Burada verilen kronik post-iskemi ağrı (CPIP) bir hayvan modeli kurmak için adımları ayrıntıları bir protokoldür. Bu insan kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I taklit iyi tanınan bir modeldir. Mekanik ve termal hipersensitiviteler daha da değerlendirilir, ayrıca CPIP sıçan modelinde gözlenen kapsaisin kaynaklı nosifensif davranışlar.
Kompleks bölgesel ağrı sendromu tip-I (CRPS-I) hastalar arasında şiddetli ağrıya neden olan ve çözülmemiş bir tıbbi durum olmaya devam eden nörolojik bir hastalıktır. Ancak, CRPS-I’ın altında yatan mekanizmalar henüz açıklanmadı. İskemi/reperfüzyonun CRPS-I’a neden olan önde gelen faktörlerden biri olduğu bilinmektedir. Uzun süreli iskemi ve arka ekstremitenin reperfüzyonu ile CRPS-I’ı taklit etmek için sıçan kronik iskemi sonrası ağrı (CPIP) modeli oluşturulmuştur. CPIP modeli CRPS-I mekanizmaları incelemek için iyi tanınan bir hayvan modeli haline gelmiştir. Bu protokol, anestezi de dahil olmak üzere CPIP sıçan modelinin kurulmasında yer alan ayrıntılı prosedürleri açıklar, ardından arka ekstremitenin iskemi/reperfüzyonu. Sıçan CPIP modelinin özellikleri, arka ekstremitenin mekanik ve termal hipersensitivitelerinin yanı sıra akut kapsaisin enjeksiyonuna verilen nosifensive yanıtları ölçülerek daha da değerlendirilir. Sıçan CPIP modeli, arka ekstremite ödemi ve hiperemi de dahil olmak üzere, kuruluşundan sonra erken evrede, kalıcı termal ve mekanik hipersensitiviteler ve akut kapsaisin enjeksiyonuna karşı artan nosifensive yanıtları da dahil olmak üzere çeşitli CRPS-I benzeri belirtiler sergiler. Bu özellikler crps-I’de yer alan mekanizmaların daha fazla araştırılması için uygun bir hayvan modeli haline getirmelidir.
Kompleks bölgesel ağrı sendromu (CRPS) kırıklar, travma, cerrahi, iskemi veya sinir yaralanması1,2,3kaynaklanan kompleks ve kronik ağrı belirtileri reprents . CRPS 2 alt kategoriye ayrılır: CRPS tip-I ve tip-II (CRPS-I ve CRPS-II)4. Epidemiyolojik çalışmalar CRPS prevalansının yaklaşık 1:20005olduğunu ortaya koymuştur. CrPS-I, belirgin bir sinir hasarı gösterir, kronik ağrıya neden olabilir ve önemli ölçüde hastaların yaşam kalitesini etkiler. Mevcut tedaviler yetersiz terapötik etkileri göstermektedir. Bu nedenle, CRPS-I hala ele alınması gereken önemli ve zorlu bir klinik sorun olmaya devam etmektedir.
CRPS-I’ı taklit eden klinik öncesi bir hayvan modelinin oluşturulması, CRPS-I’in altında yatan mekanizmaların araştırılması için çok önemlidir. Bu sorunu gidermek için, Coderre ve ark. CRPS-I6özetlemek için arka ekstremite için uzun süreli iskemi ve reperfüzyon uygulayarak bir sıçan modeli tasarladı. İskemi/reperfüzyon yaralanmasının CRPS-I7’ninbaşlıca nedenlerinden biri olduğu bilinmektedir. Sıçan CPIP modeli birçok CRPS-I-benzeri belirtiler sergiler, hangi model kurulması ndan sonra erken aşamada arka ekstremite ödemi ve hiperemi dahil, kalıcı termal ve mekanik hipersensitiviteler ile takip6. Bu modelin yardımıyla, merkezi ağrı sensitizasyonu, periferik TRPA1 kanal aktivasyonu ve reaktif oksijen türleri üretimi, vb CRPS-I8katkıdaönerilmektedir ,9,10. Biz son zamanlarda başarıyla CPIP sıçan modeli kurulan ve dorsal kök gangliyonu RNA-sıralama yapıldı (DRGs) etkilenen arka pençe innerve11. CRPS-I11’inağrı hipersensitivitelerine aracılık eden bazı potansiyel mekanizmalar keşfettik. Ayrıca DRG nöronlarında geçici reseptör potansiyeli vanilloid 1 (TRPV1) kanalını CRPS-I12’ninmekanik ve termal hipersensitivitelerine önemli bir katkıda bulunan olarak belirledik.
Bu çalışmada CPIP fare modelinin oluşturulmasında yer alan ayrıntılı prosedürler açıklanmıştır. Ayrıca, sıçan CPIP modelini mekanik ve termal hipersensitivitelerin yanı sıra akut kapsaisin sorununa karşı duyarlılığını ölçerek değerlendirdik. Biz sıçan CPIP modeli CRPS-I dahil mekanizmaların daha fazla soruşturma için güvenilir bir hayvan modeli olabileceğini öneriyoruz.
Bu protokol, sıçanların arka ekstremitelerine iskemi/reperfüzyon uygulayarak bir sıçan CPIP modeli oluşturmak için ayrıntılı yöntemleri açıklamaktadır. Kapsaisin enjeksiyonuna yanıt olarak arka ekstremite görünümü, ödem, mekanik/termal hipersensitiviteler ve akut nosifensif davranışların değerlendirilmesini içerir.
Ekstremite iskemi/reperfüzyonu insan hastalarında CRPS-I’ye katkıda bulunan yaygın bir faktördür12. Bu protokol, insan CRPS-I…
The authors have nothing to disclose.
Bu proje Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81873365 ve 81603676), Zhejiang İl Doğa Bilimleri Fonları Seçkin Genç Akademisyenler (LR17H270001) ve Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi araştırma fonları ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY19).
1.5 ml Eppendorf tube | Eppendorf | 22431021 | |
DMSO | Sigma-Aldrich | D1435 | |
Capsaicin | APEXBIO | A3278 | |
Digital caliper | Meinaite | NA | |
O-ring | O-Rings West | Nitrile 70 Durometer | 7/32 in. internal diameter |
Plantar Test Apparatus | UGO Basile, Italy | 37370 | |
von Frey filaments | UGO Basile, Italy | NC12775 |