Summary
Протокол посвящен сбору образцов морских черепах, описывающих все этапы от восстановления животных и некротики до классификации и количественной оценки проглатываемого морского мусора. Кроме того, репрезентативные результаты показывают, как использовать собранные данные для разработки возможных пороговых значений для хорошего экологического статуса.
Abstract
Следующий протокол предназначен для реагирования на требования, установленные Рамочной директивы Европейского союза по морской стратегии (MSFD) для критериев D10C3, сообщенных в решении Комиссии (ЕС), связанных с количеством мусора, потребляемого морскими животными. Предусмотрены стандартизированные методики извлечения предметов мусора, которые попадает из мертвых морских черепах, а также руководящие принципы по анализу данных. Протокол начинается с сбора мертвых морских черепах и классификации образцов в соответствии с состоянием разложения. Черепаха некрпсия должна быть выполнена в уполномоченных центрах и протокол, описанный здесь объясняет лучшую процедуру для желудочно-кишечного тракта (GI) тракт изоляции. Три части GI (пищевода, желудка, кишечника) должны быть разделены, открыл вдоль и содержимое фильтруется с помощью 1 мм сетка сито. Статья описывает классификацию и количественную оценку потребляемого мусора, классифицируя содержание GI на семь различных категорий морского мусора и две категории естественных останков. Количество съеденной подстилки следует сообщать как общая сухая масса (вес в граммах, с двумя десятичными местами) и изобилие (количество элементов). Протокол предлагает два возможных сценария для достижения хорошего экологического статуса (гес). Во-первых: "там должно быть меньше, чем X% морских черепах, имеющих Y g или более пластика в GI в образцах 50-100 мертвых черепах из каждого суб-региона", где Y является средний вес пластика попадает и X% процент морских черепах с большим весом (в граммах) пластиковых чем Y. Второй, который считает, что пища остается в сравнении с пластиковыми в качестве прокси индивидуального здоровья, является: "там должно быть меньше, чем X% морских черепах, имеющих больший вес пластика (в граммах), чем пища остается в GI в образцах 50-100 мертвых черепах из каждого субрегиона".
Introduction
Морской мусор является сложным вопросом для решения, поскольку он может проникать в океаны через многочисленные источники и формы. Более 80% подстилки, которая встречается в морской среде состоит из пластика1. Роль этого материала с экономической точки зрения возрастает за последние 50 лет. Как следствие, его производство также увеличилось в двадцать раз с 1960, достигнув 335 000 000 тонн в 2016. Это значение, как ожидается, удвоится в течение ближайших 20 лет2. Кроме того, было подсчитано, что около 5 до 13 000 000 тонн пластика в конечном итоге в океанах каждый год (которая равна 1,5 до 4% мирового производства пластмасс)2,3. Пластиковое движение зависит от его физических свойств (например, плавучести) или экологических переменных (например, прилива и отлива), а пластик может накапливаться во всех морских отсеках4,5. Чтобы решить проблему пластика, важно иметь в виду, что, как и многие другие экологические проблемы, она является трансграничной, и поэтому решения в области управления сложны для удовлетворения6. Для более эффективного достижения этой цели мы должны учитывать региональные и международные рамки, с тем чтобы повысить или сохранить экологическую осведомленность и защиту морской среды во всем мире7. Конечной целью Рамочной директивы Европейского союза о морской стратегии (MSFD) является достижение хорошего экологического статуса (гес) в европейских водах к 2020 году в целях защиты морского биоразнообразия и содействия устойчивому использованию морской среды. Это будет сделано через 11 качественных дескрипторов, из которых дескриптор 10 фокусируется на морском подстилке и определяется как "свойства и количество морского мусора не наносят ущерба прибрежной и морской среде". В этом дескрипторе, новое решение Комиссии8 решило добавить критерии D10C3-"количество мусора и микро-помет, потребляемого морскими животными находится на уровне, который не оказывает негативного воздействия на здоровье соответствующих видов",-так как это было считаются соответствующими критериями при оценке гес. В результате государствам-членам было предложено подготовить список видов, разработать методологические стандарты и определить пороговые значения с помощью регионального или субрегионального сотрудничества.
После первой научной публикации в 18389, на шторм-Petrel с проглотила свечу палку, более 500 морских видов были перечислены для глотания морской мусор10,11,12,13 ,14, и морские черепахи были одними из первых таксонов, зарегистрированных для глотать пластиковый мусор15. Учитывая их склонность к глотания мусора, их широкое распространение и широкий спектр сред обитания, используемых в течение их жизни, морские черепахи, в частности, вид тупицы-Каретта (линнея 1758), был выбран в качестве потенциального индикатора для Средиземноморский бассейн16, как морская птица фулмарус глясиалис (Линней, 1761) для северных европейских вод17. Даже после пяти десятилетий исследований, обсуждение стандартизации метода была очень ограниченной18 и сплоченного подхода со стороны научного сообщества для количественной оценки пластиковых приема диких животных не хватает19. Необходимы стандартизированные протоколы выборки и аналитические методы и метрики для оценки пластикового приема морской биоты; недавний документ показал потенциальные преимущества и ограничения использования морских видов как био-индикаторы на пластиковом загрязнении20. После того, как Матидди и др. предложение в 201121 использовать Логгерхед как био-индикатор, и техническая группа по морскому помете доклад22, конкретный протокол для рассмотрения морской мусор попадает на морских черепах был разработан и протестирован десять партнеров в семи странах Средиземного моря и Атлантического океана в рамках Европейского проекта по ОБВИНИТТУ (GA n ° 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. С2). Этот протокол предусматривает стандартизированные методологии для анализа морского мусора, потребляемого морскими черепахами в целях поддержки нового решения Комиссии (ЕС)8, критерии D10C3, где запрашиваются пороговые значения. В соответствии с определением, предоставляющим COM8, пороговое значение является числом или диапазоном, который позволяет оценить, был ли достигнут критерий уровня качества, и, таким образом, помочь в оценке гес. Предлагаемый протокол для оценки мусора, потребляемого морскими черепахами, будет полезен при сборе данных о составе и обилии мусора и оценке его воздействия на морскую среду. Кроме того, сбор такого типа стандартизированных данных поможет определить пороговые значения. Здесь мы рассмотрим два типа сценариев. В первом сценарии учитывается мониторинг «Фулмар» «EcoQO», который реализуется для области ОСПАР: «должно быть меньше X% морских черепах, имеющих Y g или больше пластика в GI, в образцах 50-100 мертвых черепах из каждого субрегиона, где Y является авераг e вес пластиковых попадает учитывая все образцы и X% является процент морских черепах с большим весом (в граммах) из пластика, чем Y. Вторая цель заключается в рассмотрении прокси индивидуального уровня здоровья: "там должно быть меньше, чем X% морских черепах, имеющих больший вес пластика (в граммах), чем пища остается в GI в образцах 50-100 мертвых черепах из каждого субрегиона", где вес попадает пластика сравнивается с пищей, оставшейся в каждом отдельном.
Protocol
Предлагается собрать ряд "базовых" и "факультативных" параметров. Основные параметры соответствуют минимальным параметрам, основополагающим для выполнения критериев D10C3, в то время как факультативные параметры позволяют приобретать больше знаний о поведении морских черепах/биологии. Здесь приводится лист наблюдения и перечень материалов, необходимых для отбора проб лиц на местах и анализ подстилки в лабораторных условиях, с тем чтобы облегчить процесс регистрации данных и статистического анализа, следуя стандартной таблице. Подкатегории морского мусора подбираются по форме и типу предметов. Остатки пищи морских черепах и ничего природного, что непродовольственных товаров (камень, дерево, пемза и т.д.) предлагается для рассмотрения пороги и диеты животного. Все экспериментальные действия этого протокола были проведены на мертвых черепах в соответствии с законом вовлеченных стран и международных правил. Все Некро должны выполняться в уполномоченных центрах.
1. выборка из туши: заполните наблюдательный лист (приложение 1 в дополнительных файлах 1 и 2)
- Заполните контактные данные, включая имя, контакт (Телефон, почта) и учреждение наблюдателя (с) (регистратор данных).
- Определите виды следующим образом: CC (Каретта Каретта, Линней 1758); DC (дермочелис коринацея, Ванделли 1761); Cm (челония Мидас, Линней 1758); EI (Эретмочелис имбриката, линнея 1766); Ло (Лепидочелис оливагея, эсчшольц 1829); ЛК (Лепдочелис Кемпии, гарман 1880); ND (Наттор депрессив, гарман 1880).
- Метки: Если тег уже существует на флиппер, укажите номер (N °. Укажите наличие и количество электронных фишек. В противном случае, Примечание нет.
- Укажите идентификационный код животного. Например: "два письма для страны" _ "два письма для расположения (например, регион или учреждение)" _ "гг" _ "мм" _ "DD" _ "чип номер".
- Обратите внимание на дату открытия (гг/mm/dd).
- Укажите местоположение обнаружения, которое является областью восстановления или координатами в десятичных градусах.
- Сообщите о состоянии тела образца: 1 (живой), 2 (свежие-мертвые недавно), 3 (частично разлагается-внутренние органы все еще в хорошем состоянии), 4 (Расширенный разлагается-кожа весы подняты или потеряны), 5 (мумифицированные-часть скелета или часть тела отсутствуют). См. диаграмму 1.
- Обстоятельства обнаружения: Обратите внимание на обстоятельства среди четырех категорий: Страндинг (животное, найденое на пляже или на береговой линии); По-улов/рыболовство (животное, захваченное рыбаками, например, проглатывание крючка, попавшие в сеть, привезенные рыбаками и т.д.); Найден в море (животное, обнаруженный на поверхности моря); Мертвым в центре реабилитации (животное прибыло живым, но умерло во время его выздоровления).
Рисунок 1: уровень состояния тела образца или состояние разложения. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.
2. некрпсия морских черепах: измерение биометрических данных и извлечение содержимого желудочно-кишечного тракта
- Организовать перевозку животного в авторизованный центр по некрпсии. В случае очень разлагается животное, оценить целостность пищеварительного тракта перед удалением в авторизованный центр. Если вскрытие не может быть сделано сразу после выздоровления, заморозить каркас при температуре-20 °C.
- Перед операцией по некропси запишите биометрические измерения в конкретном разделе файла восстановления. Изогнутая длина панциря, вырезка для наконечника23, обязательна; другие меры являются необязательными (например, изогнутая ширина панциря, вес).
- Проведите внешнее обследование тела животного и сообщите информацию в конкретном разделе файла некрпсии. Также осмотрите полость рта для возможного присутствия посторонних материалов.
- Отделяйте и удалите пластрон из панциря, сделав разрез по краю, как подчеркивается желтой линией (Рисунок 2a).
- Используйте короткое лезвие или вырезать горизонтальным наклоном избегая повреждения внутренних частей (Рисунок 2 b-c). Крепление связки к грудной и тазовой поясам необходимо вырезать, когда пластрон отделяется от панциря, так что легко получить доступ и обрабатывать его.
- Подвергайте желудочно-кишечный (GI) тракт, удаляя грудные мышцы и сердце черепахи (рис. 2D).
- Дополнительный Оценить трофический статус качественно, оценив атрофию грудных мышц (ни один-умеренно-тяжелый) и толщину жира в суставных полостей и на целомической мембране (обильная-нормальная-низкая-нет).
- Извлекаем GI и размещаем его на таблице осмотра. Делайте это с двумя операторами, чтобы сделать действия проще. В то время как один оператор держит тушу, лежа на одной стороне, другой отделяет связки от различных органов и мембран из панциря с помощью небольших лезвий или ножниц и удаляет GI от животного (рис. 2f).
- Изолировать пищевода, желудка и кишечника с помощью пластиковых зажимов. Поместите их на пищевод близко к рту, у пищеводного клапана, на вешалке и в клоаке, как можно ближе к анальному отверстия, как указано желтыми стрелками (Рисунок 2F).
- Запишите Пол животного, когда это возможно.
- Отделить пищевода, желудка и кишечника окончательно, поставив второй зажим (соответствующий точке резки), чтобы избежать утечки содержимого.
- Откройте секцию GI вдоль с помощью ножничных (или пальцев, когда это возможно), а затем непосредственно поместите материал, содержащийся в сито сетки 1 мм, очищая стены GI с проточной водой.
- Примите к сведению каждую аномалию в GI (например, язвы, перфорации, спайки, воспаление).
- Осмотрите содержимое в Сите, чтобы в конце концов обнаружить любую смолу, масло или хрупкий материал, который должен быть удален и обработан отдельно.
- Промыть содержимое через сито для удаления жидкой части, слизи и не идентифицируемых переваренной материи.
- Повторите последовательность для каждой части GI отдельно.
- Заморозить все материалы, собранные в сивз или хранить его в банках, содержащих 70% спирта решение.
Примечание: для более подробной информации о анатомии морских черепах см. также Wyneken (2001)24.
Рисунок 2 : Последовательность черепаховых некропси. a) брюшной вид на мертвую черепаху. Желтая линия указывает путь, чтобы вырезать, чтобы отделить пластрон от остальной части черепахи. (b, c) Горизонтальные разрезы для предотвращения воздействия на внутренние органы. d) брюшной вид открытой черепахи. e) Извлечение желудочно-кишечного тракта. (f) вид всего GI, Желтые стрелки указывают, где зажимы должны быть прикреплены для того, чтобы отделить три различных отделов GI. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.
3. сбор и анализ данных: Классификация морских туалетов
- Маркировать образец кода и соответствующий раздел GI.
- Пустые банки на 1 мм сетка сито, собирая все материалы.
- Перемыть собранный материал водой с целью устранения алкоголя и чистки подстилки.
- Отдельный морской помет из органических компонентов или других материалов, идентифицирующих категорию морского помёта путем визуального анализа, сортируя материал по чашке Петри, и подныряя собранные предметы в различные категории.
- Заполните информационный листок с собранной информацией.
- Используйте стереомикроскопов, чтобы поближе рассмотреть любые не идентифицируемые материалы.
- Высушите морской помет при комнатной температуре или в духовке при температуре 35 °C в течение 12 ч.
- Высушите органическую фракцию в духовке при температуре 35 °C в течение 12 ч или в сушилке.
- Сообщите о количестве и сухом весе различных категорий морских туалетов.
- Доклад сухого веса органической фракции подразделяются на продовольствие остаются (ы) и природных непродовольственных остаются (ы). Общая сухая масса (вес в граммах, с точностью до 2-го десятичного места) является основной информацией, используемой в программе мониторинга, за которой следует количество предметов (изобилие).
- Запишите другую информацию, такую как цвет элементов, объем мусора, различные случаи подстилки в пищеводе, желудке и кишечнике, и заболеваемость в категорию помёта, как это полезно для исследований и анализа воздействия. Необработанные данные предоставят разнообразную информацию для каждой отдельной секции GI; Общее содержание морского мусора в трех частях будет учтено в окончательных данных.
Representative Results
Этот протокол, производный от руководства MSFD22 и был совместно построен и улучшен более чем 50 заинтересованными сторонами (биологи из спасательных центров, мель сетей, ветеринарных и исследовательских лабораторий) из 7 стран по всему Средиземноморью и европейских атлантических берегов, он предлагает однородная, осуществимую и легкую оценку мусора, проглатывания морскими черепахами. Протокол был протестирован на черепах Логгерхед, и большинство манипуляций также применимы к другим видам морских черепах. Первым важным результатом этого протокола является описание предметов морского мусора в семи категориях в соответствии с их визуальными особенностями (рис.3). Эта классификация была получена Фулмар ecoqo17,25, и изменен в соответствии с опытом авторов в экологии морских черепах. Первая категория, и, как правило, наименее обильные один, промышленный пластик (IND НОАК), состоящий из пластиковых гранул и гранул, как правило, цилиндрической и круглой формы, но и овальные или кубические формы, редко встречаются, чтобы попасть в организм черепахи Логгерхед в 16 лет , 26. Вторая категория включает в себя остатки листового (используйте ее) материалов, таких как пластиковые мешки, сельскохозяйственные листы или пластиковая фольга. Они появляются в неправильной формы, но всегда тонкие и гибкие. Третья категория включает в себя веревки, нити и другие нитроподобные материалы, такие как остатки призрак рыболовные снасти обычно сделаны из нейлона (Использование Чет). Четвертая категория включает в себя все вспенивания пластмасс (ИспользованиеФОА), такие как пена полистирола или вспенивания мягкой резины. Пятая категория включает в себя фрагменты твердых пластиковых предметов (Используйте FRA). Фрагменты очень обильные в содержании GI, и они могут быть найдены в различных цветах. Они выводятся из сломанной большие куски и, как правило, жесткие, с неправильной формы и острые кривые края. Любые другие пластиковые элементы, включая резинки, плотная резина, воздушный шар штук, и мягкие пневмовые пули, классифицируются как другие пользовательские пластиковые (Использование POTH). Все непластиковые морской мусор, такие как сигаретные окурки, газеты, мусор и твердый загрязнитель, включены в последнюю категорию мусора, кроме пластика (другой), даже если они не легко найти в морских черепах. Две другие категории, не классифицированные как морской помет, являются (i) останки черепахи природного рациона (Фу) и (II) любой природный элемент, не признается в качестве добычи для морских черепах, таких как камень, дерево или пемза (NFO).
На рисунке 4 показан пример репрезентативных результатов по сухой массе категорий морского помёта, где листовой пластик (use it) был самым распространенным классом, а пластиковые пакеты или их части были основными принимаемой номенклатур. Аналогичные результаты показаны на рисунке 5 с точки зрения количества предметов (изобилие). Таблица 1 показывает пример результата анализа сухих масс мусора в шести различных областях, что полезно для установления порогового значения в соответствии с требованиями Msfd Европейского союза. Эти области должны быть представлены, например, странами или субрегионом Средиземноморского бассейна. Сообщаемой средней рассчитывается с использованием всех лиц, рассмотренных, в том числе образцов без попадает морской мусор. Согласно нашему примеру, зона 5 представляла собой наиболее четко представленную зону Средиземноморского бассейна, и данные из этого района можно было бы использовать для того, чтобы установить пороговое значение, которое должно быть достигнуто. В этой области первый сценарий может быть: "там должно быть меньше, чем 25% морских черепах, имеющих 0,5 g или более пластика в GI в образцах 50-100 морских черепах". Второй сценарий может быть: "там должно быть меньше, чем 32% морских черепах, имеющих больше пластиковых граммов, чем остатки пищи (Фу) в GI в образцах 50-100 морских черепах".
Рисунок 3 : Примеры морских категорий подстилки, установленные для мониторинга приема морских черепах. (a) IND пла, (b) использование она, (c) использовать Чет, (d) использование ФОА, (е) использование FRA, (f) использование Poth, (g) другие, (h) фу. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.
Рисунок 4 : Пример результатов весов морского помёта, потребляемого морскими черепахами по различным категориям. Средние значения веса зарегистрированы в граммах предметов на каждого человека (± SE). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.
Рисунок 5 : Пример результатов по количеству категорий морской мусор попадает на морских черепах. Среднее количество пунктов на каждого человека (± SE) сообщается. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.
| Области | Размер выборки (n) | Среднее значение ± SE для сухого веса потребляемого пластика (g) | Процент черепах с большим пластиком, чем среднее значение (%) | Процент черепах с большим пластиком чем еда остают (%) |
| 1 | 100 | 1.32 ± 0.03 | 27 | 64 |
| 2 | 100 | 1.61 ± 0.01 | 28 | 67 |
| 3 | 100 | 1.35 ± 0.02 | 26 | 62 |
| 4 | 95 | 0.73 ± 0.02 | 34 | 40 |
| 5 | 65 | 0.55 ± 0.03 | 25 | 32 |
| 6 | 50 | 0.90 ± 0.04 | 44 | 54 |
Таблица 1: пример результатов из различных областей (например, стран, субрегионов и т.д.) с использованием сухой массы морского мусора. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту таблицу как файл Excel.
Дополнительные файлы 1. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительные файлы 2. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Discussion
Этот протокол позволяет оценить общее изобилие морского мусора и идентифицировать категории основных помет морских черепах. Это дешевле по сравнению с другими программами мониторинга с морской деятельности, потому что морские черепахи могут быть собраны после мель на пляже или быть восстановлены рыбаками. Выявление категорий морского мусора является простым и быстрым, так как нижний предел размера предмета составляет 1 мм. Ограничение протокола заключается в использовании морских черепах, учитывая, что все 7 видов морских черепах перечислены в приложении I Конвенции о международной торговле видами дикой фауны и флоры, находящимися под угрозой исчезновения27; Поэтому только уполномоченный персонал может обрабатывать живых и мертвых животных или их части. Управление и восстановление черепах следует сообщать и координировать с соответствующими органами. Санитарные меры должны быть приняты при обработке мертвых или живых диких животных, чтобы минимизировать риски зоонозов. Этот протокол был протестирован на вид Логгерхед, но он применим ко всем семи видов черепах. Анализ данных следует проводить отдельно для каждого вида. Условия тела образца, как считается в возрасте до пяти уровней от живого до мумифицированных черепах. Уровень 1 (живой) рассматривается для более детальной классификации состояния тела образца в случае, если черепаха умерла в спасательно-центре после выздоровления. Протокол применим к мертвым лицам от уровней 2 до 4, но и к лицам, которые умерли после выздоровления (обстоятельства: Мертвые в центре восстановления). Уровни 2 и 3 адекватны для протокола, в то время как уровень 4 позволяет измерить данные биометрических данных и оценить наличие/отсутствие съеденной подстилки для оценки частоты возникновения (FO%), и процент черепах с попадает в морской мусор на весь образец. Лица уровня 5, где в целом желудочно-кишечного тракта было потеряно не могут быть рассмотрены для сбора и количественной оценки мусора приема. Принимая фотографии животного до обработки, может предоставить дополнительную информацию о образце как вероятной причиной смерти или основных травм и запутывания. Важно включить панель масштаба на фотографиях. Даже если часто морские черепахи имели рыболовные крючки в их GI, данные не должны включаться в анализ, потому что рыболовные крючки, на которых активно ловят жертв ярусного лова, не считаются «морским мусором». Присутствие крюка должно быть записано в примечаниях. Сбор данных следует выполнять отдельно в каждой части GI (пищевода, желудка, кишечника), для того, чтобы оценить степень толерантности к морской подстилке приема рассмотрении GI блокировки или возможность устранить его через дефекацию, как продемонстрировано в предыдущих исследованиях16,28,29,30,31,32. Критический шаг протокола можно найти в сборе количества номенклатур. Несколько штук может быть получена от фрагментации одного и того же объекта внутри GI или как следствие отдельного приема. Субъективная интерпретация одного элемента или нескольких отдельных частей может соответствовать потенциальной предвзятости в количестве записи (рис. 6). По этой причине, пороговые значения были разработаны с использованием только попадает данных морской помет масса, как Фулмар ecoqo17,25.
Рисунок 6 : Фрагментация отдельных элементов может произойти до проглатывания или во время процесса кормления, производя предвзятость в подсчете. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть увеличенном варианте этой фигуры.
Протокол требует классификации различных пластиковых элементов в соответствии с их формами (USE она, USE чет). Это подразделение полезно для определения источника морского мусора со списком предметов в зависимости от их обилия. Он помощников директивных органов в своих программах мер, обеспечивая быстрое подтверждение их эффективности в ориентации пунктов путем оценки их прочности. Например, запрет пластиковых пакетов на рынках должен соответствовать сокращению использования ее категории (рис. 4, рис. 5) в образцах морских черепах, собранных в будущем. Применение этого протокола позволит государствам-членам ЕС отвечать на требования MSФД, оценивая их собственные базовые показатели и определяя пороговые значения, по которым ГЭС будет достигнута. Пороги должны определяться в первозданном или рядом с девственными районами. Из-за вездесущности пластика в морской среде, нетронутой области не существует. Согласно данным примера (Таблица 1), зона 5, была самой ясной зоной и могла представлять значение (Y), которое должно быть достигнуто для Средиземноморского бассейна. Государства-члены должны определять пороги в соответствии со значительным сокращением их собственной удаленности от этого значения. Согласно недавнему обзору18, морской мусор проглатывания единицы должны быть нормализованы к размеру черепахи, особенно если цель состоит в том, чтобы сравнить различные возрастные классы. Тем не менее, связь между массой потребляемого мусора и размером черепах была обнаружена разными авторами с положительными, отрицательными или нулевыми значениями16,26,32,33, 34. Наш протокол не включает в себя животных размер в первом сценарии, но можно было бы оценить бремя тела, оценки массы черепахи использованием изогнутых панцирь Длина (ККЛ)35 и использовать соотношение веса пластикового веса черепахи, а не только граммов потребляемого пластика (Y). В любом случае мы предлагаем проверить любые возможные существенные отличия перед слиянием океанической стадии черепашек с неритическими или ранними несовершеннолетними с взрослыми, чтобы лучше стратифицировать образцы16,26. Второй сценарий больше связан с индивидуальным состоянием здоровья и может лучше ответить на критерии D10C3: "количество мусора и микропомет, потребляемого морскими животными, находится на уровне, который не оказывает негативного воздействия на здоровье вида обеспокоен ". В самом деле, влияние попадает пластиковых элементов состоит наиболее часто в суб-смертоносных эффектов, а не летальные те28,36,37,38,39. Мы также редко находили окклюзию или перфорации из-за пластикового приема внутрь, что может привести к гибели черепах. Субсмертельное воздействие нелегко обнаружить и отличить от воздействий, связанных с другими загрязнителями40. Диетическое разбавление или ассимиляции загрязняющих веществ происходит, когда морской мусор находится внутри GI черепахи41. Таким образом, образец с более граммов пластика, чем остатки пищи может свидетельствовать о животных в очень плохом состоянии здоровья. Для того, чтобы оставаться в соответствии с Фулмар ecoqo17,25 используется в странах Северной Европы, оба сценария рассмотрим пластиковый вес вместо морского мусора вес.
Наконец, важно уточнить различия между (i) анализ употребления пластика в морских черепах в качестве индикатора воздействия на население с последствиями для сохранения популяции и (II) анализ употребления пластика в морских черепах, как Био-индикатор воздействия на прибрежную и морскую среду20,40. Чтобы понять последствия этого воздействия на сохранение популяции черепах, требуется больше информации, и лучше расслоение данных необходимо42. По мнению 35 специалистов из 13 стран, которые являются экспертами в области биологии и сохранения морских черепах, ясно, что морские черепахи были широко изучены на протяжении многих лет, хотя все еще необходимо исследовать взаимодействие с человеком деятельности и, следовательно, оценить состояние населения и потенциальные угрозы43.
Это означает, что единый протокол не может считаться исчерпывающим для всех тематических и больше исследований, необходимых для понимания воздействия пластика на уровне населения.
Даже жесткие пластиковые можно считать причиной низкого уровня ущерба для морских черепах, в связи с улова или разрушение среды обитания, его сокращение было сложным в последние несколько лет и быстрые методы измерения должны быть разработаны. Существует спор в использовании мель черепах для целей мониторинга, потому что, по мнению некоторых авторов они не являются репрезентативными для всего населения40, в то время как другие заявили, что мель черепахи не представляют смещения морских помета приема ставки в фоновом населении44. Кроме того, во многих странах не существует хорошо организованной сети или системы, связывающей спасательные центры с рыбаками, и отсутствует информация о выдвижной и после высвобождения смертности в результате рыбного промысла. Таким образом, мель образцы не всегда могут рассматриваться как больные черепахи без нормального кормления поведение в течение периода времени перед смертью и достижения пляжа; Многие из них являются "смерть на море" черепахи выбросило на берег и, как правило, используются в качестве образцов в мониторинге деятельности26,32,38,45. Мы считаем, что мель образцов полезны в предоставлении информации о уровне обилия морской мусор в окружающей среде, и мы предлагаем исключить только черепах с полностью пустой желудочно-кишечного тракта из этого анализа, поскольку они могут быть больны от долгого время до смерти. Использование этого протокола позволит оценить экологическое состояние и доступность морского мусора для морских организмов. Это также может быть полезным в улучшении наших знаний о поведении черепахи. Значение метода в отношении руководящих принципов MSFD TS-ML22, обусловлено гармонизацией в семи странах и числом образцов, на которых оно было протестировано (n = 700). Уровень состояния тела образца был определен и морской мусор попадает категорий были сокращены в соответствии с предварительными результатами. Кроме того, это первый раз, когда репрезентативные результаты были показаны и подключены к порогам гес.
Протокол является эффективным инструментом для исследователей, чтобы понять влияние пластика на морскую среду, глобально или в локальном масштабе, и для сравнения стандартизированных данных с соседними странами. Этот результат не мог быть достигнут прежде, из-за расхождений в данных между различными странами, предотвращая любое пространственное сравнение.
Disclosures
Авторам нечего раскрывать.
Acknowledgments
Авторы благодарны французских спасательных центров (Жан-Батист Senegas), мель сетей (Жак Сакки) и ветеринарных лабораторий (Джоан Belfort) и Жессиака Martin и Мари Сабате, китообразных и морских черепах мель сети Валенсии Сообщества, в том числе морской зоологии института Кавальей (Университет Валенсии) и биоразнообразия службы Женераталета Валенциана, Португальский региональный фонд науки и технологии Азорских островов (Мария Вейл), итальянский спасательной Центры (Стазион зоолог "Антон Донн" Неаполь и сардинский CREs) ветеринарные лаборатории (IZSLT м. Алеандри рома; IZSAM G. Caporale Терамо; IZSS G. Pegreffi Отистано;. IZS CReTaM Палермо), члены Консультативного Совета и PO для их предложения, и экологические министерства и региональные правительства стран-участниц за их поддержку.
Два анонимных рецензента за их предложения и комментарии.
Данный протокол был выполнен консорциумом в рамках Европейского проекта ГД-ENV GA No. 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| For the recovery of the animal and the collection of samples at the discovery site | |||
| Boots | |||
| Bottle/ziploc bags | |||
| Camera | |||
| Cooler | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Garbage bag | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| Measuring tape | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| Rope (to marke-off the zone) | |||
| Transport bins or containers for the turtle | |||
| For the collection of samples on dead individuals in laboratory and the extraction of the ingested litter from the digestive tract | |||
| In the laboratory room | |||
| Cold chamber or chest freezers (-20°C) with large storage capacity | |||
| Garbage bags | |||
| Proofer (not mandatory) | |||
| For manipulators | |||
| Boots | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| For notes and report | |||
| Camera | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| For biometric measurements | |||
| Measuring tape | |||
| Sliding calliper | |||
| For the necropsy and the collection of samples | |||
| Clamps (at least 6) and/or kistchen string or plastic cable clamps | |||
| Clips with claws | |||
| Containers for samples (Bottle/zipped bags) | |||
| Metal containers | |||
| Scalpel (possible with interchangeable blade) | |||
| Scissors | |||
| For the analysis of ingested litter | |||
| Binocular (optional) | |||
| Measuring cylinders (10 ml, 25 ml, 50 ml) | |||
| Measuring decimetre | |||
| Precision balance (0.01 g) | |||
| Sieve with 1 mm mesh | |||
| Sieve with 5 mm mesh (optional – for the study of the ingested micro-plastics (1-5 mm)) |
References
- UNEP. Marine plastic debris and microplastics – Global lessons and research to inspire action and guide policy change. , United Nations Environment Programme. Nairobi. (2016).
- COM2018028. Communication From The Commission To The European Parliament, The Council, The European Economic And Social Committee And The Committee Of The Regions A European Strategy For Plastics In A Circular Economy. , (2018).
- Jambeck, J. R., et al. Plastic waste inputs from land into the ocean. Science. 347, 768-771 (2015).
- Mansui, J., Molcard, A., Ourmieres, Y. Modelling the transport and accumulation of floating marine debris in the Mediterranean basin. Marine Pollution Bulletin. 91, 249-257 (2015).
- Law, K. L.
- Vince, J., Hardesty, B. D. Plastic pollution challenges in marine and coastal environments: from local to global governance. Restoration Ecology. 25 (1), 123-128 (2017).
- Bürgi, E. Sustainable Development in International Law Making and Trade: International Food Governance and Trade in Agriculture. , Edward Elgar Publishing. (2015).
- COMMISSION DECISION (EU). 2017/848 of 17 May 2017 laying down criteria and methodological standards on good environmental status of marine waters and specifications and standardized methods for monitoring and assessment, and repealing Decision 2010/477/EU. , (2017).
- Provencher, J. F., et al. Quantifying ingested debris in marine megafauna: a review and recommendations for standardization. Analytical Methods. 9, 1454 (2017).
- CBD - Secretariat of the Convention on Biological Diversity and the Scientific and Technical Advisory Panel—GEF. Impacts of Marine Debris on Biodiversity: Current Status and Potential Solutions, Montreal. , Technical Series No. 67 (2012).
- Kühn, S., Rebolledo, E. L. B., Van Franeker, J. A. Deleterious effects of litter on marine life. Marine Anthropogenic Litter. Bergmann, M., Gutow, L., Klages, M. , Springer. 75-116 (2015).
- Derraik, J. G. The pollution of the marine environment by plastic debris: a review. Marine Pollution Bulletin. 44, 842-852 (2002).
- Gall, S. C., Thompson, R. C. The impact of debris on marine life. Marine Pollution Bulletin. , (2015).
- Laist, D. W. Overview of the biological effects of lost and discarded plastic debris in the marine environment. Marine Pollution Bulletin. 18, 319-326 (1987).
- Fritts, T. H. Plastic bags in the intestinal tracts of leatherback marine turtles. Herpetological Review. 13, 72-73 (1982).
- Matiddi, M., et al. Loggerhead Sea Turtles (Caretta caretta): a Target Species for Monitoring Litter Ingested by Marine Organisms in the Mediterranean Sea. Environmental Pollution. 230, 199-209 (2017).
- van Franeker, J., et al. Monitoring plastic ingestion by the northern fulmar Fulmarus glacialis in the North Sea. Environmental Pollution. 159, 2609-2615 (2011).
- Lynch, J. M. Quantities of marine debris ingested by sea turtles: global meta-analysis highlights need for standardized data reporting methods and reveals relative risk. Environmental Science & Tecnology. 52 (21), 12026-12038 (2018).
- Provencher, J., et al. Quantifying ingested debris in marine megafauna: a review and recommendations for standardization. Analytical Methods. 9, 1454 (2017).
- Bonanno, G., Orlando-Bonaca, M. Perspectives on using marine species as bioindicators of plastic pollution. Marine Pollution Bulletin. 137, 209-221 (2018).
- Matiddi, M., van Franeker, J. A., Sammarini, V., Travaglini, A., Alcaro, L. Monitoring litter by sea turtles: an experimental protocol in the Mediterranean. Proceedings of the 4th Mediterranean Conference on Sea Turtles, , (2011).
- MSFD-TSGML. Guidance on monitoring of marine litter in European Seas. A guidance document within the common implementation strategy for the marine strategy framework directive. EUR-26113 EN. JRC Scientific and Policy Reports JRC83985. , http://mcc.jrc.ec.europa.eu/documents/201702074014.pdf (2013).
- Bolten, A. B. Research and Management Techniques for the Conservation of Sea Turtles. IUCN/SSC Marine Turtle Specialist Group Publication. Eckert, K. L., Bjorndal, K. A., Abreu-Grobois, F. A., Donnelly, M. , 4 (1999).
- Wyneken, J. The Anatomy of Sea Turtles. U.S. Department of Commerce NOAA Technical Memorandum NMFS SEFSC 470. , https://www.sefsc.noaa.gov/turtles/TM_470_Wyneken.pdf (2001).
- van Franeker, J. A., Meijboom, A. Litter NSV, Marine Litter Monitoring by Northern Fulmar; a Pilot Study. Alterra-rapport. 401, (2002).
- Domènech, F., Aznar, F. J., Raga, J. A., Tomás, J. Two decades of monitoring in marine debris ingestion in loggerhead sea turtle, Caretta caretta, from the western Mediterranean. Environmental Pollution. 244, 367-378 (2018).
- CITES-Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora. , Annex I (2019).
- Tomas, J., Guitart, R., Mateo, R., Raga, J. A. Marine debris ingestion in loggerhead sea turtles, Caretta caretta, from the Western Mediterranean. Marine Pollution Bulletin. 44, 211-216 (2002).
- Nelms, S. E., et al. Plastic and marine turtles: a review and call for research. ICES Journal of Marine Science. 73 (2), 165-181 (2015).
- Fukuoka, T., et al. The feeding habit of sea turtles influences their reaction to artificial marine debris. Scientific Reports. 6 (28015), (2016).
- Hoarau, L., Ainley, L., Jean, C., Ciccione, S. Ingestion and defecation of marine debris by loggerhead sea turtles, Caretta caretta, from by-catches in the South-West Indian Ocean. Marine Pollution Bulletin. 84, 90-96 (2014).
- Nicolau, L., Marçalo, A., Ferreira, M., Sa, S., Vingada, J., Eira, C. Ingestion of marine litter by loggerhead sea turtles, Caretta caretta, in Portuguese continental waters. Marine Pollution Bulletin. 103, 179-185 (2016).
- Pham, C. K., et al. Plastic ingestion in oceanic-stage loggerhead sea turtles (Caretta caretta) off the North Atlantic subtropical gyre. Marine Pollution Bulletin. 121, 22-229 (2017).
- Clukeya, K. E., et al. Investigation of plastic debris ingestion by four species of sea turtles collected as bycatch in pelagic Pacific longline fisheries. Marine Pollution Bullettin. 120 (1-2), 117-125 (2017).
- Wabnitz, C., Pauly, D. Length-weight relationship and additional growth parameters for sea turtles. Von Bertalanffy growth parameters of non-fish marine organisms. 16, Fisheries Centre, University of British Columbia. 92-101 (2008).
- Lutz, P. L., Musick, J. A. Foraging ecology and nutrition in sea turtles. The Biology of Sea Turtles. , CRC Press. Boca Raton. CRC Marine Science Series 199-231 (1997).
- McCauley, S. J., Bjorndal, K. A. Conservation implications of dietary dilution from debris ingestion: sublethal effects in post-hatchling loggerhead sea turtles. Conservation Biology. 13, 925-929 (1999).
- Campani, T., et al. Presence of plastic debris in loggerhead turtle stranded along the Tuscany coasts of the Pelagos sanctuary for mediterranean marine mammals (Italy). Marine Pollution Bulletin. 74, 1330-1334 (2013).
- Deudero, S., Alomar, C. Revising interactions of plastics with marine biota: evidence from the Mediterranean in CIESM 2014. Marine litter in the Mediterranean and Black Seas. Briand, F. , CIESM Workshop Monograph n 46 CIESM (2014).
- Fossi, C., et al. Bioindicators for monitoring marine litter ingestion and its impacts on Mediterranean biodiversity. Environmental Pollution. 237, 1023-1040 (2018).
- Mccauley, S., Bjorndal, K. A. Conservation Implications of Dietary Dilution from Debris Ingestion: Sublethal Effects in Post-Hatchling Loggerhead Sea Turtles. Conservation Biology. 13, 925-929 (1999).
- Casale, P., Freggi, D., Paduano, V., Oliverio, M. Biased and best approaches for assessing debris ingestion in sea turtles, with a case study in the Mediterranean. Marine Pollution Bulletin. 110 (1), 238-249 (2016).
- Hamann, M., et al. Global research priorities for sea turtles: informing management and conservation in the 21st century. Endangered Species Research. 11, 245-269 (2010).
- Schuyler, Q. A., et al. Risk analysis reveals global hotspots for marine debris ingestion by sea turtles. Global Change Biology. 22, 567-576 (2016).
- Camedda, A., et al. Interaction between loggerhead sea turtles (Caretta caretta) and marine litter in Sardinia (Western Mediterranean Sea). Marine Environmental Research. 100, 25-32 (2014).
