Summary
Här beskriver vi ett protokoll för induktion av murina traumatisk hjärnskada via en öppen huvud kontrollerad kortikal effekt.
Abstract
Centra för sjukdomskontroll och skadeförebyggande uppskattar att nästan 2 000 000 personer upprätthåller en traumatisk hjärnskada (TBI) varje år i USA. I själva verket är TBI en bidragande faktor till över en tredjedel av all skaderelaterad dödlighet. Icke desto mindre, de cellulära och molekylära mekanismerna bakom patofysiologin i TBI är dåligt förstådda. Därför är prekliniska modeller av TBI som kan replikera skademekanismer som är relevanta för TBI hos mänskliga patienter ett kritiskt forskningsbehov. Den kontrollerade kortikala effekten (CCI) modell av TBI använder en mekanisk anordning för att direkt påverka den exponerade cortex. Även om ingen modell kan full recapitulate de olika skademönster och heterogena karaktär TBI hos mänskliga patienter, CCI är kapabel att inducera ett brett spektrum av kliniskt tillämpliga TBI. Dessutom är CCI enkelt standardiserat så att utredarna kan jämföra resultaten mellan olika experiment och i undersökande grupper. Följande protokoll är en detaljerad beskrivning av att tillämpa en allvarlig CCI med en kommersiellt tillgänglig påverkar enheten i en murin modell av TBI.
Introduction
Centra för sjukdomskontroll och skadeförebyggande uppskattning att cirka 2 000 000 amerikaner upprätthålla en traumatisk hjärnskada (TBI) varje år1,2. I själva verket bidrar TBI till över 30% av alla skador relaterade dödsfall i USA med sjukvårdskostnader närmar sig $80 000 000 000 årligen och nästan $4 000 000 per person och år överlevande en svår TBI3,4,5. Effekterna av TBI lyfts fram av de betydande långsiktiga neurokognitiva och neuropsykiatriska komplikationer som drabbar dess överlevande med den försåtliga uppkomsten av beteendemässiga, kognitiva och motoriska funktionsnedsättningar kallas kronisk traumatisk encefalopati (CTE) 6 , 7 , 8 , 9 , 10. även subkliniska Concussive händelser-de effekter som inte leder till kliniska symtom-kan leda till långsiktig neurologisk dysfunktion11,12.
Djurmodeller för studiet av TBI har varit anställda sedan slutet av 1800-talet13. På 1980-talet utvecklades en pneumatisk impaktor i syfte att modellera TBI. Denna metod kallas nu för kontrollerad kortikal påverkan (CCI)14. Kontroll och reproducerbarhet av CCI ledde forskare att anpassa modellen för användning på gnagare15. Vårt laboratorium använder denna modell för att inducera TBI via en kommersiellt tillgänglig impaktor och elektronisk manöveranordning16,17. Denna modell kan producera ett brett spektrum av kliniskt tillämpliga TBI stater beroende på de biomekaniska parametrar som används. Histologisk utvärdering av TBI hjärnor efter en allvarlig skada inducerad i vårt laboratorium visar signifikanta ipsilaterala kortikala och Hippocampus förlust samt kontralaterala ödem och distorsion. Dessutom ger CCI en konsekvent försämring i motorisk och kognitiv funktion mätt med beteendeanalyser18. Begränsningar för CCI omfattar behovet av kraniotomi och kostnaden för att förvärva impaktor och manöveranordning.
Flera ytterligare modeller av TBI finns och är väl etablerade i litteraturen inklusive den laterala Fluid slagverk modell, vikt droppe modell, och blast skada modell19,20,21. Medan var och en av dessa modeller har sina egna distinkta fördelar deras huvudsakliga nackdelar är blandade skador, hög dödlighet och brist på standardisering, respektive22. Dessutom, ingen av dessa modeller erbjuder noggrannhet, precision, och reproducerbarhet av CCI. Genom att justera de biomekaniska parametrarna som matas in i manöverdonet tillåter CCI-modellen prövaren exakt kontroll över skadans storlek, skadans djup och kinetisk energi som appliceras på hjärnan. Detta ger utredarna möjlighet att tillämpa hela spektrat av TBI till specifika områden i hjärnan. Det tillåter också den största reproducerbarheten från experiment till experiment.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla förfaranden godkändes av Northwestern University institutionella djuromsorg och användning kommittén. C57BL/6 möss köptes från Jackson Laboratory och gruppen inrymt i en barriär anläggning vid centrum för Komparativ medicin vid Northwestern University (Chicago, IL). Alla djur var inhysta i 12/12 h ljus/mörker cykel med fri tillgång till mat och vatten.
1. inducera anestesi
- Anesthetize musen med ketamin (125 mg/kg) och xylazin (10 mg/kg) injiceras intraperitonealt.
2. Vital Signs övervakning varje 15 min
- Övervaka temperatur, andningsfrekvens och hudfärg. Musen ska kännas varm vid beröring. Huden ska verka rosa och väl parfymera. Andningsfrekvens bör variera 50 – 70 andetag per minut.
3. pre-kirurgiska ingrepp
- Väg alla möss på dagen före skada induktion.
- Sterilisera en uppsättning kirurgiska instrument genom autoklav för varje försöks ämne. Sterilisera den påverkade enheten före användning.
- Förbered en återvinnings bur genom att placera en ren bur över en elektrisk värmedyna inställd på "låg" inställning och placerad på ett sådant sätt att mössen kan flytta bort från värmen gång ambulatorisk.
- Ställ in Operations teatern inom ett steriliserat laminärt flöde huva.
- Placera stereotaxic-driftramen.
- Anslut den påverkande enheten till stereotaxic-ramen.
- Ställ in aktiverings enheten med önskade biomekaniska parametrar för hastighet och uppehållstid.
Anmärkning: i detta protokoll en allvarlig hjärnskada beskrivs använder en 3 mm diameter slag spets via en 5 mm diameter kraniektomi med hastigheten inställd på 2,5 m/s och en Dwell tid på 0,1 s. Ett brett spektrum av biomekaniska parametrar kan användas för att inducera hela spektrumet av TBI.
- Don ny personlig skyddsutrustning och sterila handskar.
- Raka pälsen från den operativa platsen med hjälp av elektriska Clippers.
- Applicera skyddande oftalmologiska salva på ögonen på musen för att förhindra korneal skada och torkning.
- Placera musen i Operations teatern.
- Förbered huden med en jod baserad kirurgisk Scrub alternerat med alkohol tre gånger.
4. tillämpning av kontrollerad kortikal påverkan
- Incise hårbotten 1 cm i mittlinjen med en skalpell utsätta skallen.
- Placera musen i en stereotaxic drift ram genom att säkra de bilaterala temporala benen mellan miniatyr öron stänger och låsa framtänderna i en framtand klämma skapa en stabil tre-punkt-håll på mus huvudet.
- Dra bort hårbotten från den operativa platsen med en hemostat eller låstång för att säkerställa att hårbotten inte kommer i kontakt med borrkronan under kraniektomi.
- Identifiera sagittal och koronala suturer på den exponerade skallen.
Anmärkning: detta protokoll centrerar kraniektomi 2 mm vänster om sagittal suturen och 2 mm rostralt till koronala suturen. - Utföra en kraniektomi med hjälp av en borr med en trefin borr bit.
- För att utföra kraniektomi, först aktivera borren med maximal hastighet och sedan tillämpa trefin borr biten vinkelrätt mot skallen på platsen för kraniektomi.
- Applicera skonsamt, jämnt tryck på borren när kontakten är gjord med skallen. En liten "Give" kommer att kännas när borren tränger igenom skallen. Penetrera inte den underliggande Dura.
Anmärkning: detta protokoll använder en 5 mm trefin borr bit för att utföra kraniektomi.
- Använd tång och en liten gauge Hypodermic nål för att ta bort ben luckan, helt utsätta den underliggande dura mater.
- Rotera kollisionsspetsen i det operativa fältet och Sänk den tills den får kontakt med den exponerade dura mater. När kontakten är gjord kommer instrumentets kontakt sensor att avge en ljudsignal för att varna kirurgen om att kontakt har utförts. Detta kommer att markera nollpunkten från vilken deformationdjupet är inställt.
Anmärkning: detta protokoll använder en 3 mm påverkar spetsen för att generera en allvarlig skada. Tips så små som 1 mm kan användas för att applicera mer lokaliserad skada. - Dra tillbaka den påverkande spetsen och Ställ in önskat slag djup genom att sänka kollisionspositionen på stereotaxic-ramen.
Anmärkning: i detta protokoll beskriver vi en allvarlig skada genom att ställa in deformationsdjupet till 2 mm. - Applicera skadan genom att aktivera impaktor på manöverdonet.
- Rotera effekt enheten ur fältet och ta bort djuret från stereotaxic-ramen.
5. stängning av kirurgisk plats
- Kontrollera blödning från skallen och skadade kortikala ytan med direkt tryck från en steril bomull tippad applikator.
- Torka skallen med en steril applikator med bomulls spets.
- Stäng hårbotten över kraniektomi med hjälp av en kommersiellt tillgänglig kirurgisk lim eller monofilament sutur.
Anmärkning: i detta protokoll en veterinär kirurgisk lim används för att stänga hårbotten. Ben luckan ersätts inte och kasseras.
6. postoperativ vård och övervakning
- Administrera postoperativ analgesi (t. ex. ihållande frisättning av buprenorfin 0,1 – 0,5 mg/kg administrerat subkutant som ger 72 h ihållande analgesi).
- Placera djuret i den laterala Decubitus återhämtning position i en ren förvärmda bur.
- Observera djuren tills vaken och mobil, sedan tillbaka varje mus till sin hem bur.
- Garantera fri tillgång till mat och vatten. Normal mat och vattenintag återupptas vanligtvis inom en till två timmar efter skada.
- Mät kroppsvikten var tredje dag under experimentet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Kollisionsblocket monteras direkt på stereotaxic ram så mycket som 10 μm upplösning för kontroll av punkten av påverkan, djup och penetration. De elektromagnetiska krafter som används kan ge effekt hastigheter på mellan 1.5 – 6 m/s. Detta möjliggör oöverträffad precision och reproducerbarhet över hela sortimentet av kliniskt relevanta TBI. Utredare kan köra pilotexperiment som ändrar skade parametrarna, till exempel kollisionsstorlek, slaghastighet och kollisionsdjup för att bestämma de parametrar som bäst ger önskad grad av skada. Detta protokoll beskriver en allvarlig TBI till vänster parietotemporal regionen genom att utföra en 5 mm kraniektomi 2 mm vänster om sagittal suturen och 2 mm rostralt till koronala suturen (figur 1a). En kontrollerad kortikal effekt levereras med en 3 mm påverkans spets vid 2,5 m/s och ett deformationdjup på 2 mm (figur 2). Skadan består av subdural, intraparenchymal, och subaraknoidal blödning (figur 3). Neurokognitiva tester en månad efter denna skada visar ihållande underskott i arbetsminnet, kompetens förvärv, och motorisk samordning18. Histologisk utvärdering av TBI hjärnor efter en allvarlig skada inducerad i vårt laboratorium visar signifikanta ipsilaterala kortikala och Hippocampus förlust samt kontralaterala ödem och distorsion. MRI-undersökning av svårt skadade hjärnor med denna modell visar progressiv vävnads förlust och ersättning av cerebrospinalvätska (figur 4)23. Slutligen visar flödescytometrisk analys av skadade och bluff hjärnor en markant skillnad i infiltrerande inflammatoriska celler under hela skade förloppet17,18.
Bild 1: utrustnings inställning för murin-modellen av kontrollerad kortikal påverkan.
(A) Aktiveringsanordningen är inställd på en hastighet på 2,5 m/s och en uppehållstid på 0,1 s. (B) kollisionsblocket med en 3 mm påverkande spets är säkrad mot stereotaxic-ramen. (C) en mus med 5 mm kraniektomi är säkrad i stereo taxic manöver ram med öron stänger och en framtand bar. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2: svår TBI via öppen huvud-kontrollerad kortikal påverkan.
(A) jordkabeln klipps till musens Hind-region och den påverkbara spetsen sänks ned på dura mater tills kontakt sensorn larmar. Detta är nollpunkten. B den påverkande spetsen dras tillbaka, en 2 mm djup av skada slås in i stereotaxic-ramen, och effekten tillämpas. (C) efter det att CCI har tillämpats, vrids den påverkande spetsen ut ur fältet och musen återvinns från stereotaxic-ramen. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3: grov undersökning av mus hjärnor efter svår TBI inducerad av kontrollerad kortikal påverkan.
(A) hjärna från en 12 veckor gammal naiv mus. (B) hjärna från en 12-veckors gammal mus 24 h efter att ha haft en svår TBI via kontrollerad kortikal påverkan. (C) hjärna från en 12-veckors-gammal mus 7 dagar efter att ha haft en svår TBI via kontrollerad kortikal påverkan. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 4: histologisk och MRT-utvärdering av svår TBI efter kontrollerad kortikal påverkan.
Hematoxylin och eosin (H & E) färgade koronala sektioner och representativa koronala T1-viktade MR-bilder. A) simulerad skada som endast består av kraniotomi. (B) CCI resulterar i en svår TBI med stor volymförlust av cortex (CTX) vid platsen för påverkan samt förlust och snedvridning av den underliggande Hippocampus bildandet (HF) och thalamus (th). (C) MRT vid 1-dag efter TBI visar vävnads trauma och ödem över vänster parietotemporal cortex. (D – E) Representativa bilder från efter skade dag 7 och 14 visar ökade områden av hyperdämpning som representerar progressiv ersättning av devitalized vävnad med cerebrospinalvätska. Figuren har anpassats från Makinde, et al.23. Vänligen klicka här för att se en större version av denna siffra.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Det finns flera steg som är kritiska för att tillämpa en tillförlitlig och konsekvent skada. Först måste musen nå ett djupt plan av kirurgisk anestesi garanterar ingen rörelse under utförandet av kraniektomi. Medan många bedövningsmedel kan användas för att inducera generell anestesi på gnagare, anestetika som inducerar andningsdepression såsom inhalationsanestetika kan resultera i andningsstillestånd i kombination med en svår TBI. Detta protokoll använder ketamin (125 mg/kg) och xylazin (10 mg/kg) injiceras intraperitonealt. Denna kombination av läkemedel producerar ett kirurgiskt plan av anestesi inom 5 min av administrering för en varaktighet av cirka 30 – 45 min. Dessutom, denna kombination av läkemedel leder inte till andningsdepression. Nästa kritiska steg är utförandet av kraniektomi. Kraniectomy bör alltid utföras med en fräsch trefin borr bit i hög hastighet för att säkerställa att minimal värme och vibrationer överförs till mus hjärnan. Värme och vibrationer kan resultera i skador på intilliggande hjärnvävnad utanför området för CCI leder till inkonsekvent storlek och mekanism för skada mellan försökspersoner och experiment. Därefter måste mus huvudet fästas ordentligt inom stereotaxic-ramen före tillämpningen av CCI för att säkerställa djupet och platsen för skadan är förenliga mellan skade ansökningar. Miniatyr öron stänger och en framtand klämma är viktiga komponenter i ordentligt säkra mus huvudet inom stereotaxic ramen. Slutligen är det viktigt att använda en enhet med en kontakt sensor. Sensorn kommer att indikera den exakta kontaktpunkten mellan den påverkbara spetsen och den exponerade dura mater. Detta gör det möjligt för utredaren att notera exakt nollpunkten från vilken djupet av skadan kan ställas in med stereotaxic ram garanterar en exakt och reproducerbar grad av skada.
För att säkerställa att den inciserade hårbotten är utanför området vid tidpunkten för CCI, är det ofta nödvändigt att använda en upprullningsdon som klämma eller pinkoppar att dra till hårbotten bort från platsen för kraniektomi. Om hårbotten faller tillbaka in i CCI fältet som skadan tillämpas, storleken och svårighetsgraden av skadan kommer att vara opålitliga. Dessutom, även om det är absolut nödvändigt att säkerställa att mus huvudet är orörligt inom stereotaxic ram, prövaren måste se till att fixeringen inte försämrar andningen. Hypoxi vid tidpunkten för skadan sekundärt till begränsad andning kommer att införa en sekundär form av skada att göra graden, svårighetsgrad, och mekanismen för skada opålitliga mellan försökspersoner.
Med tanke på förmågan att exakt specificera flera biomekaniska parametrar, är CCI en av de mest konsekventa och pålitliga metoder för att inducera traumatisk hjärnskada i gnagare modeller15. Det finns dock ett antal begränsningar som utredaren bör vara medveten om när man väljer vilken modell av TBI som är lämpligast att besvara deras vetenskapliga fråga22. CCI lider av samma begränsningar som alla prekliniska modeller av hjärnskada i att det kräver anestesi och ett kirurgiskt ingrepp (kraniektomi) före induktion av skada. Både anestesi och kraniektomi kan generera ett inflammatoriskt svar och måste betraktas som potentiella störfaktorer under dataanalys24. Dessutom, även om CCI ger en tillförlitlig och konsekvent skada, de flesta TBI i mänskliga patienter är diffusa och sker genom flera samtidiga mekanismer25. Detta kan göra direkt översättning till Human TBI patienter problematiskt som CCI ger en brännskada med varierande grader av diffusa effekter beroende på svårighetsgraden av skada tillämpas. Slutligen kräver CCI inköp och underhåll av flera mekaniska komponenter som kan visa sig vara kostnads oöverkomliga för vissa forskargrupper. Utan korrekt underhåll av de mekaniska komponenterna, kan det finnas betydande drift i de faktiska biomekaniska parametrar som tillämpas från experiment till experiment24.
Det är viktigt att identifiera lämpliga kontroller för varje experiment. Sham-skadade möss är en viktig kontroll i varje experiment. Den bluff skada gruppen bör få anestesi, hårbotten snitt, placering i stereotaxic ram, och postoperativa analgesi. Emellertid, den bluff-skada gruppen bör inte genomgå kraniektomi. Vibrationer och värmeöverföring från kraniektomi, även när de utförs snabbt med expert precision, resulterar i en mild traumatisk hjärnskada. Även om denna skada är svårt att se grovt, är det lätt identifieras mikroskopiskt. Slutligen bör utredarna överväga att använda en grupp av åldersmatchade naiva möss för att utesluta eventuella normala förändringar som sker i hjärnan som möss ålder.
Trots begränsningar förblir CCI den mest konsekventa och reproducerbara modellen för att inducera TBI hos gnagare. CCI är lätt att standardisera mellan ämnen och experiment jämfört med alternativa metoder för att inducera TBI och gör det möjligt för utredare att tillämpa hela spektrat av TBI till exakt definierade anatomiska regioner i hjärnan. Protokollet ovan beskriver tillämpningen av en svår TBI till vänster parietotemporal cortex i en mus. Denna modell använder en 5 mm kraniektomi utförs med en trefin borr bit i hög hastighet. En 3 mm påverknings spets används med ett skade djup på 2 mm vid en hastighet av 2,5 m/s och en uppehållstid på 0,1 s. När de tillämpas på rätt sätt, och när försöks ämnet är korrekt återvinnas, en långsiktig överlevnad närmar sig 100% kan erhållas möjliggör kort, mellanliggande, och långtidsstudier av murina TBI som skall utföras.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inga ekonomiska intressekonflikter.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av National Institutes of Health Grant GM117341 och American College of kirurger C. James Carrico Research Fellowship till S.J.S.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| AnaSed Injection Xylazine Sterile Solution | LLOYD, Inc. | 5939911020 | |
| Buprenorphine SR Lab 0.5mg/mL | Zoopharm-Wildlife Pharmaceuticals USA | BSRLAB0.5-182012 | |
| High Speed Rotary Micromotor KiT0 | Foredom Electric Company | K.1070 | |
| Imapact one for Stereotaxix CCI | Leica Biosystems Nussloch GmbH | 39463920 | |
| Ketathesia Ketamine HCl Injection USP | Henry Schein, Inc | 56344 | |
| Mouse Specific Stereotaxic Base | Leica Biosystems Nussloch GmbH | 39462980 | |
| Trephines for Micro Drill | Fine Science Tools, Inc | 18004-50 |
References
- Faul, M. Traumatic Brain Injury in the United States: Emergency Department Visits, Hospitalizations and Deaths 2002-2006. , Centers for Disease Control and Prevention, National Center for Injury Prevention and Control. Atlanta (GA). (2010).
- Roozenbeek, B., Maas, A. I., Menon, D. K. Changing patterns in the epidemiology of traumatic brain injury. Nature Reviews Neurology. 9 (4), 231-236 (2013).
- Corso, P., Finkelstein, E., Miller, T., Fiebelkorn, I., Zaloshnja, E. Incidence and lifetime costs of injuries in the United States. Injury Prevention. 12 (4), 212-218 (2006).
- Pearson, W. S., Sugerman, D. E., McGuire, L. C., Coronado, V. G. Emergency department visits for traumatic brain injury in older adults in the United States: 2006-08. Western Journal of Emergency Medicine. 13 (3), 289-293 (2012).
- Whitlock, J. A. Jr, Hamilton, B. B. Functional outcome after rehabilitation for severe traumatic brain injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 76 (12), 1103-1112 (1995).
- Schwarzbold, M., et al. Psychiatric disorders and traumatic brain injury. Neuropsychiatric Disease and Treatment. 4 (4), 797-816 (2008).
- Whelan-Goodinson, R., Ponsford, J., Johnston, L., Grant, F. Psychiatric disorders following traumatic brain injury: their nature and frequency. Journal of Head Trauma Rehabilitation. 24 (5), 324-332 (2009).
- Peskind, E. R., Brody, D., Cernak, I., McKee, A., Ruff, R. L. Military- and sports-related mild traumatic brain injury: clinical presentation, management, and long-term consequences. Journal of Clinical Psychiatry. 74 (2), 180-188 (2013).
- Martin, L. A., Neighbors, H. W., Griffith, D. M. The experience of symptoms of depression in men vs women: analysis of the National Comorbidity Survey Replication. JAMA Psychiatry. 70 (10), 1100-1106 (2013).
- Makinde, H. M., Just, T. B., Cuda, C. M., Perlman, H., Schwulst, S. J. The Role of Microglia in the Etiology and Evolution of Chronic Traumatic Encephalopathy. Shock. 48 (3), 276-283 (2017).
- Belanger, H. G., Vanderploeg, R. D., McAllister, T. Subconcussive Blows to the Head: A Formative Review of Short-term Clinical Outcomes. Journal of Head Trauma Rehabilitation. 31 (3), 159-166 (2016).
- Carman, A. J., et al. Expert consensus document: Mind the gaps-advancing research into short-term and long-term neuropsychological outcomes of youth sports-related concussions. Nature Reviews Neurology. 11 (4), 230-244 (2015).
- Kramer, S. P. A Contribution to the Theory of Cerebral Concussion. Annals of Surgery. 23 (2), 163-173 (1896).
- Lighthall, J. W. Controlled cortical impact: a new experimental brain injury model. Journal of Neurotrauma. 5 (1), 1-15 (1988).
- Dixon, C. E., Clifton, G. L., Lighthall, J. W., Yaghmai, A. A., Hayes, R. L. A controlled cortical impact model of traumatic brain injury in the rat. Journal of Neuroscience Methods. 39 (3), 253-262 (1991).
- Schwulst, S. J., Trahanas, D. M., Saber, R., Perlman, H. Traumatic brain injury-induced alterations in peripheral immunity. Journal of Trauma and Acute Care Surgery. 75 (5), 780-788 (2013).
- Trahanas, D. M., Cuda, C. M., Perlman, H., Schwulst, S. J. Differential Activation of Infiltrating Monocyte-Derived Cells After Mild and Severe Traumatic Brain Injury. Shock. 43 (3), 255-260 (2015).
- Makinde, H. M., Cuda, C. M., Just, T. B., Perlman, H. R., Schwulst, S. J. Nonclassical Monocytes Mediate Secondary Injury, Neurocognitive Outcome, and Neutrophil Infiltration after Traumatic Brain Injury. Journal of Immunology. 199 (10), 3583-3591 (2017).
- Thompson, H. J., et al. Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation. Journal of Neurotrauma. 22 (1), 42-75 (2005).
- Marmarou, A., et al. A new model of diffuse brain injury in rats. Part I: Pathophysiology and biomechanics. Journal of Neurosurgery. 80 (2), 291-300 (1994).
- Reneer, D. V., et al. A multi-mode shock tube for investigation of blast-induced traumatic brain injury. Journal of Neurotrauma. 28 (1), 95-104 (2011).
- Ma, X., Aravind, A., Pfister, B. J., Chandra, N., Haorah, J. Animal Models of Traumatic Brain Injury and Assessment of Injury Severity. Molecular Neurobiology. , (2019).
- Makinde, H. M., et al. Monocyte depletion attenuates the development of posttraumatic hydrocephalus and preserves white matter integrity after traumatic brain injury. PLoS One. 13 (11), e0202722 (2018).
- Osier, N. D., Dixon, C. E. The Controlled Cortical Impact Model: Applications, Considerations for Researchers, and Future Directions. Frontiers in Neurology. 7, 134 (2016).
- Iaccarino, C., Carretta, A., Nicolosi, F., Morselli, C.
