Summary
Le protocole se concentre sur la collecte des échantillons de tortues marines, décrivant toutes les étapes de la récupération des animaux et de la necropsie à la classification et la quantification des déchets marins ingérés. En outre, les résultats représentatifs montrent comment utiliser les données collectées pour élaborer les seuils possibles pour un bon état environnemental.
Abstract
Le protocole suivant est destiné à répondre aux exigences fixées par les directives-cadres de la stratégie pour le milieu marin (MSFD) de l’Union européenne pour les critères D10C3 indiqués dans la décision de la Commission (UE), relatives à la quantité de litière ingéré par les animaux marins. Des méthodologies normalisées pour l’extraction d’Articles de litière ingérés par des tortues marines mortes ainsi que des lignes directrices sur l’analyse des données sont fournies. Le protocole commence par la collecte des tortues marines mortes et la classification des échantillons en fonction de l’état de décomposition. La necropsie de tortue doit être effectuée dans les centres autorisés et le protocole décrit ici explique la meilleure procédure pour l’isolement gastro-intestinal (GI) des voies. Les trois parties de l’IG (œsophage, estomac, intestin) doivent être séparées, ouvertes longitudinales et les contenus filtrés à l’aide d’un tamis maillé de 1 mm. L’article décrit la classification et la quantification de la litière ingéré, classant le contenu des IG dans sept catégories différentes de litière marine et deux catégories de restes naturels. La quantité de litière ingéré doit être déclarée comme masse sèche totale (poids en grammes, avec deux décimales) et abondance (nombre d’éléments). Le protocole propose deux scénarios possibles pour atteindre le bon état environnemental (GES). Premièrement: "il devrait y avoir moins de X% de tortues marines ayant Y g ou plus de plastique dans l’IG dans des échantillons de 50-100 tortues mortes de chaque sous-région", où Y est le poids moyen du plastique ingéré et X% est le pourcentage de tortues marines avec plus de poids (en grammes) de plastique que Y. La deuxième, qui considère que la nourriture reste contre le plastique comme un substitut de la santé individuelle, est: "il devrait y avoir moins de X% des tortues marines ayant plus de poids de plastique (en grammes) que la nourriture reste dans l’IG dans des échantillons de 50-100 tortues mortes de chaque sous-région".
Introduction
La litière marine est une question complexe à aborder puisqu’elle peut pénétrer dans les océans par le biais de multiples sources et formes. Plus de 80% de la litière rencontrée dans les milieux marins est constituée de plastique1. Le rôle de ce matériel dans une perspective économique a augmenté au cours des 50 dernières années. En conséquence, sa production a également augmenté de deux fois depuis 1960, atteignant 335 millions tonnes en 2016. Cette valeur devrait doubler au cours des 20 prochaines années2. En outre, il a été estimé qu’environ 5 à 13 millions tonnes de plastique finissent dans les océans chaque année (ce qui équivaut à 1,5 à 4% de la production mondiale de plastique)2,3. Le mouvement plastique est influencé par ses propriétés physiques (par exemple, la flottabilité) ou les variables environnementales (par exemple, marée et ruisseau), et le plastique peut être accumulé dans tous les compartiments marins4,5. Pour faire face au problème plastique, il est important de garder à l’esprit que, comme beaucoup d’autres questions environnementales, il est transfrontière et donc les solutions de gouvernance sont complexes pour répondre à6. Pour mieux atteindre cet objectif, nous devons prendre en considération les cadres régionaux et internationaux, afin d’améliorer ou de maintenir la sensibilisation et la protection de l’environnement marin dans le monde entier7. L’objectif final de la directive-cadre sur la stratégie marine de l’Union européenne (MSFD) est de parvenir à un bon état environnemental (GES) dans les eaux européennes par 2020, de protéger la biodiversité marine et de promouvoir l’utilisation durable des milieux marins. Ce sera fait à travers 11 descripteurs qualitatifs, dont le descripteur 10 se concentre sur les déchets marins et est défini comme «les propriétés et les quantités de déchets marins ne causent pas de dommages aux milieux côtiers et marins». Dans ce descripteur, la nouvelle décision8 de la Commission a décidé d’ajouter des critères D10C3-"la quantité de litière et de micro-litière ingéré par les animaux marins est à un niveau qui n’affecte pas négativement la santé des espèces concernées"-puisqu’il a été considérés comme des critères pertinents dans l’évaluation des GES. En conséquence, les États membres ont été priés de produire une liste d’espèces, d’élaborer des normes méthodologiques et de définir des valeurs seuils par le biais de la coopération régionale ou sous-régionale.
Après la première publication scientifique en 18389, sur le Pétrel de tempête avec un bâton de bougie ingéré, plus de 500 espèces marines ont été énumérées pour l’ingestion de litière marine10,11,12,13 ,14, et les tortues marines ont été parmi les premiers taxons enregistrés à ingérer les débris plastiques15. Étant donné leur propension à l’ingestion de litière, leur large distribution et la vaste gamme d’habitats utilisés pendant leur vie, les tortues marines, en particulier l’espèce Pie Caretta caretta (Linnaeus 1758), ont été choisies comme un indicateur potentiel pour la Bassin méditerranéen16, comme l’oiseau de mer Fulmarus glacialis (Linnaeus, 1761) pour les eaux du Nord de l’Europe17. Même après cinq décennies de recherche, la discussion sur la normalisation des méthodes a été très limitée18 et une approche cohésive de la communauté scientifique pour quantifier l’ingestion de plastique par la faune fait défaut19. Des protocoles d’échantillonnage normalisés et des méthodes et des mesures de détection analytiques pour évaluer l’ingestion de plastique par le biote marin sont nécessaires; un document récent a montré les avantages et les limitations possibles de l’utilisation des espèces marines comme bioindicateurs sur la pollution plastique20. Suite à la proposition de matiddi et coll. en 201121 d’utiliser le Pie comme bio-indicateur, et le groupe technique sur le rapport sur les déchets marins22, un protocole spécifique pour considérer les déchets marins ingérés par la tortue de mer a été développé et testé par dix partenaires dans sept pays de la mer Méditerranée et de l’océan Atlantique dans le cadre du projet européen INDICIT (GA n ° 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2). Ce protocole fournit des méthodologies normalisées pour l’analyse des déchets marins ingérés par les tortues marines afin de soutenir la nouvelle décision de la Commission (UE)8, critères D10C3, où les valeurs seuils sont demandées. Selon la définition fournie par la COM8, la valeur seuil est un nombre ou une plage qui permet d’évaluer si le critère du niveau de qualité a été atteint, contribuant ainsi à l’évaluation du GES. Le protocole proposé pour évaluer la litière ingéré par les tortues marines sera utile pour recueillir des données sur la composition et l’abondance des déchets et évaluer son impact sur les milieux marins. En outre, la collecte de ce type de données standardisées contribuera à définir des valeurs seuils. Ici, nous considérons deux types de scénarios. Le premier scénario tient compte de la surveillance de la litière Fulmar EcoQO, qui est mise en œuvre pour la zone OSPAR: "il devrait y avoir moins de X% des tortues marines ayant Y g ou plus de plastique dans l’IG dans des échantillons de 50-100 tortues mortes de chaque sous-région, où Y est l’AVERAG e poids du plastique ingéré compte tenu de tous les échantillons et X% est le pourcentage de tortues marines avec plus de poids (en grammes) de plastique que Y. La deuxième vise à envisager une approximation du niveau de santé individuel: "il devrait y avoir moins de X% des tortues marines ayant plus de poids de plastique (en grammes) que les restes de nourriture dans l’IG dans des échantillons de 50-100 tortues mortes de chaque sous-région", où le poids de l’ingestion le plastique est comparé avec les aliments restants dans chaque individu.
Protocol
Il est proposé de collecter une série de paramètres «basiques» et «facultatifs». Les paramètres de base correspondent aux paramètres minimaux fondamentaux pour atteindre les critères D10C3, tandis que les paramètres facultatifs permettent d’acquérir plus de connaissances sur le comportement/la biologie des tortues marines. Une fiche de données d’observation et une liste des matériaux nécessaires pour échantillonner les individus sur le terrain et l’analyse des déchets en laboratoire sont fournies ici afin de faciliter l’enregistrement des données et l’analyse statistique en suivant un tableau normalisé. Les sous-catégories de déchets marins sont choisies en fonction de la forme et du type d’articles. Les restes de nourriture de la tortue de mer et tout ce qui est naturel qui sont des articles non alimentaires (Pierre, bois, Ponce, etc.) sont demandés pour examiner les seuils et l’alimentation de l’animal. Toutes les activités expérimentales de ce protocole ont été menées sur les tortues mortes selon la Loi des pays impliqués et les règles internationales. Toutes les autopsies doivent être effectuées dans les centres agréés.
1. échantillonnage de la carcasse: remplir la feuille d’observation (appendice 1 dans les dossiers supplémentaires 1 et 2)
- Remplissez les coordonnées, y compris le nom, le contact (téléphone, courrier) et l’institution du (des) observateur (s) (collecteur de données).
- Identifier l’espèce comme suit: CC (Caretta caretta, Linnaeus 1758); DC (Dermochelys coriacea, Vandelli 1761); Cm (Chelonia mydas, Linnaeus 1758); EI (Eretmochelys imbricata, Linnaeus 1766); Lo (Lepidochelys olivacea, Eschscholtz 1829); LK (Lepidochelys kempii, garman 1880); ND (Natator depressus, garman 1880).
- Tags: si une balise existe déjà sur le flipper, spécifiez le nombre (N °. Indiquez la présence et le nombre de puces électroniques. Sinon, notez non.
- Indiquez le code d’identification des animaux. Par exemple: "deux lettres pour le pays" _ "deux lettres pour l’emplacement (par exemple, la région ou l’institution)" _ "YY" _ "MM" _ "DD" _ "numéro de puce".
- Notez la date de découverte (yy/mm/jj).
- Indiquez l’emplacement de la découverte qui correspond à la zone de récupération ou aux coordonnées en degrés décimaux.
- Signalez le niveau de condition corporelle du spécimen: 1 (vivant), 2 (frais-mort récemment), 3 (les organes internes partiellement décomposés sont toujours en bon état), 4 (les écailles de peau décomposées avancées sont soulevées ou perdues), 5 (momifié-une partie du squelette ou une partie du corps sont manquantes). Voir la figure 1.
- Circonstances de la découverte: Notez les circonstances parmi les quatre catégories: échouage (animal trouvé sur la plage ou sur le rivage); Prises accessoires/pêches (animal capturé activement par les pêcheurs, par exemple l’ingestion d’un hameçon, piégé dans un filet, ramené par les pêcheurs, etc.); Trouvé en mer (animal découvert sur la surface de la mer); Mort au centre de récupération (l’animal est arrivé vivant, mais il est mort lors de sa guérison).
Figure 1: niveau de l’état du corps du spécimen ou état de décomposition. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.
2. necropsie des tortues marines: mesures biométriques et extraction du contenu du tractus gastro-intestinal
- Organiser le transport de l’animal au centre autorisé pour l’autopsie. Dans le cas d’un animal extrêmement décomposé, évaluez l’intégrité du tube digestif avant de l’éliminer au centre autorisé. Si l’autopsie ne peut être effectuée immédiatement après la récupération, congeler la carcasse à-20 ° c.
- Avant l’opération autopsie, enregistrer les mesures biométriques dans la section spécifique du fichier de récupération. La longueur de la carapace incurvée, encoche à la pointe23, est obligatoire; les autres mesures sont facultatives (p. ex., largeur de la carapace incurvée, poids).
- Procéder à un examen externe du corps animal et rapporter l’information dans la section spécifique du dossier de l’autopsie. Inspectez également la cavité buccale pour une éventuelle présence de matière étrangère.
- Séparer et enlever le plastron de la carapace en faisant une incision le long du bord comme souligné par la ligne jaune (figure 2a).
- Utilisez une lame courte ou coupez avec une inclinaison horizontale en évitant d’endommager les parties intérieures (figure 2 b-c). L’attachement du ligament à la ceinture pectorale et pelvienne doit être coupé lorsque le plastron est détaché de la carapace afin qu’il soit facile d’y accéder et de le manipuler.
- Exposer le tractus gastro-intestinal (GI) enlevant les muscles pectoraux et le cœur de la tortue (figure 2D).
- Facultatif Évaluer qualitativement l’état trophique en évaluant l’atrophie des muscles pectoraux (aucun-modéré-sévère) et l’épaisseur de la graisse dans les cavités articulaires et sur la membrane coelomique (abondante-normale-faible-aucun).
- Extrayez l’IG et placez-la sur la table d’examen. Faites-le avec deux opérateurs pour faciliter les actions. Alors qu’un opérateur maintient la carcasse allongée d’un côté, l’autre sépare les ligaments des différents organes et des membranes de la carapace à l’aide de petites lames ou de ciseaux et enlève le GI de l’animal (Figure 2F).
- Isoler l’œsophage, l’estomac et l’intestin à l’aide de pinces en plastique. Placer ceux-ci sur l’œsophage près de la bouche, à la valve œsophagienne, sur la cheville et à la cloacae, aussi près que possible de l’orifice anal comme indiqué par les flèches jaunes (Figure 2F).
- Enregistrez le sexe de l’animal lorsque cela est possible.
- Séparer définitivement l’œsophage, l’estomac et l’intestin en plaçant une deuxième pince (correspondant au point de coupe) pour éviter le déversement du contenu.
- Ouvrez la section GI en longueur à l’aide d’un ciseau (ou les doigts lorsque cela est possible), puis placez directement le matériau contenu dans un tamis maillé de 1 mm en nettoyant les parois gastro-intestinaux avec de la liquide courante.
- Prendre note de chaque anomalie dans l’IG (p. ex. ulcères, perforations, adhérences, inflammation).
- Inspectez le contenu du tamis pour éventuellement détecter tout goudron, huile ou matériau fragile qui doit être enlevé et traité séparément.
- Rincez le contenu à travers le tamis afin d’enlever la portion liquide, le mucus et la matière digéré non identifiable.
- Répétez la séquence pour chaque portion de GI séparément.
- Congeler tout le matériel recueilli par les tamis ou le stocker dans des pots contenant 70% de solution d’alcool.
NOTE: pour plus de détails sur l’anatomie de la tortue de mer Voir aussi Wyneken (2001)24.
La figure 2 : Séquence de la necropsie des tortues. a) vue ventrale d’une tortue morte. La ligne jaune indique la façon de couper afin de séparer le plastron du reste de la tortue. (b, c) Coupes horizontales pour éviter d’affecter les organes intérieurs. d) vue ventrale de la tortue ouverte. e) extraction du tractus gastro-intestinal. (f) vue de l’ensemble de la GI, les flèches jaunes indiquent où les pinces doivent être fixées afin de séparer les trois différentes sections de GI. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.
3. collecte et analyse des données: classification des déchets marins
- Étiqueter l’exemple de code et la section IG respective.
- Videz les pots sur un tamis maillé de 1 mm, en rassemblant tout le matériel.
- Relavez le matériel collecté avec de l’eau afin d’éliminer l’alcool et de nettoyer la litière.
- Séparer les déchets marins des composants organiques ou d’autres matériaux, identifier la catégorie des déchets marins par analyse visuelle, trier le matériau sur une boîte de Petri et subplonger les articles collectés dans les différentes catégories.
- Remplissez la fiche technique avec les informations collectées.
- Utilisez le stéréomicroscope pour examiner de plus près tous les matériaux non identifiables.
- Sécher la litière marine à température ambiante ou dans un four à 35 ° c pendant 12 h.
- Sécher la fraction organique dans un four à 35 ° c pendant 12 h ou dans un séchoir.
- Indiquer le nombre et le poids sec des différentes catégories de déchets marins.
- Déclarer le poids sec de la fraction organique subdivisée en nourriture reste (s) et les non-aliments naturels restent (s). La masse sèche totale (poids en grammes, exacte à la 2 e décimale) est la principale information utilisée dans le programme de surveillance, suivie du nombre d’articles (abondance).
- Enregistrer d’autres informations telles que la couleur des articles, le volume de litière, les différentes incidences de la litière dans l’œsophage, l’estomac et l’intestin, et l’incidence par catégorie de litière, car cela est utile pour la recherche et l’analyse d’impact. Les données brutes fourniront des informations variées pour chaque section unique de l’IG; le contenu total de la litière marine dans les trois parties sera comptabilisé dans les données finales.
Representative Results
Ce protocole, dérivé de la directive22 de la MSFD et a été co-construit et amélioré par plus de 50 intervenants (biologistes des centres de sauvetage, réseaux échouants, vétérinaires et laboratoires de recherche) de 7 pays à travers la Méditerranée et les côtes européennes de l’Atlantique, elle propose une évaluation homogénéisée, réalisable et facile de l’ingestion de litière par les tortues marines. Le protocole a été testé sur les tortues Pie, et la plupart des manipulations sont également applicables à d’autres espèces de tortues marines. Le premier résultat important de ce protocole est la description des Articles de litière marine sous sept catégories en fonction de leurs caractéristiques visuelles (figure 3). Cette classification a été dérivée du Fulmar EcoQO17,25et modifiée selon l’expérience des auteurs dans l’écologie des tortues marines. La première catégorie, et généralement la moins abondante, est le plastique industriel (IND PLA) composé de granulés et de granules en plastique, généralement cylindriques et ronds, mais aussi ovales ou cubériques, rarement trouvés pour être ingérés par la tortue Pie le 16 , 26. la deuxième catégorie comprend les restes de matériaux de type feuille (use She), tels que les sacs en plastique, les feuilles agricoles ou la feuille de plastique. Ils apparaissent dans des formes irrégulières mais sont toujours minces et flexibles. La troisième catégorie comprend des cordes, des filaments et d’autres matériaux comme les restes d’engins de pêche fantôme habituellement en nylon (utiliser Thr). La quatrième catégorie comprend tous les plastiques moussants (utiliser l’OFA) tels que la mousse de polystyrène ou le caoutchouc souple moussé. La cinquième catégorie comprend des fragments d’articles en plastique dur (utiliser fra). Les fragments sont très abondants dans le contenu de l’IG et ils peuvent être trouvés dans une variété de couleurs différentes. Ils sont dérivés de morceaux plus grands cassés et sont généralement rigides, avec des formes irrégulières et des bords tortueux pointus. Tous les autres articles en plastique, y compris les élastiques, le caoutchouc dense, les morceaux de ballon, et les balles de pistolet à air mou, sont classés comme autre plastique de l’utilisateur (utiliser POTH). Toutes les déchets marins non plastiques tels que les mégots de cigarettes, les journaux, les ordures et les polluants durs sont inclus dans la dernière catégorie de litière autre que le plastique (autre), même si elles ne sont pas facilement trouvées dans les tortues marines. Les deux autres catégories non classées comme litière marine, sont (i) des restes de la diète naturelle de la tortue (foo) et (II) tout objet naturel, non reconnu comme proie pour la tortue de mer comme la pierre, le bois ou la ponce (NFO).
La figure 4 montre un exemple de résultats représentatifs sur la masse sèche des catégories de litière marines, où le plastique de type feuille (Use She) était la classe la plus abondante, et des sacs en plastique ou des parties d’eux, étaient les principaux éléments ingérés. Des résultats similaires sont présentés à la figure 5 en termes de nombre d’éléments (abondance). Le tableau 1 montre un exemple de résultat de l’analyse de masse sèche de la litière dans six zones différentes, ce qui est utile pour définir la valeur de seuil en fonction des exigences de la directive de l’Union européenne. Ces zones devraient être représentées, par exemple, par des pays ou sous-régions du bassin méditerranéen. La moyenne déclarée est calculée à l’aide de toutes les personnes examinées, y compris les échantillons sans litière marine ingéré. Selon notre exemple, la zone 5 représentait la zone la plus claire du bassin méditerranéen et les données de cette zone pourraient être utilisées pour définir la valeur seuil à atteindre. Pour cette zone, le premier scénario pourrait être: "il devrait y avoir moins de 25% de tortues marines ayant 0,5 g ou plus de plastique dans l’IG dans des échantillons de 50-100 tortues marines". Le deuxième scénario pourrait être: "il devrait y avoir moins de 32% de tortues marines ayant plus de grammes de plastique que les restes de nourriture (foo) dans l’IG dans des échantillons de 50-100 tortues marines".
Figure 3 : Exemples de catégories de litière marines établies pour la surveillance de l’ingestion de tortues marines. (a) IND PLA, (b) utiliser elle, (c) utiliser THR, (d) utiliser FOA, (e) utiliser fra, (f) utiliser Poth, (g) Other, (h) foo. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.
Figure 4 : Exemple de résultats de poids de déchets marins ingérés par les tortues marines dans les différentes catégories. Les valeurs de poids moyennes sont rapportées en grammes d’articles par individu (± SE). S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.
Figure 5 : Exemple de résultats pour le nombre de catégories de litière marines ingérés par les tortues marines. Le nombre moyen d’articles par individu (± SE) est rapporté. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.
| région | Taille de l’échantillon (n) | Valeur moyenne ± SE pour le poids sec du plastique ingéré (g) | Pourcentage de tortues avec plus de plastique que la valeur moyenne (%) | Pourcentage de tortues avec plus de plastique que les aliments restent (%) |
| 1 | 100 | 1,32 ± 0,03 | 27 | 64 |
| 2 | 100 | 1,61 ± 0,01 | 28 | 67 |
| 3 | 100 | 1,35 ± 0,02 | 26 | 62 |
| 4 | 95 | 0,73 ± 0,02 | 34 | 40 |
| 5 | 65 | 0,55 ± 0,03 | 25 | 32 |
| 6 | 50 | 0,90 ± 0,04 | 44 | 54 |
Tableau 1: exemple de résultats provenant de différents secteurs (p. ex., pays, sous-régions, etc.), en utilisant une masse sèche de déchets marins. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce tableau en tant que fichier Excel.
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Dossiers supplémentaires 2. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.
Discussion
Ce protocole permet d’évaluer l’abondance totale des déchets marins et d’identifier les principales catégories de litière ingérés par les tortues marines. Il est moins coûteux par rapport à d’autres programmes de surveillance avec les activités de la mer parce que les tortues marines pourraient être recueillies après échouage sur la plage ou être récupérés par les pêcheurs. L’identification des catégories de litière marines est facile et rapide car la limite inférieure de la taille de l’article est de 1 mm. Une limitation du protocole est l’utilisation de la tortue de mer considérant que les 7 espèces de tortues marines sont inscrites à l’annexe I de la Convention sur le commerce international des espèces de faune et de flore sauvages menacées d’extinction27; par conséquent, seul le personnel autorisé peut manipuler des animaux vivants et morts ou des parties d’eux. La gestion et la récupération des tortues doivent être signalées et coordonnées avec les autorités correspondantes. Des précautions sanitaires doivent être prises lors de la manipulation d’animaux sauvages morts ou vivants afin de minimiser les risques de zoonose. Ce protocole a été testé sur les espèces Pie, mais il est applicable à toutes les sept espèces de tortues. L’analyse des données doit être effectuée séparément pour chaque espèce. Les conditions du corps de l’échantillon comme considéré sous cinq niveaux de vivants aux tortues momifiées. Le niveau 1 (Alive) est considéré pour une classification plus détaillée de l’état corporel de l’échantillon au cas où la tortue mourrait au centre de sauvetage après la récupération. Le protocole est applicable aux personnes mortes des niveaux 2 à 4, mais aussi aux personnes qui sont mortes après la guérison (circonstances: mort au centre de récupération). Les niveaux 2 et 3 sont adéquats pour le protocole tandis que le niveau 4 permet de mesurer les données biométriques et d’évaluer la présence/l’absence de litière ingéré pour l’évaluation de la fréquence d’occurrence (FO%), et le pourcentage de tortues avec des déchets marins ingérés sur le l’échantillon entier. Les individus de niveau 5, où généralement le contenu gastro-intestinal a été perdu ne peuvent pas être pris en considération pour la collecte et la quantification de l’ingestion de litière. Prendre des photos de l’animal avant la manipulation, pourrait fournir des informations supplémentaires sur l’échantillon comme la cause probable de la mort ou des blessures principales et l’enchevêtrement. Il est important d’inclure une barre d’échelle sur les images. Même si souvent les tortues marines avaient des crochets de pêche dans leur IG, les données ne doivent pas être incluses dans l’analyse parce que les hameçons de pêche sur lesquels les palangriers sont activement capturés ne sont pas considérés comme des «déchets marins». La présence du crochet doit être enregistrée dans les notes. La collecte des données doit être effectuée séparément dans chaque partie de l’IG (oesophage, estomac, intestin), afin d’évaluer le degré de tolérance à l’ingestion de litière marine en tenant compte du blocage gastro-intestinal ou de la capacité à l’éliminer par défécation, comme démontré dans les études antérieures16,28,29,30,31,32. Une étape critique du protocole peut être trouvée dans la collecte du nombre d’éléments. Plusieurs pièces peuvent être dérivées de la fragmentation du même objet à l’intérieur de l’IG ou par suite d’une ingestion distincte. L’interprétation subjective d’un seul élément ou de plusieurs pièces distinctes pourrait correspondre à un biais potentiel dans le numéro d’enregistrement (figure 6). Pour cette raison, les valeurs seuils ont été élaborées en utilisant uniquement les données de masse des déchets marins ingérés, comme le Fulmar EcoQO17,25.
Figure 6 : La fragmentation des éléments individuels pourrait se produire avant l’ingestion ou pendant le processus d’alimentation, produisant un biais dans le comptage. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.
Le protocole exige la catégorisation de différents articles en plastique selon leurs formes (USE SHE, USE THR). Cette sous-division est utile pour identifier la source des déchets marins avec une liste d’articles en fonction de leur abondance. Il aides les décideurs politiques dans leurs programmes de mesures, fournissant des preuves rapides de leur efficacité dans le ciblage des éléments en évaluant leur force. Par exemple, l’interdiction des sacs en plastique sur les marchés devrait correspondre à une réduction de la catégorie USE SHE ingéré (figure 4, figure 5) dans les échantillons de tortues marines collectés à l’avenir. L’application de ce protocole permettra aux États membres de l’UE de répondre aux exigences de la MSFD, d’évaluer leurs propres lignes de base et de définir les valeurs seuils auxquelles le GES est parvenu. Les seuils doivent être déterminés dans les zones vierges ou à proximité. En raison de l’ubiquité du plastique dans le milieu marin, une zone vierge n’existe pas. Selon l’exemple de données (tableau 1), la zone 5 était la zone la plus claire et pouvait représenter la valeur (Y) à atteindre pour le bassin méditerranéen. Les États membres devraient décider des seuils en fonction de la réduction significative de leur distance par rapport à cette valeur. Selon un examen récent18, les unités d’ingestion de litière marine devraient être normalisées à la taille de la tortue, surtout si l’objectif est de comparer les différentes classes d’âge. Néanmoins, une relation entre la masse de litière ingéré et la taille des tortues a été détectée par différents auteurs avec des valeurs positives, négatives ou nulles16,26,32,33, 34. Notre protocole ne comprend pas la taille des animaux dans le premier scénario, mais il pourrait être possible d’estimer la charge corporelle, d’évaluer la masse de la tortue en utilisant la longueur de la carapace incurvée (CCL)35 et d’utiliser le rapport poids du poids en plastique de la tortue au lieu de seulement grammes de plastique ingéré (Y). Dans tous les cas, nous suggérons de vérifier toutes les différences significatives possibles avant de fusionner les tortues de stade océanique avec les nermites ou les premiers juvéniles avec des adultes, afin de mieux stratifier les échantillons16,26. Le deuxième scénario est plus lié à l’état de santé individuel et pourrait mieux répondre aux critères D10C3: «la quantité de litière et de microlitière ingéré par les animaux marins est à un niveau qui n’affecte pas négativement la santé de l’espèce concernés». En fait, l’impact des articles en plastique ingérés se compose le plus souvent dans des effets sublétaux plutôt que létaux28,36,37,38,39. Nous avons aussi rarement trouvé une occlusion ou une perforation due à l’ingestion de plastique, qui pourrait causer la mort des tortues. Les effets sublétaux ne sont pas faciles à déceler et à distinguer des impacts causés par d’autres polluants40. La dilution ou l’assimilation alimentaire des contaminants se produit lorsque la litière Marine se trouve à l’intérieur de l’IG de la tortue41. Ainsi, l’échantillon avec plus de grammes de plastique que les restes de nourriture pourrait indiquer un animal dans un état de santé très mauvais. Afin de rester en ligne avec le Fulmar EcoQO17,25 utilisé par les pays d’Europe du Nord, les deux scénarios considérez le poids en plastique au lieu du poids de la litière marine.
Enfin, il est important de clarifier les différences entre (i) l’analyse de l’ingestion de plastique dans les tortues marines comme indicateur de l’impact sur la population avec des conséquences pour la conservation de la population et (II) l’analyse de l’ingestion de plastique dans les tortues marines comme bio-indicateur d’impact sur l’environnement côtier et marin20,40. Pour comprendre les implications de cet impact sur la conservation de la population de tortues, plus d’informations sont nécessaires et une meilleure stratification des données est nécessaire42. En confrontant l’opinion de 35 spécialistes de 13 Nations, qui sont experts en biologie et conservation des tortues marines, il est clair que les tortues marines ont été largement étudiées au cours des années, bien qu’il soit encore nécessaire d’enquêter sur les interactions avec les humains d’évaluer l’état de la population et les menaces potentielles43.
Cela signifie qu’un protocole unique ne peut pas être considéré comme exhaustif pour toutes les études thématiques et plus sont nécessaires pour comprendre l’impact du plastique au niveau de la population.
Même le plastique dur pourrait être considéré comme causant un faible niveau de dommages aux tortues marines, en ce qui concerne les prises accessoires ou la destruction de l’habitat, sa réduction a été difficile au cours des dernières années et des méthodes rapides de mesure doivent être élaborées. Il y a une controverse dans l’utilisation des tortues échouées à des fins de surveillance parce que, selon certains auteurs, ils ne sont pas représentatifs de l’ensemble de la population40, tandis que d’autres ont déclaré que les tortues échouées ne représentent pas un biais de la marine taux d’ingestion de litière dans la population de fond44. De plus, dans de nombreux pays, il n’existe pas de réseau ou de système d’échouage bien organisé reliant les centres de sauvetage aux pêcheurs et il y a un manque d’information sur les captures accessoires et la mortalité post-libéralité par la pêche. Par conséquent, les échantillons échoués ne peuvent pas toujours être considérés comme des tortues malades sans comportement alimentaire normal pendant une période de temps avant de mourir et d’atteindre la plage; beaucoup d’entre eux sont des tortues «mort en mer», qui sont habituellement utilisées comme échantillons dans les activités de surveillance26,32,38,45. Nous croyons que les échantillons échoués sont utiles pour fournir des informations sur le niveau d’abondance des déchets marins dans l’environnement et nous suggérons d’exclure seulement les tortues avec le tractus gastro-intestinal complètement vide de cette analyse car elles pourraient être malades d’une longue temps avant la mort. L’utilisation de ce protocole permettrait d’évaluer l’état de l’environnement et la disponibilité des déchets marins pour les organismes marins. Il pourrait également être utile pour améliorer nos connaissances sur le comportement des tortues. L’importance de la méthode en ce qui concerne les directives de la MSFD TS-ML22, est due à l’harmonisation dans sept pays et le nombre d’échantillons sur lesquels il a été testé (n = 700). Le niveau de condition corporelle de l’échantillon a été défini et les catégories d’ingestion de déchets marins ont été réduites en fonction des résultats préliminaires. En outre, c’est la première fois que des résultats représentatifs ont été montrés et reliés aux seuils GES.
Le protocole est un outil efficace pour les chercheurs pour comprendre l’impact du plastique sur le milieu marin, globalement ou à l’échelle locale, et pour comparer les données normalisées avec les pays voisins. Ce résultat n’a pas pu être atteint avant, en raison des écarts dans les données entre les différents pays, empêchant toute comparaison spatiale.
Disclosures
Les auteurs n’ont rien à divulguer.
Acknowledgments
Les auteurs remercient les centres de sauvetage de Français (Jean-Batiste Senegas), les réseaux de échouage (Jacques Sacchi) et les laboratoires vétérinaires (Joanne Belfort) et Jessiaca Martin et Marie Sabatte, le réseau de cétacés et de tortues marines de Valence Communauté, y compris l’unité de zoologie marine de l’Institut Cavanilles (Université de Valence) et le service de la biodiversité de la Generalitat Valenciana, le Fonds régional portugais pour la science et la technologie des Açores (Maria Vale), le sauvetage italien Centres (Stazione Zoologica "Anton Dohrn" Naples et CREs sarde) les laboratoires vétérinaires (IZSLT M. Aleandri Roma; IZSAM G. caporale Teramo; IZSS G. Pegreffi Otistano;. IZS CReTaM Palermo), les membres du Conseil consultatif de l’INDICIT et le PO pour leur suggestion, ainsi que les ministères de l’environnement et les gouvernements régionaux des pays participants pour leur soutien.
Deux examinateurs anonymes pour leurs suggestions et commentaires.
Le présent protocole a été exécuté par le consortium INDICIT dans le cadre du projet européen DG-ENV GA n ° 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| For the recovery of the animal and the collection of samples at the discovery site | |||
| Boots | |||
| Bottle/ziploc bags | |||
| Camera | |||
| Cooler | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Garbage bag | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| Measuring tape | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| Rope (to marke-off the zone) | |||
| Transport bins or containers for the turtle | |||
| For the collection of samples on dead individuals in laboratory and the extraction of the ingested litter from the digestive tract | |||
| In the laboratory room | |||
| Cold chamber or chest freezers (-20°C) with large storage capacity | |||
| Garbage bags | |||
| Proofer (not mandatory) | |||
| For manipulators | |||
| Boots | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| For notes and report | |||
| Camera | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| For biometric measurements | |||
| Measuring tape | |||
| Sliding calliper | |||
| For the necropsy and the collection of samples | |||
| Clamps (at least 6) and/or kistchen string or plastic cable clamps | |||
| Clips with claws | |||
| Containers for samples (Bottle/zipped bags) | |||
| Metal containers | |||
| Scalpel (possible with interchangeable blade) | |||
| Scissors | |||
| For the analysis of ingested litter | |||
| Binocular (optional) | |||
| Measuring cylinders (10 ml, 25 ml, 50 ml) | |||
| Measuring decimetre | |||
| Precision balance (0.01 g) | |||
| Sieve with 1 mm mesh | |||
| Sieve with 5 mm mesh (optional – for the study of the ingested micro-plastics (1-5 mm)) |
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