Summary
يصف هذا البروتوكول خطوات إنشاء نموذج أرنب مع اثنين من تمدد الأوعية الدموية المهضوم بالإيلاستيز مع ديناميكا الدم المختلفة (كوكبة الجذع والتشعب). هذا يسمح باختبار أجهزة الأوعية الدموية الجديدة في تمدد الأوعية الدموية مع مختلف البنية الوعائية وظروف الدورة الدموية داخل واحد.
Abstract
تلعب النماذج الحيوانية قبل السريرية ذات الخصائص الديناميكية الدموية والمورفولوجية والنسيجية القريبة من تمدد الأوعية الدموية البشري داخل الجمجمة دورا رئيسيا في فهم العمليات الفسيولوجية المرضية وتطوير واختبار استراتيجيات علاجية جديدة. تهدف هذه الدراسة إلى وصف نموذج جديد لتمدد الأوعية الدموية للأرانب يسمح بإنشاء تمدد الأوعية الدموية العجزي المهضوم بالإيلاستيز مع ظروف ديناميكية دموية مختلفة داخل نفس الحيوان.
خضعت خمس إناث من الأرانب البيضاء النيوزيلندية بمتوسط وزن 4.0 (± 0.3) كجم ومتوسط عمر 25 (±5) أسابيع لجذع الجراحة المجهرية وتمدد الأوعية الدموية التشعب. تم إنشاء تمدد الأوعية الدموية (الجذع) عن طريق التعرض للشريان السباتي المشترك الأيمن (CCA) في أصله في الجذع العضدي. تم تطبيق مقطع مؤقت في أصل CCA وآخر ، 2 سم أعلاه. تم علاج هذا الجزء بحقن موضعي من 100 U من elastase لمدة 20 دقيقة. تم إنشاء تمدد الأوعية الدموية الثاني (التشعب) عن طريق خياطة كيس شرياني معالج بالإيلاستيز في مفاغرة من طرف إلى جانب من CCA الأيمن إلى CCA الأيسر. تم التحكم في المباح عن طريق تصوير الأوعية الفلورية مباشرة بعد الخلق.
كان متوسط مدة الجراحة 221 دقيقة. كان إنشاء تمدد الأوعية الدموية في نفس الحيوان ناجحا في جميع الأرانب دون مضاعفات. تم تسجيل براءة اختراع لجميع تمدد الأوعية الدموية مباشرة بعد الجراحة باستثناء تمدد الأوعية الدموية التشعب ، والذي أظهر تفاعلا شديدا للأنسجة بسبب حضانة الإيلاستاز وتجلط الدم الفوري داخل اللمعان. لم يلاحظ أي معدل وفيات أثناء الجراحة والمتابعة لمدة تصل إلى شهر واحد. اقتصرت المراضة على متلازمة دهليزية عابرة (أرنب واحد) ، والتي تعافت تلقائيا في غضون يوم واحد.
ويتضح هنا لأول مرة جدوى إنشاء نموذج أرنب ثنائي تمدد الأوعية الدموية مع خصائص ديناميكية دموية للجذع والتشعب وظروف جدار شديدة التدهور. يسمح هذا النموذج بدراسة المسار الطبيعي واستراتيجيات العلاج المحتملة على أساس بيولوجيا تمدد الأوعية الدموية في ظل ظروف تدفق مختلفة.
Introduction
تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة هو حالة خطيرة مع معدل وفيات بعد تمزق يصل إلى 50 ٪ والعجز على المدى الطويل في 10-20 ٪ من المرضى1. شهد العقد الماضي تطورا سريعا في خيارات العلاج داخل الأوعية الدموية ، ولكن في الوقت نفسه ، شهد أيضا معدل متزايد من التكرار مع ما يصل إلى 33٪ من إعادة قناة تمدد الأوعية الدموية بعد لف 2,3. لفهم أفضل للفيزيولوجيا المرضية الكامنة وراء انسداد تمدد الأوعية الدموية وإعادة الاستقناء ، وكذلك لتطوير واختبار أجهزة الأوعية الدموية الجديدة ، هناك حاجة حاليا إلى نماذج موثوقة قبل السريرية التي تحاكي خصائصها الديناميكية الدموية والمورفولوجية والنسيجية تلك الخاصة بتمدد الأوعية الدموية البشري داخل الجمجمة 4,5,6 . اعتبارا من اليوم ، لا يوجد نموذج محدد كمعيار للتجارب قبل السريرية ، وتتوفر مجموعة كبيرة من الأنواع والتقنيات للباحثين 7,8.
ومع ذلك ، فإن الأرنب هو نوع ذو أهمية خاصة بسبب الحجم والتشابه الديناميكي بين شرايين الرقبة والأوعية الدماغية البشرية ، بالإضافة إلى ملامح التخثر وانحلال الجلطات المماثلة. أظهرت العديد من النماذج التي تحتوي على تمدد الأوعية الدموية العجزي المهضوم بالإيلاستيز على الشرايين السباتية الشائعة (CCAs) أوجه تشابه نوعية وكمية مع تمدد الأوعية الدموية البشري داخل الجمجمة من حيث ظروف التدفق والميزات الهندسية وخصائص الجدار9،10،11،12. تهدف هذه الدراسة إلى وصف تقنية لإنشاء نموذج جديد لتمدد الأوعية الدموية للأرانب مع كل من تمدد الأوعية الدموية المهضوم بالجذع والتشعب في نفس الحيوان. والتقنيات الجراحية مستوحاة من تقنيات هوه وآخرون 13 وواندرر وآخرون 14 مع تعديلات طفيفة لتوفير توحيد جيد وقابلية للتكرار وضمان انخفاض معدل الوفيات والاعتلال.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
ملاحظة: تمت الموافقة على التجربة من قبل اللجنة المحلية لرعاية الحيوان في كانتون برن ، سويسرا (رقم الطلب BE108/16) ، وتم تنفيذ جميع إجراءات رعاية الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية ومبادئ 3R15,16. يتم الإبلاغ عن البيانات وفقا للمبادئ التوجيهية ARRIVE. تم إجراء الإدارة المحيطة بالجراحة من قبل طبيب تخدير بيطري معتمد من مجلس الإدارة. بالنسبة للدراسة ، تم إيواء إناث الأرانب البيضاء النيوزيلندية ، بمتوسط وزن 4.0 (± 0.3) كجم ومتوسط عمر 25 (±5) أسابيع ، في درجة حرارة غرفة تتراوح بين 22 و 24 درجة مئوية مع دورة ضوء / مظلمة مدتها 12 ساعة مع حرية الوصول إلى الماء والكريات والتبن.
1. مرحلة ما قبل الجراحة والتخدير
- إجراء فحص سريري على النحو الموصى به من قبل جمعية أطباء التخدير البيطري والكلية الأوروبية والأمريكية للتخدير البيطري والتسكين للتأكد من أن الأرانب بصحة جيدة من خلال وزن كل ، وتقييم الغشاء المخاطي ، وتوثيق وقت إعادة ملء الشعيرات الدموية وجودة النبض ، وإجراء التسمع الرئوي والقلبي وكذلك ملامسة البطن.
- بناء على النتيجة السريرية ، انسب تصنيف الجمعية الأمريكية لأطباء التخدير (ASA) إلى كل أرنب17. إجراء عملية جراحية فقط على الحيوانات مع درجة ASA I.
- حلق كلا الأذنين الخارجيتين ، وتطبيق كريم بريلوكاين ليدوكائين على الشرايين والأوردة الأذنية. تحقيق التخدير العميق مع مزيج من الكيتامين 20 ملغم / كغم ، ديكسميديتوميدين 0.1 ملغ / كغ ، والميثادون 0.3 ملغ / كغ حقن تحت الجلد (SC). اترك الحيوانات دون إزعاج لمدة 15 دقيقة. أعط الأوكسجين التكميلي (3 لتر/دقيقة) من خلال قناع وجه مخفف، وراقبه باستخدام مقياس التأكسج النبضي.
- ضع قنية 22 جم في الشريان المركزي الأذني الأيسر وكذلك في الوريد الأذني. الحث على التخدير العام مع البروبوفول 1-2 مغ / كغ عن طريق الوريد (IV) حتى التأثير (فقدان منعكس البلع). تابع التنبيب داخل القصبة الهوائية عبر أنبوب سيليكون (قطره الداخلي 3 مم).
- حلق الجبهة لوضع مستشعرات تخطيط كهربية الدماغ (EEG) للأطفال. حلق المجال الجراحي ، وحقن روبيفاكين هيدروكلوريد 0.75 ٪ داخل الأدمة.
- ضع الأرنب على طاولة العمليات في حالة توقف ظهري ، وقم بتثبيت المراقبة الكاملة ، وقم بتوصيل أنبوب القصبة الهوائية الداخلية بنظام دائرة أطفال منخفض المقاومة. الحفاظ على التخدير مع إعطاء الأيزوفلوران في الأكسجين ، واستهداف أقصى تركيز المد والجزر (Et) من 1.3 ٪.
- توفير ضخ مستمر من اللاكتات الرنين 5 مل / كجم / ساعة من خلال الوصول الوريدي. ضمان المراقبة السريرية والفعالة حتى التنبيب عن طريق قياس التأكسج النبضي ، دوبلر وضغط الدم الغازي ، تخطيط القلب الكهربائي 3-lead ، EEG ، درجة حرارة المستقيم ، والغازات المستنشقة والزفير.
- تطهير المجال الجراحي مع اليود البوفيدون من manubrium sterni إلى زوايا الفك ، وتطبيق اللف المعقم. أثناء الجراحة ، قم بتزويد مسكن البشرة باليدوكائين (ضخ معدل ثابت (CRI) من 50 ميكروغرام / كجم / دقيقة) والفنتانيل (CRI من 3-10 ميكروغرام / كجم / ساعة). إجراء التهوية التلقائية أو المساعدة. السماح بفرط الرأس المتساهل.
- إجراء تحليل واحد على الأقل لغازات الدم الشرياني أثناء الجراحة. في حالة انخفاض ضغط الدم (متوسط الضغط الشرياني أقل من 60 مم زئبق) ، تعامل معه بالنورادرينالين ، معاير حتى التأثير. استخدم وسادة تدفئة أو نظام تسخين الهواء القسري لمنع انخفاض حرارة الجسم (الهدف: درجة حرارة المستقيم 37.5-38.5 درجة مئوية).
ملاحظة: عندما يتم قياس ضغط الدم الشرياني الغازي في شريان الأذن اليسرى ، فإن قطع CCA الأيسر سيوقف تدفق الدم ويقمع المنحنى. ثم يجب قياس ضغط الدم باستخدام تقنية دوبلر حتى إعادة فتح الوعاء.
2. الجراحة
- أقبل
- قم بعمل شق متوسط في الجلد من العظم اللامي حتى نقطة 1.5 سم ذيلية إلى المانوبريوم ستيرني باستخدام مشرط. تحضير الأنسجة تحت الجلد والدهنية من الشق الإنسي أثناء إجراء الإرقاء الدقيق.
- حرر عضلة القصي الرأسي من النسيج الضام الملتصق ، وتطبيق يدوكائين موضعيا (2-4 مجم / كجم ، يفضل يدوكائين 1٪) لتجنب الرمع العضلي. كشف CCA الصحيح عن طريق العضلة القصية الدماغية وإبقائها مبللة بمسحات مبللة.
- الآن قم بإعداد الأجزاء الجانبية والقريبة من عضلة sternocephalicus وسحبها عن طريق الإنسي باستخدام حلقة وعاء لفضح CCA. تحديد الوريد الوداجي الخارجي وحمايته بمسحة صغيرة مبللة.
- تشريح النسيج الضام بعناية على طول CCA القريب حتى تشعب الجذع العضدي للكشف عن الشريان. في وجود فروع صغيرة قادمة من الشريان ، قم بتخثرها مع الكي.
ملاحظة: احرص على تجنب أي تلف في الأعصاب.
- إنشاء تمدد الأوعية الدموية في الجذع وحصاد الأنسجة لتمدد الأوعية الدموية التشعب
- قبل قص CCA الصحيح ، قم بقياس وقت مكافحة التخثر (ACT) ، وإعطاء الهيبارين natrium (80 EI / kg) بشكل منهجي عبر وريد الأذن (الذي يقوم به فريق التخدير) لتجنب أحداث الانصمام الخثاري.
- الآن قم بتطبيق مقطعين مؤقتين: الأول في أصل CCA والثاني 2 سم بعيد عنه (الشكل 1A). ضع وسادة مطاطية تحت الوعاء واشطفها ب papaverine HCL (40 مجم / مل ؛ 1: 1 مذاب في محلول ملحي بنسبة 0.9٪) لتوسيع الأوعية.
- إزالة adventitia بعناية باستخدام مقص مجهري. قم بإجراء بضع الشرايين أسفل المشبك البعيد باستخدام قسطرة IV 22 G ، وأدخل القسطرة بشكل سببي حتى المشبك القريب (الشكل 1A ، B).
- اغسل الجزء داخل اللمعان باستخدام كلوريد الصوديوم الهيباريني (500 U / 100 مل في محلول ملحي بنسبة 0.9٪) حتى لا يكون هناك دم مرئي ، وأخيرا قم بإصلاح القسطرة برباط (4-0). الآن ، من خلال القسطرة ، حقن 0.1-0.2 مل من elastase (100 وحدة دولية ذابت سابقا في 5 مل من Tris-Buffer) في جزء الشريان واحتضنها لمدة 20 دقيقة (الشكل 1B).
- ابدأ بالتشريح على الجانب الأيسر لفضح CCA الأيسر (انظر القسم 2.3). بعد 20 دقيقة من وقت الحضانة باستخدام الإيلاستاز ، قم بمسح محلول الإيلاستاز ، وقم بتغيير المحقنة لشطف جزء الشريان حوالي 10 مرات باستخدام 0.9٪ كلوريد الصوديوم.
- تطبيق 2 أربطة (6-0): الأول 5 مم بعيدة من المشبك القريب والثاني بالقرب فقط ، تحت بضع الشرايين (الشكل 1C). قطع السفينة ~ 3 مم فوق الرباط الأول ومرة أخرى بين الرباط الثاني والمشبك البعيد. احتفظ بهذا الطعم الذاتي في محلول هيبارين (500 U / 100 مل في محلول ملحي بنسبة 0.9٪) حتى إنشاء تمدد الأوعية الدموية التشعب (الشكل 1D). أخيرا ، افتح بعناية أول مقطع قريب ، وقم بقياس تمدد الأوعية الدموية (الطول والعرض والعمق).
- إنشاء تمدد الأوعية الدموية التشعب
- تحضير الجانب الأيسر عن طريق تشريح عضلة القصي الرأسي عن طريق الإنسي لفضح ~ 2 سم من CCA الأيسر. ضع يدوكائين موضعيا على العضلات لتجنب الرمع العضلي.
- ضعي الشريان السباتي تحت كرة شاش ومسحة صغيرة بقطعة من القفازات. تطبيق بعض بابافيرين. HCl موضعيا (40 ملغم / مل ؛ 1: 1 مذاب في 0.9 ٪ ملحي). استمر في العمل تحت الرؤية المجهرية: قم بإعداد حقيبة تمدد الأوعية الدموية وإزالة الغدة الدرقية. قياس كيس تمدد الأوعية الدموية (الطول والعرض والعمق).
- اغسل الجزء المفتوح من CCA الأيمن باستخدام كلوريد الصوديوم الهيباريني وإذا لزم الأمر ، استبدل المقطع ليكون ~ 1 سم للسماح بالتلاعب المجاني بالخياطة. قم بإزالة adventitia بعناية ، وقم بعمل شق طولي ~ 2 مم أفقيا في جذع CCA الأيمن.
- الآن قم بتطبيق مقطعين مؤقتين على CCA الأيسر لتحديد مقطع من ~ 1 سم وإزالة adventitia بينهما. إجراء بضع الشرايين بإبرة 23 G. اغسل الجزء بكلوريد الصوديوم الهيباريني (500 U/100 مل بنسبة 0.9٪ من المياه المالحة). قم بتكبير بضع الشرايين باستخدام مقص مجهري إلى ~ 4-5 مم للسماح بخياطة CCA الأيمن وكيس تمدد الأوعية الدموية (الشكل 1E). قم بري الأوعية أثناء إجراء الخياطة بأكملها وحمايتها بمقايضات صغيرة رطبة.
- أداء مفاغرة مع 9-0 خياطة غير قابلة للامتصاص.
- خياطة الجدار الخلفي القريب من السباتي الأيمن حاد مع 5 غرز ، بدءا من الحافة القريبة من بضع الشرايين على CCA الأيسر. ثم ، قم بخياطة الجانب الخلفي من كيس تمدد الأوعية الدموية باستخدام 4-5 غرز ، بدءا من الحافة البعيدة لاستئصال الشرايين على CCA الأيسر.
- استمر في الجانب الخلفي البعيد على مستوى شق فم السمكة للخياطة مع الجانب الخلفي الرأسي لطعم تمدد الأوعية الدموية ب 3 غرز. خياطة الجانب الأمامي من شق فم السمك مع 3 غرز ، تبدأ لأعلى وتتحرك لأسفل.
- الانتهاء من خياطة الجبهة بين CCA الأيسر والجانب الأمامي من الكسب غير المشروع تمدد الأوعية الدموية و CCA الأيمن مع ~ 6 غرز. قبل الانتهاء من المفاغرة ، شطف الأوعية بمحلول ملحي هيبارين بنسبة 0.9٪ داخل اللمعان.
- قبل إزالة المشبك ، قم بقياس وقت مكافحة التخثر (ACT) مرة أخرى ، وقم بإعطاء جرعة معدلة من الهيبارين بشكل منهجي (الهدف: 2-3 مرات خط الأساس ACT).
- قم بإزالة المقطع الموجود على CCA الأيمن مع وضع بعض الضغط على المفاغرة باستخدام مسحات صغيرة للإرقاء. ثم تابع بإزالة المقطع البعيد من CCA الأيسر. إذا لم يكن هناك نزيف كبير ، فاستمر في إخراج المشبك القريب على CCA الأيسر ، للسماح بتدفق الدم. إذا كان هناك بعض النزيف من المفاغرة ، فقم بتطبيق بعض الضغط باستخدام كرة الشاش والمسحة ؛ انتظر لبضع دقائق. إذا استمر ، فاستبدل المقاطع وقم بإعادة الغرز.
ملاحظة: فقدان الدم لأكثر من 20-30 مل يمكن أن يعرض مرحلة الشفاء للخطر.
- مراقبة المباحات وتوثيقها
- بعد فتح جميع الأوعية ، قم بتوثيق النتائج فوتوغرافيا وقياسها (الشكل 1F والشكل 2A و B).
- تأكد من استعادة التدفق في CCA البعيد من خلال منحنى ضغط الدم الشرياني الغازي (الذي يقاس عند شريان الأذن ، وهو فرع مباشر من الشريان السباتي الخارجي) ، والذي يجب أن يعود أيضا إلى طبيعته.
- قم بإجراء تصوير الأوعية الفلوري عن طريق إدارة 1 مل من الفلوريسين IV ، باستخدام مرشحات 2 bandpass ، وكاميرا فيديو ، وأضواء على الدراجات. انظر المنشورات السابقة للحصول على وصف الإجراء بأكمله18,19.
- اغلاق
- أعد تكييف وسادة الدهون على المفاغرة وخياطتها بخياطة قابلة للامتصاص 4-0. أخيرا خياطة تحت الجلد والجلد مع غرز واحدة باستخدام 4-0 خياطة قابلة للامتصاص.
3. مرحلة ما بعد الجراحة
- في نهاية الجراحة ، توقف عن الأيزوفلوران والتسكين الجهازي دون ارتداد من أجل الحفاظ على التأثير المسكن. تأكد من أن التحكم في منعكس البلع قد عاد قبل إجراء عملية التنبيب القصبي الهوائية.
- إدارة ميلوكسيكام 0.5 مغ/كغ IV لضمان تسكين، والأسبرين (ASS) 10 مغ/كغ IV لمنع الأحداث التخثرية الفورية، وفيتامين B12 100 ميكروغرام SC وكلاموكسيل 20 مغ/كغ IV كعلاج وقائي بالمضادات الحيوية.
- توفير الأوكسجين التكميلي والاحترار حتى يستعيد الأرنب تلقائيا العبء القصي. إجراء تسكين الإنقاذ مع الميثادون إذا لوحظ أي علامة على الألم. إجراء متابعة ما بعد الجراحة والرعاية 4 مرات في اليوم لأول 3 أيام قبل الجراحة ، وفقا للمبادئ التوجيهية لتقييم وإدارة الألم في القوارض والأرانب23,24.
- تأكد من تسكين ما بعد الجراحة مع رقعة الفنتانيل (12 ميكروغرام / ساعة) المطبقة على الأذن الخارجية ، ميلوكسيكام 1x / SC لمدة 3 أيام ، والميثادون كعلاج إنقاذ ، جنبا إلى جنب مع ورقة نقاط لتقييم الألم (ملف تكميلي).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
كان إنشاء جذع وتمدد الأوعية الدموية التشعب ناجحا في جميع الأرانب البيضاء النيوزيلندية ال 5 دون مضاعفات أثناء الجراحة. لم يلاحظ أي وفيات أثناء الجراحة أو خلال فترة المتابعة من 24 ± 2 أيام. عانى أحد الأرانب من مضاعفات ما بعد الجراحة مع متلازمة دهليزية وعمى في الجانب الأيمن. تعافى الحيوان تماما وعفويا بعد 24 ساعة. لم تتداخل هذه المضاعفات مع أنشطتها العادية (الحركات الحرة ، وتناول الماء والطعام ، والتفاعلات مع الحيوانات الأخرى) ولم تتطلب أي علاج محدد. لم يكن هناك تمزق عفوي في تمدد الأوعية الدموية.
كان متوسط مدة الجراحة 221 دقيقة (تتراوح بين 190 و 255 دقيقة). تم تسجيل براءة اختراع لجميع تمدد الأوعية الدموية مباشرة بعد الجراحة ، باستثناء تمدد الأوعية الدموية التشعب الذي أظهر تفاعلا شديدا للأنسجة بسبب حضانة الإيلاستاز وتجلط الدم الفوري. في المتابعة ، تم تأكيد تمدد الأوعية الدموية عن طريق تصوير الأوعية بالرنين المغناطيسي (الشكل 3) والفحص العياني بعد استخراج الأنسجة (الشكل 4). باستثناء تمدد الأوعية الدموية التشعب الذي تخثر بالفعل أثناء الجراحة ، كانت جميع تمدد الأوعية الدموية لا تزال براءة اختراع في نقطة نهاية المتابعة. وأدى ذلك إلى معدل المباح بنسبة 90٪ (9 من أصل 10).
يظهر الفحص العياني وقياس تمدد الأوعية الدموية بعد أخذ العينات نموا لجميع تمدد الأوعية الدموية بمتوسط حجم 5.4 مم × 2.4 مم × 2.3 مم ± 1 مم × 0.6 مم × 0.3 مم عند الإنشاء و 4.5 مم × 3.1 مم × 2.5 مم ± 1.5 مم × 0.9 مم × 0 مم عند حصاد تمدد الأوعية الدموية في الجذع ؛ و 3.4 مم × 2 مم × 2.1 مم ± 0.6 مم × 1 مم × 0.4 مم عند الإنشاء و 3.8 مم × 2.8 مم × 2.6 مم ± 1.2 مم × 0.3 مم × 0.6 مم عند الحصاد لتمدد الأوعية الدموية المتشعب. ومن المثير للاهتمام أن تمدد الأوعية الدموية التشعب نما أكثر من تمدد الأوعية الدموية في الجذع بمتوسط حجم 14.4 مم 3 ± 3.5 مم 3 عند الإنشاء و 28.6 مم 3 ± 16.4 مم 3 عند الاستخراج (نسبة 1.9) مقابل حجم عند إنشاء 30.8 مم 3 ± 15 مم 3 و 34.9 مم 3 ± 24.1 مم 3 عند الاستخراج (نسبة 1.1) لإصدار الجذع.
الشكل 1: خطوات الجراحة. (أ) تطبيق مقطعين مؤقتين على CCA الأيمن: الأول في أصله من الجذع العضدي والثاني ~ 2 سم بعيد إلى الأول. تشير العلامة النجمية إلى توطين بضع الشرايين باستخدام قسطرة وريدية بوزن 22 جم (قسطرة IV). (ب) بعد إدخال القسطرة الوريدية وتثبيتها برباط 4-0 ، اغسل الجزء بكلوريد الصوديوم الهيباريني (500 U / 100 مل من محلول ملحي بنسبة 0.9٪) ، وحقن 0.1-0.2 مل من elastase (100 U مذاب سابقا في 5 مل من مخزن TRIS المؤقت). احتضان لمدة 20 دقيقة (C) تطبيق 2 أربطة غير قابلة للامتصاص (6-0): الأول 5 مم بعيد على المشبك القريب والثاني بالقرب فقط تحت بضع الشرايين. (د) قطع الوعاء ~ 3 مم فوق الأربطة لإنشاء تمدد الأوعية الدموية الجذع والكسب غير المشروع الذاتي لتمدد الأوعية الدموية التشعب. (ه) مفاغرة التقييم القطري المشترك الأيمن والكسب غير المشروع الذاتي على التقييم القطري المشترك الأيسر لإنشاء تمدد الأوعية الدموية المتشعب. (F) النتيجة النهائية مع تمدد الأوعية الدموية الجذع على الجانب الأيمن وتمدد الأوعية الدموية التشعب على الجانب الأيسر. الاختصارات: CCA = الشريان السباتي المشترك; IV = عن طريق الوريد. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: توثيق الصور أثناء العملية الجراحية للنتائج. يمثل الخط الأصفر المنقط خط الوسط مع الإشارة إلى الاتجاهات القحفية والذيلية. (أ) منظر تمدد الأوعية الدموية في الجذع على الجانب الأيمن من الرقبة. يتم سحب SCEM بشكل إنسي بواسطة حلقة السفينة (باللون الأزرق). (ب) منظر تمدد الأوعية الدموية المتشعب على الجانب الأيسر من الرقبة. الاختصارات: SCEM = العضلة القصية الرأسية. SA = تمدد الأوعية الدموية الجذع; JV = الوريد الوداجي; rCCA: الشريان السباتي المشترك الأيمن. lCCA = الشريان السباتي المشترك الأيسر; Tr = القصبة الهوائية; * = فرع متكرر أو حنجرة. BA = تمدد الأوعية الدموية التشعب. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: نتائج تصوير الأوعية بالرنين المغناطيسي في المتابعة. صور من تسلسلات TOF ثلاثية الأبعاد تم الحصول عليها باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي 3 Tesla ، والتي تركز على شرايين الرقبة. (أ) تمدد الأوعية الدموية الجذع (سهم أصفر) على الشريان تحت الترقوة الأيمن. (ب) تمدد الأوعية الدموية التشعب (السهم الأصفر) على التشعب الناتج عن مفاغرة التقييم القطري المشترك الأيمن على السهم الأيسر. الاختصارات: TOF = وقت الرحلة; التصوير بالرنين المغناطيسي = التصوير بالرنين المغناطيسي; CCA = الشريان السباتي الشائع. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 4: توثيق الصور العيانية بعد استخراج الأنسجة. تشير الأخاديد الرئيسية (2 شعبة) على المقطع إلى 1 مم والأخاديد الثانوية بين (قسم واحد) إلى 0.5 مم. (A) تمدد الأوعية الدموية الجذع على الجذع العضدي والشريان تحت الترقوة الأيمن. (ب) تمدد الأوعية الدموية التشعب على التشعب الناتج عن مفاغرة CCA اليمنى على الجانب الأيسر. الاختصارات: SA = تمدد الأوعية الدموية الجذع; BCT = الجذع العضدي. rSC = الشريان تحت الترقوة الأيمن; BA = تمدد الأوعية الدموية التشعب; CCA = الشريان السباتي الشائع; rCCA = التقييم القطري المشترك الصحيح; lCCA = CCA الأيسر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: النتائج النسيجية لتمدد الأوعية الدموية الجذعية والتشعب. عينة ملطخة بالهيماتوكسيلين-إيوسين (تكبير 2 أضعاف). (أ) نظرة عامة مجهرية لتمدد الأوعية الدموية في الجذع (أ) مع الجذع العضدي (ب) والشريان تحت الترقوة الأيمن (ج). (*) يشير إلى اتجاه تدفق الدم. (ب) نظرة عامة مجهرية على تمدد الأوعية الدموية المتشعب (أ) مع التقييم القطري المشترك الأيسر القريب (ب)، والتقييم القطري المشترك الأيسر البعيد (ج)، والتقييم القطري المشترك لليمين البعيد (د). (*) يشير إلى اتجاه تدفق الدم. في الأجزاء الداخلية في (A) و (B) ، I) يمثل الغلالة الداخلية لجدار تمدد الأوعية الدموية ، II) وسائط السترة ، و III) السترة الخارجية (تكبير 20 ضعفا). الاختصارات: CCA = الشريان السباتي الشائع. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
ملف تكميلي. يرجى النقر هنا لتنزيل هذا الملف.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
تتضمن التقنية الأكثر شيوعا لإنشاء تمدد الأوعية الدموية إنشاء تمدد الأوعية الدموية في الجذع في أصل CCA الصحيح ، إما من خلال طريقة مفتوحة أو داخل الأوعية الدموية. تم التحقق من صحة النموذج ليكون تمدد الأوعية الدموية غير المتنامي المستقر الذي لا يزال مفتوحا مع مرور الوقت20,21. تتضمن التقنية الثانية الممكنة إنشاء الجراحة المجهرية لتمدد الأوعية الدموية التشعب الشرياني عن طريق مفاغرة CCA الأيمن على اليسار وخياطة كيس تمدد الأوعية الدموية على التشعب14،22،23. على الرغم من أن كلتا الطريقتين أظهرتا ملاءمة لاختبار الأجهزة داخل الأوعية الدموية ودراسة الفيزيولوجيا المرضية ، إلا أن مورفولوجيا تمدد الأوعية الدموية وبالتالي ، فإن قوى ديناميكا الدم وخصائص التدفق المعنية تختلف اختلافا كبيرا. بالنظر إلى أن النماذج الحالية تسمح بإنشاء نوع واحد فقط من تمدد الأوعية الدموية لكل ، فإن المقارنة المباشرة بين المسار الطبيعي لتمدد الأوعية الدموية من نوع التشعب مع تلك الموجودة في نوع الجذع أمر صعب حاليا.
في الواقع ، لا يمكن دائما التحكم في الاختلافات الفسيولوجية بين الحيوانات (مثل ضغط الدم أو محتوى الكولاجين الدقيق لجدار الأوعية) بشكل كامل في بيئة تجريبية ويمكن أن تؤثر على بيولوجيا تمدد الأوعية الدموية والمسار الطبيعي. توضح هذه الدراسة جدوى إنشاء نموذج أرنب مع كل من الجذع والتشعب الديناميكي الدموي وظروف الجدار المنحط في نفس الحيوان (أو في واحد). أسفرت هذه التقنية عن تمدد الأوعية الدموية القابل للتكرار مع انخفاض معدلات المراضة والوفيات وارتفاع معدل المباح (90٪). يبقى العيب الرئيسي لهذه الطريقة هو نفسه بالنسبة لإنشاء الجذع الكلاسيكي أو نماذج التشعب نفسها - الحاجة إلى معدات مختبرية متطورة ومهارات جراحية مجهرية محددة.
تم تحديد خطوتين بشكل خاص لتكون حاسمة خلال هذه الجراحة: الأولى هي تشريح وتعرض CCA الصحيح حتى أصله في الجذع العضدي. قد تكون الهياكل الحيوية التالية معرضة للخطر بشكل خاص خلال هذا النهج: القصبة الهوائية والوريد الوداجي والعصب الحنجري. نظرا لأن التلاعب بالقصبة الهوائية يمكن أن يضعف التنفس ، فإن التنبيب السابق يضمن المباح في الشعب الهوائية. علاوة على ذلك ، فإن الجراحة طويلة وعلى مقربة من الهياكل الحيوية ، فإن المراقبة الكاملة مفيدة للتعرف على الفور على أي انحرافات فسيولوجية. يجب على الجراح أيضا الانتباه لتجنب الضغط المباشر أو الجر الشديد على القصبة الهوائية نفسها. يمتد الوريد الوداجي مباشرة بجوار الشريان السباتي ، وفي بعض الحالات ، يكون ملتصقا به. هناك حاجة إلى رعاية قصوى لتجنب أي آفة. نوصي بحماية الوريد وإبقائه رطبا عن طريق تطبيق مسحة مبللة.
أخيرا ، وصفت الدراسات السابقة بالفعل أهمية الحفاظ على أعصاب الحنجرة. أي آفة على هذه الأعصاب من شأنها أن تؤدي بعد العملية الجراحية إلى ظهور ستريدور مع ضعف التنفس على التوالي واحتمال كبير لوفاة الحيوان. لمنع الآفة علاجية المنشأ للأعصاب ، يجب أن يتجنب تشريح CCA جر الأنسجة التي تدور حول الشريان. نوصي باستخدام المقص لقطع الأنسجة الملتصقة بدلا من تشتيت انتباهها. يجب أيضا تحديد الأعصاب في أقرب وقت ممكن بعد تراجع العضلات لإبقائها تحت السيطرة البصرية أثناء الجراحة. الخطوة الحاسمة الثانية هي إنشاء مفاغرة دقيقة عديمة التوتر مع تمدد الأوعية الدموية المهضوم بالإيلاستاز. يقدم تمدد الأوعية الدموية هذا انحطاطا عاليا في بنية جداره ، مما يعوق التلاعب بالأنسجة. يتطلب مهارات جيدة في الجراحة المجهرية ، ومن المتوقع وجود منحنى تعلم.
علاوة على ذلك ، نوصي باختيار الأرانب التي تزن 4.0 كجم على الأقل (متوسط العمر 25 (±5) أسابيع) لضمان الحجم الصحيح لأوعية الرقبة. في نموذج تمدد الأوعية الدموية الكلاسيكي أحادي الجذع ، كان التعقيد الرئيسي المبلغ عنه في الأدبيات هو نخر القصبة الهوائية بعد تطبيق elastase بسبب شرايين القصبة الهوائية المريئية الناشئة عن CCA الأيمن. وقد تم بالفعل اقتراح العديد من التعديلات على التقنيات لتجنب المشكلة13،24،25،26. يسمح هذا النهج بسهولة تحديد هذه الفروع وتخثرها قبل تطبيق elastase لتجنب أي تدفق لمحلول elastase ومضاعفات مماثلة.
يتكون نظام منع التخثر المطبق أثناء الجراحة من تطبيق الهيبارين قبل تطبيق المشبك الأول في CCA الأيمن وقبل إزالة المشبك وكذلك استعادة الدورة الدموية إلى CCA الأيسر. هذا يمكن أن يمنع بشكل فعال تكوين الجلطة بسبب انقطاع التدفق المؤقت والتلاعب بالأوعية. بالإضافة إلى ذلك ، يتم إعطاء جرعة فريدة من الأسبرين (10 مجم / كجم IV) مباشرة بعد نهاية الجراحة لمنع تكوين الجلطة بسبب التأثير التخثري لمادة الخياطة والإيلاستيز. يسمح هذا البروتوكول بالتحكم في الأحداث الخثارية المنشأ وضمان تمدد الأوعية الدموية دون زيادة مضاعفات النزيف.
نموذج الجذع هو نموذج أرنب تمدد الأوعية الدموية العجزي الأكثر شيوعا وقد تم استخدامه بالفعل عدة مرات للدراسات الانتقالية للعلاجات داخل الأوعية الدموية. كما تم وصف نموذج التشعب بشكل جيد في الأدبيات ومناسب لدراسة الفيزيولوجيا المرضية تمدد الأوعية الدموية واختبار استراتيجيات علاجية جديدة. ومع ذلك ، يظهر كلا النموذجين مورفولوجيا متميزة ، مما يشير إلى خصائص ديناميكية دموية متميزة. من المعروف أن تمدد الأوعية الدموية يظهر بشكل تفضيلي عند التشعب وأن النمو يعتمد على إجهاد قص الجدار27,28. كما أظهرت المنشورات السابقة ارتفاع الجلطة التلقائية في تمدد الأوعية الدموية الجانبي الذي تم إنشاؤه جراحيا مقارنة بتلك المتشعبة29 ومعدل انسداد أعلى لتمدد الأوعية الدموية الجذعية بعد تحويل التدفق مقارنة بالنماذج الأخرى الأكثر تعقيدا8 ؛ ومع ذلك ، كانت المقارنة دائما بين حيوانين مختلفين.
في هذه الدراسة ، تم إنشاء تمدد الأوعية الدموية القياسي بقطر 2-4 مم ، كما هو موضح سابقا 14،22،29،30،31،32،33،34،35،36. كنا نهدف إلى إنشاء تمدد الأوعية الدموية الجذع مع حجم مماثل لتمدد الأوعية الدموية التشعب للمقارنة. وبالتالي ، فإن الحجم الحالي أصغر إلى حد ما كما تم الإبلاغ عنه5،8،10،11،13،21. ومع ذلك ، أظهر كل من تمدد الأوعية الدموية ميلا للنمو في متابعة شهر 1. وبالتالي ، فإن فترة المتابعة الأطول قد تحفز تكوين تمدد الأوعية الدموية بأحجام أكبر ، مما يسمح بمقارنة أفضل على المدى الطويل مع تمدد الأوعية الدموية لدى البشر. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر هذه النتائج النسيجية ، القائمة على تلطيخ الهيماتوكسيلين - إيوسين ، جدار تمدد الأوعية الدموية الخلوي ووجود خلايا العضلات الملساء في نمط خطي أو غير منظم ، بالإضافة إلى عدم تنظيم الألياف المرنة (الشكل 5). ترتبط هذه النتائج بالنتائج الحالية التي تظهر أوجه التشابه النسيجي بين تمدد الأوعية الدموية الناجم عن الإيلاستاز الأرنب وتمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة لدى البشر11،32،37،38،39،40،41.
تظهر النتائج الجدوى التقنية لإنشاء تمدد الأوعية الدموية الجذعية والتشعب باستخدام نفس النهج الجراحي. الحد من هذه الدراسة هو صغر حجم العينة، والذي لا يسمح بالتحليل الإحصائي أو المقارنة الحقيقية للاختلافات النسيجية بين تمدد الأوعية الدموية الجذعية والتشعب. ومع ذلك ، يوفر هذا النموذج إمكانية التحقيق في الاختلافات بين كل من تمدد الأوعية الدموية من حيث النمو والتمزق والانسداد التلقائي والتغيرات النسيجية في التجارب المستقبلية مع زيادة أحجام العينات ووقت المتابعة المختلفة ، لتحديد مزايا وخصائص كلا النوعين من تمدد الأوعية الدموية بدقة. بالإضافة إلى ذلك ، يسمح هذا النموذج الجراحي الجديد بتطبيق الأجهزة داخل الأوعية الدموية في تكوينين متميزين وظروف تدفق في واحد ، وكذلك أثناء إجراء فريد من نوعه. هذا يقلل من عدد الحيوانات اللازمة وربما يزيد من كفاءة التجارب قبل السريرية.
في الختام ، تصف هذه الدراسة طريقة قابلة للتكرار لإنشاء تمدد الأوعية الدموية 2 مع ظروف تدفق متميزة وجدران منحطة للغاية داخل واحد. يسمح النموذج المقترح بإجراء مقارنة مباشرة للمسار الطبيعي وآثار العلاجات داخل الأوعية الدموية لتمدد الأوعية الدموية العجزية فيما يتعلق بدور ديناميكا الدم . وأخيرا ، فإنه يوفر نموذجا فعالا يساهم في تقليل الحيوانات المستخدمة والتكاليف التجريبية الإجمالية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ويعلن صاحبا البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
Acknowledgments
يشكر المؤلفون البروفيسور هانز رودولف فيدمر والدكتور لوكا ريموندا والبروفيسور خافيير فاندينو على دعمهم العلمي ومساهمتهم التقنية في هذا العمل. شكر خاص لأولجيكا بيسلاك على مشورتها أثناء الإجراءات وكاي نيتلبيك على مساعدته. علاوة على ذلك ، نشكر دانييلا كاسوني DVM ، دكتوراه وطبيب بيطري. لويزانا غارسيا ، الأستاذة الدكتورة أليساندرا بيرجادانو ، والدكتورة كارلوتا ديتوتو لدعمهم البيطري المتفاني.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP292ZH | |
| 4-0 resorbable suture | Ethicon Inc., USA | VCP304H | |
| 6-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | C0766070 | |
| 9-0 non absorbable suture | B. Braun, Germany | G1111140 | |
| Adrenaline | Amino AG | 1445419 | any generic |
| Amiodarone | Helvepharm AG | 5078567 | any generic |
| Anesthesia machine | Dräger | any other | |
| Aspirin | Sanofi-Aventis (Suisse) SA | 622693 | any generic |
| Atropine | Labatec Pharma SA | 6577083 | any generic |
| Bandpass filter blue | Thorlabs | FD1B | any other |
| Bandpass filter green | Thorlabs | FGV9 | any other |
| Biemer vessel clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FD560R | any other |
| Bipolar forceps | any other | ||
| Bispectral index (neonatal) | any other | ||
| Blood pressure cuff (neonatal) | any other | ||
| Bycilces spotlight | any other | ||
| Clamoxyl | GlaxoSmithKline AG | 758808 | any generic |
| Dexmedetomidine | Ever Pharma | 136740-1 | any generic |
| Elastase | Sigma Aldrich | E7885 | |
| Electrocardiogram electrodes | |||
| Ephedrine | Amino AG | 1435734 | |
| Esmolol | OrPha Swiss GmbH | 3284044 | |
| Fentanyl (intravenous use) | Janssen-Cilag AG | 98683 | |
| Fentanyl (transdermal) | Mepha Pharma AG | 4008286 | |
| Fluoresceine | Curatis AG | 5030376 | |
| Fragmin | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 1906725 | |
| Heating pad or heating forced-air warming system | |||
| Isotonic sodium chloride solution (0.9%) | Fresenius KABI | 336769 | |
| Ketamine | Pfizer PFE Switzerland GmbH | 342261 | |
| lid retractor | Approach | ||
| Lidocaine | Streuli Pharma AG | 747466 | |
| Longuettes | |||
| Metacam | Boehringer Ingelheim | P7626406 | Medication |
| Methadone | Streuli Pharma AG | 1084546 | Sedaton |
| Micro-forceps curved | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-015-15 | |
| Micro-forceps straight 2x | Ulrich Swiss, Switzerland | U52-010-15 | |
| Microscissors | Ulrich Swiss , Switzerland | U52-327-15 | |
| Midazolam | Accord Healthcare AG | 7752484 | |
| Needle 23 G | arteriotomy | ||
| Needle holder | |||
| O2-Face mask | |||
| Operation microscope | Wild Heerbrugg | ||
| Papaverin | Bichsel | topical application | |
| Povidone iodine | Mundipharma Medical Company | any generic | |
| Prilocaine-lidocaine creme | Emla | ||
| Propofol | B. Braun Medical AG, Switzerland | General anesthesia | |
| Pulse oxymeter | |||
| Rectal temperature probe (neonatal) | |||
| Ringer Lactate | Bioren Sintetica SA | Infusion | |
| Ropivacain | Aspen Pharma Schweiz GmbH | 1882249 | Local anesthesia |
| Scalpell | Swann-Morton | 210 | |
| Small animal shaver | |||
| Soft tissue forceps | |||
| Soft tissue spreader | |||
| Stainless steel sponge bowls | |||
| Sterile micro swabs | |||
| Stethoscope | |||
| Surgery drape | |||
| Surgical scissors | |||
| Syringes 1 mL, 2 mL, and 5 mL | |||
| Tris-Buffer | Sigma Aldrich | 93302 | Elastase solution |
| Vascular clip applicator | B. Braun, Germany | FT495T | |
| Vein and arterial catheter 22 G | |||
| vessel loop | Approach | ||
| video camera or smartphone | |||
| Vitarubin | Streuli Pharma AG | 6847559 | |
| Yasargil titan standard clip (2x) | B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland | FT242T |
References
- Grasso, G., Alafaci, C., Macdonald, R. L. Management of aneurysmal subarachnoid hemorrhage: State of the art and future perspectives. Surgical Neurology International. 8, 11 (2017).
- Raymond, J., et al. Long-term angiographic recurrences after selective endovascular treatment of aneurysms with detachable coils. Stroke. 34 (6), 1398-1403 (2003).
- Marbacher, S., Niemela, M., Hernesniemi, J., Frosen, J. Recurrence of endovascularly and microsurgically treated intracranial aneurysms-review of the putative role of aneurysm wall biology. Neurosurgical Review. 42 (1), 49-58 (2019).
- Thompson, J. W., et al. In vivo cerebral aneurysm models. Neurosurgical Focus. 47 (1), 20 (2019).
- Bouzeghrane, F., et al. In vivo experimental intracranial aneurysm models: a systematic review. American Journal of Neuroradiology. 31 (3), 418-423 (2010).
- Strange, F., Gruter, B. E., Fandino, J., Marbacher, S. Preclinical intracranial aneurysm models: a systematic review. Brain Sciences. 10 (3), 134 (2020).
- Marbacher, S., Strange, F., Frosen, J., Fandino, J. Preclinical extracranial aneurysm models for the study and treatment of brain aneurysms: A systematic review. Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 40 (5), 922-938 (2020).
- Fahed, R., et al. Testing flow diversion in animal models: a systematic review. Neuroradiology. 58 (4), 375-382 (2016).
- Zeng, Z., et al. Hemodynamics and anatomy of elastase-induced rabbit aneurysm models: similarity to human cerebral aneurysms. American Journal of Neuroradiology. 32 (3), 595-601 (2011).
- Ding, Y. H., et al. Long-term patency of elastase-induced aneurysm model in rabbits. American Journal of Neuroradiology. 27 (1), 139-141 (2006).
- Short, J. G., et al. Elastase-induced saccular aneurysms in rabbits: comparison of geometric features with those of human aneurysms. American Journal of Neuroradiology. 22 (10), 1833-1837 (2001).
- Andereggen, L., et al. Three-dimensional visualization of aneurysm wall calcification by cerebral angiography: Technical case report. Journal of Clinical Neuroscience. 73, 290-293 (2020).
- Hoh, B. L., Rabinov, J. D., Pryor, J. C., Ogilvy, C. S. A modified technique for using elastase to create saccular aneurysms in animals that histologically and hemodynamically resemble aneurysms in human. Acta Neurochirurgica. 146 (7), 705-711 (2004).
- Wanderer, S., et al. Arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (159), e61157 (2020).
- Percie du Sert, N., et al. Reporting animal research: Explanation and elaboration for the ARRIVE guidelines 2.0. PLoS Biology. 18 (7), 3000411 (2020).
- Prescott, M. J., Lidster, K. Improving quality of science through better animal welfare: the NC3Rs strategy. Lab Animal. 46 (4), 152-156 (2017).
- Portier, K., Ida, K. K. The ASA Physical Status Classification: What is the evidence for recommending its use in veterinary anesthesia?-A systematic review. Frontiers in Veterinary Science. 5, 204 (2018).
- Gruter, B. E., et al. Fluorescence video angiography for evaluation of dynamic perfusion status in an aneurysm preclinical experimental setting. Operative Neurosurgery. 17 (4), 432-438 (2019).
- Strange, F., et al. Fluorescence angiography for evaluation of aneurysm perfusion and parent artery patency in rat and rabbit aneurysm models. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (149), e59782 (2019).
- Altes, T. A., et al. 1999 ARRS Executive Council Award. Creation of saccular aneurysms in the rabbit: a model suitable for testing endovascular devices. American Journal of Roentgenology. 174 (2), 349-354 (2000).
- Brinjikji, W., Ding, Y. H., Kallmes, D. F., Kadirvel, R. From bench to bedside: utility of the rabbit elastase aneurysm model in preclinical studies of intracranial aneurysm treatment. Journal of NeuroInterventional Surgery. 8 (5), 521-525 (2016).
- Sherif, C., Marbacher, S., Erhardt, S., Fandino, J. Improved microsurgical creation of venous pouch arterial bifurcation aneurysms in rabbits. American Journal of Neuroradiology. 32 (1), 165-169 (2011).
- Bavinzski, G., et al. Experimental bifurcation aneurysm: a model for in vivo evaluation of endovascular techniques. Minimally Invasive Neurosurgery. 41 (3), 129-132 (1998).
- Lewis, D. A., et al. Morbidity and mortality associated with creation of elastase-induced saccular aneurysms in a rabbit model. American Journal of Neuroradiology. 30 (1), 91-94 (2009).
- Wang, K., et al. Neck injury is critical to elastase-induced aneurysm model. American Journal of Neuroradiology. 30 (9), 1685-1687 (2009).
- Cesar, L., et al. Neurological deficits associated with the elastase-induced aneurysm model in rabbits. Neurological Research. 31 (4), 414-419 (2009).
- Aoki, T., Nishimura, M. The development and the use of experimental animal models to study the underlying mechanisms of CA formation. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 535921 (2011).
- Frosen, J., Cebral, J., Robertson, A. M., Aoki, T. Flow-induced, inflammation-mediated arterial wall remodeling in the formation and progression of intracranial aneurysms. Neurosurgical Focus. 47 (1), 21 (2019).
- Gruter, B. E., et al. Comparison of aneurysm patency and mural inflammation in an arterial rabbit sidewall and bifurcation aneurysm model under consideration of different wall conditions. Brain Sciences. 10 (4), 197 (2020).
- Marbacher, S., et al. The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (92), e51071 (2014).
- Marbacher, S., et al. Complex bilobular, bisaccular, and broad-neck microsurgical aneurysm formation in the rabbit bifurcation model for the study of upcoming endovascular techniques. American Journal of Neuroradiology. 32 (4), 772-777 (2011).
- Marbacher, S., et al. Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model. Stroke. 45 (1), 248-254 (2014).
- Gruter, B. E., et al. Testing bioresorbable stent feasibility in a rat aneurysm model. Journal of Neurointerventional Surgery. 11 (10), 1050-1054 (2019).
- Nevzati, E., et al. Biodegradable magnesium stent treatment of saccular aneurysms in a rat model - Introduction of the surgical technique. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e56359 (2017).
- Gruter, B. E., et al. Patterns of neointima formation after coil or stent treatment in a rat saccular sidewall aneurysm model. Stroke. 52 (3), 1043-1052 (2021).
- Wanderer, S., et al. Aspirin treatment prevents inflammation in experimental bifurcation aneurysms in New Zealand White rabbits. Journal of NeuroInterventional Surgery. , (2021).
- Lyu, Y., et al. An effective and simple way to establish eastase-induced middle carotid artery fusiform aneurysms in rabbits. Biomed Research International. 2020 (10), 1-12 (2020).
- Wang, S., et al. Rabbit aneurysm models mimic histologic wall types identified in human intracranial aneurysms. Journal of NeuroInterventional Surgery. 10 (4), 411-415 (2018).
- Kang, W., et al. A modified technique improved histology similarity to human intracranial aneurysm in rabbit aneurysm model. Neuroradiology Journal. 23 (5), 616-621 (2010).
- Frosen, J., et al. Remodeling of saccular cerebral artery aneurysm wall is associated with rupture: histological analysis of 24 unruptured and 42 ruptured cases. Stroke. 35 (10), 2287-2293 (2004).
- Frosen, J., et al. Growth factor receptor expression and remodeling of saccular cerebral artery aneurysm walls: implications for biological therapy preventing rupture. Neurosurgery. 58 (3), 534-541 (2006).
