Bu hayvan modeli, araştırmacıların farelerin arka eklerinde en az 8 hafta süren istatistiksel olarak anlamlı sekonder lenfödemi indüklemelerini sağlar. Model lenfödem patofizyolojisi çalışma ve yeni tedavi seçenekleri araştırmak için kullanılabilir.
Hayvan modelleri hastalığın patofizyolojisini anlamak için lenfödem araştırmalarında ve aynı zamanda potansiyel tedavi seçeneklerini araştırmak için büyük önem taşımaktadır. Bu fare modeli araştırmacılar ın en az 8 hafta süren önemli lenfödem neden sağlar. Lenfödem fraksiyonlu radyoterapi ve lenfatiklerin cerrahi ablasyon kombinasyonu kullanılarak indüklenir. Bu model fareler ameliyat öncesi ve sonrası 10 Gri (Gy) radyasyon bir doz almak gerektirir. Modelin cerrahi kısmı üç lenf damarlarının ligasyonu ve fare arka limb iki lenf düğümleri çıkarma içerir. Farelerin küçük anatomik yapıları nedeniyle mikrocerrahi aletlere ve mikroskoba erişim esastır. Bu modelin avantajı istatistiksel olarak anlamlı lenfödem sonuçları, hangi farklı tedavi seçenekleri değerlendirmek için iyi bir temel sağlar. Aynı zamanda mikrocerrahi eğitim için büyük ve kolay kullanılabilir bir seçenektir. Bu modelin sınırlaması, yordamın özellikle önceden uygulanmadıysa zaman alıcı olabileceğidir. Model farelerde objektif olarak ölçülebilir lenfödem ile sonuçlanır, ciddi morbidite neden olmadan ve üç ayrı projede test edilmiştir.
Lenfödem lokalize doku şişmesine yol açan lenf sıvısı birikimi ile karakterizedir, esas olarak lenf damarlarında lenf sıvısının bozulmuş veya bozulmuş akışı nedeniyle oluşur1. Lenf akışı, lenf atik sisteminde enfeksiyon, obstrüksiyon, yaralanma veya konjenital defektler nedeniyle bozulabilir veya bozulabilir2. Bu etyolojiler lenfatik sıvı birikimi ile sonuçlanır, hangi inflamasyon kronik bir devlet yol açar, sonraki fibrozis ile sonuçlanan, yanı sıra yağ dokusu birikimi3. Lenfödem primer veya sekonder lenfödem olarak kategorize edilebilir. Primer lenfödem gelişimsel anormallikler veya genetik mutasyon neden olur2,4. Sekonder lenfödem altta yatan sistemik hastalık, cerrahi veya travma2,4nedeniyle oluşur. Sekonder lenfödem dünyada lenfödemin en sık görülen şeklidir2. Gelişmiş ülkelerde sekonder lenfödemin en sık nedeni adjuvan radyoterapi ve lenf nodülüdiseksiyonu 5 gibi onkolojik tedavidir. Lenfödem meme kanseri hastaları arasında en sık, ama aynı zamanda jinekolojik hastalarda gelişebilir, melanom, genitoüriner veya boyun kanseri6. Meme kanseri tanısı konan tüm kadınların %21’inde lenfödem7.
Lenfödem hasta için hem fiziksel hem de psikolojik olarak stresli olabilir. Lenfödem olan hastalar enfeksiyon riski var5,8,9, yaşam kalitesi düşük ve sosyal anksiyete ve depresyon belirtileri gelişebilir10. Kronik lenfödem komplikasyonları bakım yüksek maliyet ve artan bir hastalık yükü yol9,11. Bulgular da lenfödem meme kanseri tedavisi sonrası ölüm riski ile ilişkili olabileceğini ileri sürmüşlerdir12. Etkilenen bölgenin sıkıştırığı, manuel lenf drenajı ve genel cilt bakımı gibi konservatif yönetim ilk basamak yaklaşımı olmaya devam etmektedir. Şu anda hiçbir iyileştirici tedavi6. Cerrahi ve medikal tedavi alanında ilerleme kaydedilmiş olsa da, hala gelişme için yer vardır. Daha fazla araştırma, patofizyoloji ve hastalığın ilerlemesi içgörü sağlayan, klinisyenler hastalar için daha iyi tedavi seçenekleri sağlamak için gereklidir5.
Hastalıkların patofizyolojisini anlamak ve potansiyel tedavi seçeneklerini geliştirmek için klinik öncesi araştırmalarda hayvan modelleri kullanılmaktadır. Birkaç farklı lenfödem hayvan modelleri köpekleri13,14, tavşan 15 , koyun16, domuz17,18 ve kemirgenler19,20, 21,22,23,24. Kemirgen modeli en uygun maliyetli model gibi görünüyor, lenfatik fonksiyonun rekonstrüksiyonu araştırırken, kemirgenler nedeniyle kolayca erişilebilir ve nispeten düşük fiyatlı25. Fare modellerinin çoğunluğu farelerin kuyruğunda lenfödem indükleyen odaklanmıştır21,22,23. Kuyruk modeli çok güvenilirdir ancak lenfödemi indükleyen tam cerrahi teknik önceki yayınlanmış materyalde önemli ölçüde farklılık gösterir. Bu durum, bilinen litterature25’tesunulan gelişmiş lenfödemin süresi ve sağlamlığında dalgalanmalara neden olabilir. Farklı teknikler de hindlimb modelinde lenfödem indüklemek için kullanılmaktadır ve onlar da değişen sonuçlar verim, ancak hindlimb modeli çevirisel bir perspektiften anlamak daha kolay olabilir. Önceki lenfödem modelleri spontan lenfödem çözünürlüğü ile engellenmiş ve bu nedenle tekrarlanabilir ve kalıcı lenfödem modeline ihtiyaç duyulmaktadır25. Araştırmacılar daha önce radyasyon dozu artırmak için çalıştık, spontan lenfödem çözünürlüğünü önlemek için, ama bu genellikle sonraki şiddetli morbidite yol açmıştır25.
Bu model, mikrocerrahi ile radyasyonu birleştirerek, ciddi morbiditeye neden olmadan istatistiksel olarak anlamlı lenfödem ile sonuçlanır. Model lenfödem neden ışınlama bir doz ekleyerek önceki bir cerrahi modelden revize edilmiştir, ciddi morbidite neden olmadan26. Ayrıca mikrocerrahi eğitimi için büyük bir fırsat sunuyor. Farelerin küçük anatomik yapıları nedeniyle mikrocerrahi ekipmana ve mikroskopa erişim gereklidir. Cerrahi işlem, kullanıcıya mikrocerrahi aletlerle dikiş gibi temel mikrocerrahi teknikler öğretildiğinde yapılabilir. Bu prosedürü gerçekleştiren operatörler, Acland’ın mikrocerrahi becerileri (1981) ve temel mikrosutür tekniği (1985) ön koşulları üzerine eğitim videolarını izlediler. Araştırmada kullanmadan önce cerrahi işlemi 8−10 kez uygulamanızı öneririz. Yordamın uygulanması, daha az hata yapılmasını ve yordamın daha verimli bir şekilde gerçekleştirilmesini sağlar. Mastered zaman, cerrahi işlem 45 dakika içinde yapılabilir.
Bu protokolde birkaç kritik adım vardır. İlk olarak, araştırmacıların radyoaktivite ile çalışırken güvenlik önlemleri almaları önemlidir. İkinci olarak, bu protokolün cerrahi kısmı sırasında, fare anestezi edildikten sonra işlemi başlatmak ve gereksiz molalar vermeden bitirmek önemlidir. Bu hayvan için aşırı uzun bir cerrahi süre önlemek ve anestezi ameliyat sırasında etkisini kaybetmesini önlemek için önemlidir. Sadece bir adet anestezi enjeksiyonunun yapılması ve cerrahi işlemin t…
The authors have nothing to disclose.
Yazarlar Peter Bollen, Mikroskoplar aracılığıyla görülen görüntüleri kaydetmek için gerekli ekipman ödünç için Biyomedikal Laboratuvarı başkanı teşekkür ederim.
10-0 Nylon suture | S&T | 12051-10 | |
6-0 Nylon suture – Dafilon | B Braun | C0933112 | |
Coagulator – ICC 50 | ERBE | ||
Cotton tipped applicators | Yibon medical co | ||
Dissecting forceps | Lawton | 09-0190 | |
Elastic retractors | Odense University Hospital | ||
Electrical clipper | Aesculap | GT420 | |
Fentanyl 0,315 mg/ml | Matrix | ||
Heating pad – PhysioSuite | Kent Scientific Corp. | ||
Isoflurane 1000mg Attane | Scan Vet | ||
Isoflurane vaporizer – PPV | Penlon | ||
Micro jewler forceps | Lawton | 1405-05 | |
Micro Needle holder | Lawton | 25679-14 | |
Micro scissors | Lawton | 10128-15 | |
Micro tying forceps | Lawton | 43953-10 | |
Microfine U-40 syringe 0,5ml | BD | 328821 | |
Microlance syringe 25g | BD | ||
Microlance syringe 27g | BD | ||
Midazolam 5 mg/ml (hameln) | Matrix | ||
Needle holder – Circle wood | Lawton | 08-0065 | |
Non woven swabs | Selefa | ||
Opmi pico microscope F170 | Zeiss | ||
Patent blue V – 25 mg/ml | Guerbet | ||
Scissors – Joseph | BD | RH1630 | |
Siemens INVEON multimodality pre-clinical scanner | Siemens pre-clinical solutions | ||
Source of radiation – D3100 | Gulmay | ||
Stata Statistical Software: Release 15 | StataCorp LLC | ||
Temgesic – 0,2 mg | Indivior | ||
Vet eye ointment – viscotears | Bausch & Lomb |