקולא מורוזיני לעזרה בהכנת וידאו ואלכס קופולה, הקול. עבודה זו היתה נתמכת על ידי מענקים מהמכון לבריאות הילד, IRCCS "Burlo Garofolo", טריאסטה, איטליה (RC20/16) ו Fondazione Cassa די ריספרמיו טריאסטה ל ר. בולה.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 100 µm pore filter | BD Falcon | 352360 | |
| Amphotericin B solution (fungizone) | Sigma-Aldrich | 1397-89-3 | |
| basic FGF | Immunological Sciences | GRF-15595 | |
| Calcium Chloride | Sigma-Aldrich | C-4901 | |
| Collagenase type I | Worthington Biochemical Corporation, DBA | MX1D12644 | |
| D-Glucose | Sigma-Aldrich | 50-99-7 | |
| DNase I | Roche | 10 104 159 001 | |
| EDTA | Sigma-Aldrich | 60-00-4 | |
| EGF | Immunological Sciences | GRF-10544 | |
| FAST DiI | Molecular probes, Invitrogen, Thermo Fisher Scientific | D7756 | |
| Fetal bovine serum | Gibco, Thermo Fisher Scientific | 10270-106 | |
| Fibronectin | Roche | 11051407001 | |
| Flask for cell culture | Corning | 430639 | Sterile, vented |
| Gentamicin solution | Sigma-Aldrich | G1397-10ML | |
| Hank’s Balanced Salt Solution (HBBS) | Sigma-Aldrich | H6648 | Supplemented with EDTA, Glucose, penicillin-streptamicin, gentamicin and fungizone |
| High molecular weight hyaluronic acid | Kind gift by Prof. Ivan Donati | ||
| Human endothelial serum free medium | Gibco, Thermo Fisher Scientific | 11111-044 | Supplemented with EGF (5 ng/mL), basic FGF (10 ng/mL), and 1% penicillin–streptomycin (Sigma-Aldrich) |
| Magnesium Chloride | Carlo Erba | 13446-18-9 | |
| Medium 199 with Hank’s salt | Sigma-Aldrich | M7653 | |
| Penicillin-Streptomycin | Sigma-Aldrich | P0781 | |
| Time-lapse microscopy | Nikon | Imaging System BioStation IM-Q | |
| Titertek Multiskan ELISA Reader | Flow Labs | ||
| Trypsin | Sigma-Aldrich | T4674 |
References
- Zamboni, F., Vieira, S., Reis, R. L., Oliveira, J. M., Collins, M. N. The potential of hyaluronic acid in immunoprotection and immunomodulation: Chemistry, processing and function. Progress in Materials Science. 97, 97-122 (2018).
- Lorusso, G., Ruegg, C. The tumor microenvironment and its contribution to tumor evolution toward metastasis. Histochemistry and Cell Biology. 130 (6), 1091-1103 (2008).
- Ricklin, D., Hajishengallis, G., Yang, K., Lambris, J. D. Complement: a key system for immune surveillance and homeostasis. Nature Immunology. 11 (9), 785-797 (2010).
- Bulla, R., et al. C1q acts in the tumour microenvironment as a cancer-promoting factor independently of complement activation. Nature Communications. 7, 10346 (2016).
- Winslow, S., Leandersson, K., Edsjo, A., Larsson, C. Prognostic stromal gene signatures in breast cancer. Breast Cancer Research. 17, 23 (2015).
- Collins, M. N., Birkinshaw, C. Hyaluronic acid solutions: A processing method for efficient chemical modification. Journal of Applied Polymer Science. 130 (1), 145-152 (2013).
- Itano, N. Simple primary structure, complex turnover regulation and multiple roles of hyaluronan. Journal of Biochemistry. 144 (2), 131-137 (2008).
- Agostinis, C., et al. An alternative role of C1q in cell migration and tissue remodeling: contribution to trophoblast invasion and placental development. Journal of Immunology. 185 (7), 4420-4429 (2010).
- Agostinis, C., et al. Complement Protein C1q Binds to Hyaluronic Acid in the Malignant Pleural Mesothelioma Microenvironment and Promotes Tumor Growth. Frontiers in Immunology. 8, 1559 (2017).
- Bossi, F., et al. C1q as a unique player in angiogenesis with therapeutic implication in wound healing. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (11), 4209-4214 (2014).
- Hosszu, K. K., et al. Cell surface expression and function of the macromolecular c1 complex on the surface of human monocytes. Frontiers in Immunology. 3, 38 (2012).
- Laurent, T. C., Fraser, J. R. Hyaluronan. Journal of the Federation of American Societies for Experimental Biology. 6 (7), 2397-2404 (1992).
- Gaboriaud, C., et al. The crystal structure of the globular head of complement protein C1q provides a basis for its versatile recognition properties. Journal of Biological Chemistry. 278 (47), 46974-46982 (2003).
- Lam, J., Truong, N. F., Segura, T. Design of cell-matrix interactions in hyaluronic acid hydrogel scaffolds. Acta Biomaterialia. 10 (4), 1571-1580 (2014).
