المنصوص عليها هنا هو البروتوكول الذي تفاصيل الخطوات اللازمة لإنشاء نموذج الحيوانية من الم المزمن بعد الاسكيميه (CPIP). هذا هو نموذج المعترف بها جيدا محاكاة البشرية الاقليميه المعقدة متلازمة الم من النوع الأول. كما يتم تقييم الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية ، فضلا عن السلوكيات النوسيفينسيفيه المستحثة كابسايسين التي لوحظت في نموذج الفئران CPIP.
متلازمة الم الاقليميه المعقدة من النوع الأول (CRPS-I) هو مرض عصبي يسبب الما شديدا بين المرضي ويبقي حاله طبية لم تحل. ومع ذلك ، لم يتم الكشف عن أليات الاساسيه ل CRPS-I. ومن المعروف ان نقص التروية/ضخ هو واحد من العوامل الرئيسية التي تسبب CRPS-I. بواسطة نقص التروية لفترات طويلة وضخ من الطرف الخلفي ، تم تاسيس الفئران المزمنة ما بعد الاسكيميه الم (CPIP) نموذج لتقليد CRPS-I. وقد أصبح نموذج CPIP نموذجا الحيوانية المعترف بها جيدا لدراسة أليات CRPS-I. يصف هذا البروتوكول الإجراءات التفصيلية التي ينطوي عليها إنشاء نموذج الفئران من CPIP ، بما في ذلك التخدير ، يليه نقص ترويه/ضخ الطرف الخلفي. ويتم تقييم خصائص نموذج CPIP الفئران أيضا عن طريق قياس الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية للطرف الخلفي ، فضلا عن الاستجابات النوسيفينسيفيه للحقن الحاد كابسايسين. الفئران نموذج CPIP يسلك العديد من المظاهر مثل CRPS-I-مثل ، بما في ذلك وذمه الأطراف الخلفية وفرط الدم في المرحلة المبكرة بعد التاسيس ، والhypersensibiltés الحرارية والميكانيكية المستمرة ، وزيادة الاستجابات النوسيفينسيفيه للحقن كابسايسين الحاد. هذه الخصائص تجعل من نموذج الحيوانية مناسبه لمزيد من التحقيق في أليات المعنية في CRPS-I.
متلازمة الم الاقليميه المعقدة (crps) reprents المعقدة واعراض الم المزمن الناجمة عن الكسور, الصدمة, الجراحة, نقص التروية أو أصابه العصب1,2,3. ويصنف CRPS إلى فئتين فرعيتين: CRPS من النوع الأول والنوع الثاني (CRPS-I و CRPS-II)4. وكشفت الدراسات الوبائية ان انتشار CRPS كان حوالي 1:20005. CRPS-I ، الذي يظهر اي ضرر العصب واضحة ، يمكن ان يؤدي إلى الم المزمن ويؤثر بشكل كبير علي نوعيه حياه المرضي. العلاجات المتاحة الحالية تظهر اثار علاجيه غير كافيه. ولذلك ، لا يزال CRPS-I لا تزال مشكله سريريه هامه وصعبه التي تحتاج إلى معالجه.
إنشاء نموذج الحيوانية قبل السريرية محاكاة CRPS-I أمر حاسم لاستكشاف أليات الكامنة وراء CRPS-I. من أجل معالجه هذه المسالة ، Coderre وآخرون تصميم نموذج الفئران من خلال تطبيق نقص التروية لفترات طويلة وضخ إلى الطرف الخلفي لتلخيص CRPS-I6. ومن المعروف ان نقص التروية/ضخ الاصابه هو من بين واحده من الأسباب الرئيسية لل CRPS-I7. الفئران نموذج CPIP يسلك العديد من الاعراض مثل CRPS-I-مثل ، والتي تشمل الأطراف الخلفية وذمه وفرط الدم في مرحله مبكرة بعد إنشاء نموذج ، تليها مع الhypersensibiltés الحرارية والميكانيكية المستمرة6. مع المعونة من هذا النموذج, ويقترح ان الحساسية المركزية الم, الطرفية TRPA1 قناه التنشيط والأكسجين التفاعلية توليد أنواع, الخ. المساهمة في crps-I8,9,10. انشانا مؤخرا بنجاح نموذج الفئران CPIP وأداء الجيش الملكي النيبالي-التسلسل من العقدة الجذر الظهرية (DRGs) ان العصبي المتضررة مخلب الخلفية11. اكتشفنا بعض أليات المحتملة التي من المحتمل ان تشارك في التوسط لhypersensibiltés الم من CRPS-I11. كما حددنا مستقبلات عابره المحتملة vanilloid 1 (TRPV1) قناه في الخلايا العصبية DRG كمساهم مهم في الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية من CRPS-I12.
في هذه الدراسة ، وصفنا الإجراءات التفصيلية التي ينطوي عليها إنشاء نموذج الفئران من CPIP. كما قمنا بتقييم نموذج CPIP الفئران من خلال قياس الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية ، فضلا عن استجابتها للتحدي كابسايسين الحاد. نقترح ان نموذج CPIP الفئران يمكن ان يكون نموذجا الحيوانية يمكن الاعتماد عليها لمزيد من التحقيق في أليات المعنية في CRPS-I.
يصف هذا البروتوكول الطرق المفصلة لإنشاء نموذج CPIP للفئران عن طريق تطبيق نقص التروية/الضخ علي الأطراف الخلفية للفئران. وهو ينطوي علي تقييم مظهر الأطراف الخلفية ، وذمه ، hypersensibiltés الميكانيكية/الحرارية ، والسلوكيات النوسيفينسيفيه الحاده ردا علي حقن كابسايسين.
نقص ترويه الأطر?…
The authors have nothing to disclose.
تم رعاية هذا المشروع من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81873365 و 81603676) ، وصناديق العلوم الطبيعية الاقليميه تشجيانغ للعلماء الشباب المتميزين (LR17H270001) وصناديق البحوث من جامعه تشجيانغ الصينية الطبية ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY37).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |