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चूहों में श्रमणीय हीट स्ट्रोक का एक पूर्व नैदानिक मॉडल

Published: July 1, 2021 doi: 10.3791/62738
Automatic Translation
1, 1, 1, 1,2
1Department of Applied Physiology and Kinesiology, College of Health and Human Performance, University of Florida, 2Department of Nutrition and Integrative Physiology, College of Health and Human Sciences, Florida State University

Summary

प्रोटोकॉल चूहों में विद्युत सदमे जैसे प्रतिकूल बाहरी उत्तेजनाओं से मुक्त चूहों में एक मानकीकृत, दोहराने योग्य, पूर्व नैदानिक मॉडल के विकास का वर्णन करता है। मॉडल मशीनी, निवारक और चिकित्सीय अध्ययन के लिए एक मंच प्रदान करता है।

Abstract

हीट स्ट्रोक गर्मी से संबंधित बीमारियों की सबसे गंभीर अभिव्यक्ति है। क्लासिक हीट स्ट्रोक (सीएचएस), जिसे निष्क्रिय हीट स्ट्रोक भी कहा जाता है, आराम से होता है, जबकि शारीरिक गतिविधि के दौरान श्रमशील हीट स्ट्रोक (ईएचएस) होता है। ईएचएस ईएचएस एटियोलॉजी, नैदानिक प्रस्तुति और बहु-अंग रोग की अगली कड़ी में सीएचएस से अलग है। हाल ही में जब तक, CHS के केवल मॉडल अच्छी तरह से स्थापित किया गया है । इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य ईएचएस के एक परिष्कृत प्रीक्लिनिकल माउस मॉडल के लिए दिशानिर्देश प्रदान करना है जो एनेस्थीसिया, संयम, गुदा जांच या इलेक्ट्रिक शॉक के उपयोग जैसे प्रमुख सीमित कारकों से मुक्त है। इस मॉडल में कोर तापमान (टीसी) टेलीमेट्रिक जांच के साथ उपकरण वाले पुरुष और महिला C57Bl/6 चूहों का उपयोग किया गया था। रनिंग मोड के साथ परिचित होने के लिए, चूहों को स्वैच्छिक और जबरन चलने वाले पहियों दोनों का उपयोग करके 3 सप्ताह के प्रशिक्षण से गुजरना पड़ता है। इसके बाद, चूहों 37.5 डिग्री सेल्सियस और 40%-50% सापेक्ष आर्द्रता (आरएच) पर सेट जलवायु कक्ष के अंदर एक मजबूर पहिया पर चलाने के लक्षण सीमा प्रदर्शित करने तक (उदाहरण के लिए, चेतना की हानि) 42.1-42.5 डिग्री सेल्सियस की टीसी पर, हालांकि उपयुक्त परिणाम कक्ष तापमान पर 34.5-39.5 डिग्री सेल्सियस और आर्द्रता 30%-90% के बीच प्राप्त किया जा सकता है। वांछित गंभीरता के आधार पर, चूहों को परिवेश के तापमान में वसूली के लिए तुरंत कक्ष से हटा दिया जाता है या लंबी अवधि के लिए गर्म कक्ष में रहते हैं, एक अधिक गंभीर जोखिम और मृत्यु की उच्च घटना को प्रेरित करते हैं। परिणामों की तुलना नकली-मिलान व्यायाम नियंत्रण (EXC) और/या भोले नियंत्रण (नेकां) से की जाती है । मॉडल मानव ईएचएस में देखे गए कई रोगविज्ञानी परिणामों को प्रतिबिंबित करता है, जिसमें चेतना की हानि, गंभीर हाइपरथर्मिया, बहु-अंग क्षति के साथ-साथ भड़काऊ साइटोकिन रिलीज और प्रतिरक्षा प्रणाली की तीव्र चरण प्रतिक्रियाएं शामिल हैं। यह मॉडल परिकल्पना-संचालित अनुसंधान के लिए निवारक और चिकित्सीय रणनीतियों का परीक्षण करने के लिए आदर्श है जो ईएचएस की शुरुआत में देरी कर सकता है या बहु-अंग क्षति को कम कर सकता है जो इस अभिव्यक्ति की विशेषता है।

Introduction

हीट स्ट्रोक की विशेषता केंद्रीय तंत्रिका तंत्र की शिथिलता और उसके बाद के अंगों को हाइपरथर्मिक विषयों में नुकसान होता है1. हीटस्ट्रोक के दो अभिव्यक्तियां हैं। क्लासिक हीट स्ट्रोक (CHS) गर्मी तरंगों के दौरान ज्यादातर बुजुर्ग आबादी को प्रभावित करता है या गर्म गर्मी के दिनों के दौरान धूप में उजागर वाहनों में छोड़ दिया बच्चों1। श्रमशील हीट स्ट्रोक (ईएचएस) तब होता है जब शारीरिक श्रम के दौरान पर्याप्त रूप से थर्मोरेगुलेट करने में असमर्थता होती है, आमतौर पर, लेकिन हमेशा नहीं, उच्च परिवेश के तापमान के तहत जिसके परिणामस्वरूप न्यूरोलॉजिकल लक्षण, हाइपरथर्मिया, और बाद में बहु-अंग रोग और क्षति2। ईएचएस मनोरंजन और कुलीन एथलीटों के साथ - साथ सैन्य कर्मियों और मजदूरों के साथ और बिना सहवर्ती निर्जलीकरण3,4में होता है । दरअसल, ईएचएस शारीरिक गतिविधि5के दौरान एथलीटों में मृत्यु का तीसरा प्रमुख कारण है । मनुष्यों में ईएचएस का अध्ययन करना अत्यंत चुनौतीपूर्ण है क्योंकि यह प्रकरण घातक हो सकता है या6, 7 तरहके नकारात्मक स्वास्थ्य परिणामों का कारणबन सकताहै । इसलिए, ईएचएस का एक विश्वसनीय प्रीक्लिनिकल मॉडल मानव ईएचएस पीड़ितों में पूर्वव्यापी और साहचर्य नैदानिक टिप्पणियों की सीमाओं को दूर करने के लिए एक मूल्यवान उपकरण के रूप में काम कर सकता है। कृंतक और सूअरों में सीएसएस के पूर्व नैदानिक मॉडलों कोअच्छी तरह से 8,9,10की विशेषता है। हालांकि, सीएचएस के प्रीक्लिनिकल मॉडल थर्मोरेगुलेटरी प्रोफाइल और जन्मजात प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया11पर शारीरिक व्यायाम के अद्वितीय प्रभावों के कारण सीधे ईएचएस रोगविज्ञान में अनुवाद नहीं करते हैं। इसके अलावा, कृंतक में प्रीक्लिनिकल ईएचएस मॉडल विकसित करने के पिछले प्रयासों में महत्वपूर्ण प्रतिबंध लगाए गए हैं, जिनमें बिजली के झटके से प्रेरित तनाव उत्तेजनाएं, गुदा जांच में शामिल होना, और उच्चमृत्यु दर12, 13,14,15,16 के साथ पूर्वनिर्धारित अधिकतम कोर शरीर के तापमान शामिल हैं। जो वर्तमान महामारी विज्ञान के आंकड़ों से मेल नहीं खाते हैं। ये महत्वपूर्ण सीमाओं का प्रतिनिधित्व करते हैं जो डेटा व्याख्या को भ्रमित कर सकते हैं और अविश्वसनीय बायोमार्कर इंडेक्स प्रदान कर सकते हैं। इसलिए, प्रोटोकॉल का उद्देश्य चूहों में ईएचएस के मानकीकृत, अत्यधिक दोहराने योग्य और अनुवादयोग्य प्रीक्लिनिकल मॉडल के चरणों की विशेषता और वर्णन करना है जो ऊपर उल्लिखित सीमाओं से काफी हद तक मुक्त है। मॉडल है कि मध्यम से घातक हीट स्ट्रोक के लिए वर्गीकृत शारीरिक परिणामों में परिणाम कर सकते है के लिए समायोजन वर्णित हैं । लेखकों के ज्ञान के लिए, यह ऐसी विशेषताओं के साथ ईएचएस का एकमात्र प्रीक्लिनिकल मॉडल है, जिससे एक परिकल्पना-चालित तरीके से प्रासंगिक ईएचएस अनुसंधान को आगे बढ़ाना संभव हो जाता है11,17,18।

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Protocol

सभी प्रक्रियाओं की समीक्षा की गई है और फ्लोरिडा IACUC विश्वविद्यालय द्वारा अनुमोदित किया गया है । C57BL/6J पुरुष या महिला चूहों, ~ 4 महीने पुराने, 27-34 ग्राम और 20-25 ग्राम की एक सीमा के भीतर वजन, क्रमशः, अध्ययन के लिए उपयोग किया जाता है ।

1. टेलीमेट्रिक तापमान निगरानी प्रणाली का सर्जिकल प्रत्यारोपण

  1. विक्रेता से आगमन पर, जानवरों को परिवहन के तनाव को कम करने के लिए सर्जरी से कम से कम 1 सप्ताह पहले विवरियम में आराम करने की अनुमति दें।
  2. समूह घर चूहों (स्थानीय IACUC दिशा निर्देशों के तहत पिंजरे प्रति अधिकतम 5) तापमान टेलीमेट्रिक डिवाइस प्रत्यारोपण के लिए सर्जरी के दिन तक । उन्हें मानक 7.25 में घर " (डब्ल्यू) x 11.75 " (एल) x 5 " (एच) कॉर्नकोब बिस्तर वाले पिंजरों। 12 x 12 प्रकाश चक्र पर प्रकाश चक्र बनाए रखें (पर: 7 AM; बंद: 7 बजे) । आवास का तापमान 20-22 डिग्री सेल्सियस और सापेक्ष आर्द्रता (आरएच) को 30%-60% पर बनाए रखें। ईएचएस प्रोटोकॉल तक मानक चाउ आहार और पानी विज्ञापन लिबिटम प्रदान करें।
    नोट: व्यक्तिगत आवास के लिए तर्क पुरुष C57bl/6J चूहों में लगातार लड़ने की चोट से बचने के लिए और प्रत्येक माउस के लिए सहज पहिया चलने के लिए पर्याप्त अवसर प्रदान करने के लिए है ।
  3. टेलीमेट्री उपकरणों के प्लेसमेंट के लिए, एक इंडक्शन चैंबर में आइसोफ्लोरेन (4%, 0.4-0.6 एल/मिनट ऑफ ओ2 फ्लो) के साथ माउस को एनेस्थेटाइज करें । फिर, माउस को नाक शंकु (1.5%, 0.6 एल/मिनट) के माध्यम से निरंतर संज्ञाहरण के नीचे रखें।
  4. सर्जरी के दौरान जानवर की आंखों को नुकसान या चोट से बचाने के लिए आंखों के ल्यूब, जैसे पशु चिकित्सक मरहम का उपयोग करें।
  5. शल्य चिकित्सा साइट तैयार करने के लिए, छोटे जानवर बाल कतरनी के साथ निचले पेट दाढ़ी या एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध बाल रिमूवर का उपयोग करें । इस समय के दौरान चमड़े के नीचे बुप्रेनोरफिन (0.1 मिलीग्राम/किलो) की पहली खुराक प्रशासित करें।
  6. पोविडोन-आयोडीन (या इसी तरह के रोगाणुयुक्त स्क्रब) के तीन वॉश के साथ क्षेत्र को स्क्रब करें, इसके बाद 70% आइसोप्रोपिल अल्कोहल कुल्ला (या बाँझ खारा स्थानीय पशु चिकित्सा आवश्यकताओं के आधार पर)। फिर, माउस को सर्जिकल क्षेत्र में स्थानांतरित करें।
  7. माउस पर सर्जिकल साइट को अलग करने के लिए एक चिपकने वाला कपड़ा का उपयोग करें। बाँझ उपकरणों और aseptic तकनीक का उपयोग करना, लाइना अल्बा के साथ मिडलाइन पर ~ 1 सेमी चीरा बनाओ, कॉस्टल मार्जिन से लगभग 0.5 सेमी। फिर, त्वचा को मांसपेशियों की परत से अलग करें और लिना अल्बा पर थोड़ा छोटा चीरा बनाएं, सावधान करें कि आंत या आंतरिक अंगों को नुकसान न पहुंचाएं।
  8. एक बार जब मांसपेशी परत खुली हो, तो बाँझ टेलीमीटर (लघु पुन: प्रयोज्य बैटरी मुक्त रेडियोटेलीमेट्री डिवाइस; 16.5 x 6.5 मिमी) को कौडल धमनियों और नसों के सामने इंट्रापेरिटोनियल गुहा में रखें और पाचन अंगों को पृष्ठीय रखें ताकि इसे स्वतंत्र रूप से तैरने की अनुमति मिल सके।
    नोट: सभी टेलीमीटर साबुन और पानी से साफ किए जाते हैं, अच्छी तरह से कुल्ला और गैस उपयोगों के बीच एथिलीन ऑक्साइड के साथ निष्फल होती है। यदि गैस नसबंदी उपलब्ध नहीं है, तो नसबंदी समाधानों में विसर्जन (कमजोर पड़ने और विसर्जन समय के लिए निर्माता की सिफारिश के बाद) को टेलीमीटर को कीटाणुरहित और निष्फल करने के लिए स्वीकार किया जाता है।
  9. एक बाँझ 5-0 अवशोषित सीवन के साथ पेट खोलने को बंद करें, और 5-0 प्रोलाइन सीवन के साथ एक साधारण बाधित सिलाई का उपयोग करके त्वचा को बंद करें।
    नोट: टेलीमीटर को पेट की दीवार (निर्माता द्वारा अनुशंसित विधि) में बांधने के बिना पेट के डिब्बे में तैरने की अनुमति देना सफल होने और उपचार के दौरान पेट की दीवार में अतिरिक्त तनाव को खत्म करने के लिए लेखकों द्वारा पसंद किया गया है। इसके अलावा, यह रिसीवर के उत्सर्जक से संकेत प्राप्त करने की क्षमता पर कोई प्रभाव नहीं है ।
  10. पिंजरे के नीचे एक पोर्टेबल हीटिंग पैड के साथ अपने साफ पिंजरे में माउस रखें। संज्ञाहरण से वसूली के पहले घंटे के दौरान हर 15 मिनट माउस की निगरानी करें, और फिर पशु आवास सुविधा पर लौटें।
  11. वसूली के दौरान 48 घंटे के लिए हर 12 घंटे में चमड़े के नीचे बुप्रेनोरफिन इंजेक्शन के साथ चूहों प्रदान करें और संकट के संकेतों के लिए निगरानी जारी रखें। यदि उपलब्ध है, तो धीमी गति से जारी buprenorphine 48 घंटे के लिए हर 24 घंटे (1 मिलीग्राम/ चूहों को एक स्वैच्छिक पहिया चलाने शुरू करने से पहले सर्जरी के बाद ~ 2 सप्ताह के लिए ठीक करने की अनुमति दें।

2. परिचय: स्वैच्छिक और मजबूर पहिया चल रहा है

  1. सर्जरी से वसूली के बाद, पहिया करने के लिए मुफ्त उपयोग के लिए पिंजरे में स्वैच्छिक चल पहियों जगह है । अन्य रनिंग व्हील चयन समान रूप से प्रभावी हो सकते हैं, लेकिन यह सुनिश्चित करें कि यह उपलब्ध सीमित पिंजरे के आकार के भीतर फिट बैठता है।
    नोट: चल रहे पहियों को एक मानक पिंजरे में फिट करने के लिए आयाम में थोड़ा कम होना पड़ा ।
  2. 2 सप्ताह के लिए पिंजरे में स्वैच्छिक पहिया करने के लिए माउस को स्वीकार करें। एक बार आदत होने के बाद, माउस मजबूर चल रहे पहियों के लिए परिचित प्रक्रियाओं के साथ प्रशिक्षण के लिए तैयार है।
  3. कमरे के तापमान (~ 25 डिग्री सेल्सियस, 30% सापेक्ष आर्द्रता) पर पर्यावरण कक्ष में चार प्रशिक्षण सत्र (एक/दिन) प्रदर्शन करते हैं ।
    नोट: हालांकि यह आदर्श है, चूहों को भी सफलतापूर्वक कक्ष के बाहर समान मजबूर चल पहियों में प्रशिक्षित किया गया । कई चूहों को फिर कक्ष के उपयोग में हस्तक्षेप किए बिना एक साथ प्रशिक्षित किया जा सकता है।
  4. पहला प्रशिक्षण सत्र शुरू करने के लिए, माउस को मोटर ड्राइव बेल्ट को हटाने या ढीला करके 15 मिनट के लिए संशोधित रनिंग व्हील में पहिया मुक्त करने की अनुमति दें ताकि माउस को पहिया की गति निर्धारित करने और गैर-तनावपूर्ण तरीके से इसे स्वीकार करने की अनुमति दी जा सके।
    नोट: प्रोटोकॉल को रनिंग व्हील निर्माता द्वारा आपूर्ति किए गए सॉफ्टवेयर और हार्डवेयर के साथ चलाया जा सकता है या एक बाहरी प्रोग्रामेबल बिजली आपूर्ति द्वारा प्रतिस्थापित किया जा सकता है जो सीधे व्हील मोटर पर वायर्ड होता है, जो वृद्धिशील व्यायाम प्रोटोकॉल के स्वचालन की अनुमति देता है।
  5. प्रत्येक पहिए की बिजली आपूर्ति वोल्टेज और मीटर/मिनट (मीटर/मिनट) के बीच संबंध निर्धारित करने के लिए प्रत्येक रनिंग व्हील के लिए प्रणाली को कैलिब्रेट करें ।
    नोट: मजबूर चल पहियों भी मोटर 15 सेमी तरक्की, उलटा और पुली टेलीमेट्री रिसीवर मंच के ऊपर 5 सेमी के लिए नीचे पहिया ड्राइविंग स्थानांतरित करने के लिए संशोधित किया गया । इससे यह सुनिश्चित हुआ कि रिसीवर प्लेटफॉर्म ने मोटर से हस्तक्षेप किए बिना रनिंग प्रोटोकॉल के दौरान सटीक टेलीमेट्री डेटा प्राप्त किया।
  6. एक संक्षिप्त आराम अवधि (<5 मिनट) के बाद, मजबूर चल पहिया प्रोटोकॉल शुरू करते हैं। २.५ मीटर/मिनट पर पहिया शुरू करें और वास्तविक EHS परीक्षण के पहले घंटे की नकल करने के लिए कुल 1 घंटे के लिए हर 10 मिनट में ०.३ मीटर/मिनट बढ़ाएं, लेकिन कमरे के तापमान पर । माउस को अपने घर के पिंजरे में लौटाें और 24 घंटे की वसूली के लिए अनुमति दें। बाद के तीन जबरन चलने वाले सत्रों को लगातार दिनों में एक ही तरीके से संचालित करें । 1 दिन के बाद, मुक्त व्हीलिंग अभिनंदन भाग अनावश्यक है।
  7. माउस को 2-3 दिनों के वॉश-आउट या जबरन चलने वाले व्हील अभ्यास के तनाव से वसूली की अनुमति दें, लेकिन माउस को घर के पिंजरे स्वैच्छिक पहिया तक मुफ्त पहुंच की अनुमति दें। माउस अब ईएचएस प्रोटोकॉल से गुजरने की तैयारी है।

3. ईएचएस प्रोटोकॉल

  1. ईएचएस प्रोटोकॉल से पहले रात, माउस को पर्यावरण कक्ष में कमरे के तापमान (~ 25 डिग्री सेल्सियस, ≈30% सापेक्ष आर्द्रता) पर कक्ष में रखने के लिए रखें।
  2. निरंतर टीसी एकत्र करने के लिए डेटा अधिग्रहण प्रणाली का उपयोग करें, जो रात भर 30-s अंतराल से अधिक औसत है।
  3. ईएचएस प्रोटोकॉल की सुबह, सुनिश्चित करें कि माउस कक्ष तापमान (यानी, 36-37.5 डिग्री सेल्सियस) बढ़ाने से पहले दैनिक तापमान की एक सामान्य सीमा पर या उससे नीचे है। यह सुनिश्चित करता है कि माउस को बुखार नहीं है और इस अवधि के दौरान अनुचित तनाव का अनुभव नहीं हुआ है।
  4. एक बार माउस स्थिर हो जाता है और सामान्य आराम कोर तापमान की एक श्रृंखला के भीतर, भोजन और पानी को हटा दें और जानवर का वजन करें। चैंबर का दरवाजा बंद करें और चैंबर के तापमान को 37.5 डिग्री सेल्सियस और 40%-50% सापेक्ष आर्द्रता, या वांछित पर्यावरणीय तापमान और आर्द्रता19के लक्ष्य तक बढ़ाएं। एक अंशांकित तापमान और आर्द्रता की निगरानी के साथ कक्ष के तापमान और आर्द्रता को सत्यापित करें।
  5. प्रोटोकॉल के दौरान प्रकाश और गड़बड़ी को कम से कम रखने के लिए कक्ष को ब्लैक आउट पर्दे से घेरें। रिमोट आईआर प्रबुद्ध कैमरों के माध्यम से प्रोटोकॉल के दौरान लगातार माउस की निगरानी करें। तापमान और आर्द्रता मॉनिटर पर एक दूसरा कैमरा फोकस करें, जो चलने वाले पहिए के करीब रखा गया है। जानवर के पास सटीक तापमान रीडिंग सुनिश्चित करने के लिए पर्यावरण कक्ष सेट-पॉइंट के लिए नियंत्रक में कोई समायोजन करें।
  6. एक बार जब कक्ष तापमान मॉनिटर पर दूसरे कैमरे द्वारा मापा जाता है अपने लक्ष्य तापमान तक पहुंच जाता है (यह ~ 30 मिनट ले सकता है), जल्दी से चैंबर का दरवाजा खोलें और माउस को मजबूर चलने वाले पहिए में रखें।
  7. जबरन चलने वाले व्हील प्रोटोकॉल को 2.5 मीटर/मिनट की गति से शुरू करें और माउस के 41 डिग्री सेल्सियस की टीसी तक पहुंचने तक हर 10 मिनट में गति 0.3 मीटर/मिनट बढ़ाएं। एक बार माउस इस मुख्य तापमान तक पहुंच गया है, गति लक्षण सीमा तक स्थिर रहने के लिए अनुमति देते हैं, चेतना का एक स्पष्ट नुकसान, एक पिछड़े गिरावट या बेहोशी की विशेषता है, और चलाने के लिए या पहिया पर पकड़ जारी रखने में असमर्थता । इस समय बिंदु की पुष्टि करें जब माउस में भौतिक प्रतिक्रिया के संकेतों के बिना पहिया पर तीन पिछड़े घुमाव होते हैं। वैकल्पिक रूप से, प्रोटोकॉल को रोकने के लिए निर्धारित करने के लिए स्थानीय आईएसीयूसी नियमों का पालन करते हुए एक मानवीय एंडपॉइंट की पहचान करें (उदाहरण के लिए, जब टीसी ~ 43 डिग्री सेल्सियस)। यह अंतिम बिंदु अनिवार्य रूप से सभी चूहों में लक्षण सीमा से थोड़ा ऊपर है।
  8. रैपिड कूलिंग प्रोटोकॉल (आर) करने के लिए, एक बार माउस लक्षण सीमा तक पहुंच जाता है, पहिया बंद करो, और इसे तुरंत मजबूर चल पहिया से हटा दें। माउस का वजन करें और कमरे के तापमान पर ठीक होने के लिए इसे अपने घर के पिंजरे में वापस रखें। इस समय के दौरान, कक्ष का दरवाजा खुला छोड़ दें और कक्ष को तेजी से ठंडा करने की अनुमति देने के लिए इनक्यूबेटर सेट पॉइंट को कमरे के तापमान पर वापस करें। इस प्रक्रिया के परिणामस्वरूप >99% दीर्घकालिक अस्तित्व होता है।
  9. अधिक गंभीर (एस) ईएचएस एक्सपोजर करने के लिए, ईएचएस प्रोटोकॉल के दौरान जानवर के घर के पिंजरे को 37.5 डिग्री सेल्सियस कक्ष के भीतर रखें। जब जानवर लक्षण सीमा तक पहुंचता है, तो उन्हें चल रहे पहिए में रहने की अनुमति दें जब तक कि वे दूरदराज के कैमरे (~ 5-9 मिनट) द्वारा मनाए गए चेतना में न लौटें।
  10. फिर जल्दी से चल रहे पहिए से माउस को हटा दें और इसे सीधे अपने पूर्व-गर्म पिंजरे में वापस करें ताकि बहुत धीमी कूलिंग प्रोफाइल(चित्रा 1A,लाल धराशायी रेखा) हो, अनिवार्य रूप से ईएचएस हाइपोथर्मिक चरण को नष्ट किया जा सके। कक्ष के साथ संतुलन में सुधार करने के लिए इस समय के दौरान पिंजरे से फिल्टर शीर्ष निकालें।
  11. एक दबा हाइपोथर्मिक चरण में परिणाम के लिए एक कम गंभीर वैकल्पिक प्रक्रिया करने के लिए कमरे के तापमान के लिए पूर्वतल पिंजरे का उपयोग करें, लेकिन 100% जीवित रहने की दर20के साथ।
  12. एस प्रोटोकॉल के लिए, वसूली के दौरान माउस की सावधानीपूर्वक निगरानी करें और मानवीय अंत बिंदुओं के लिए लगातार जांच करें। यद्यपि आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले मानवीय एंडपॉइंट (जैसे, राइटिंग पलटा) के लिए दूर से परीक्षण करना मुश्किल है, लेकिन वसूली के दौरान सामान्य आंदोलनों के लिए चूहों को दूर से निरीक्षण करना जैसे कि ग्रूमिंग, सामान्य श्वास, चाट आदि। इस समय के दौरान तृकां की निगरानी करें।
  13. चूहों के ठीक होने की संभावना नहीं है यदि उनका मुख्य तापमान वसूली चरण के दौरान दिशा को उलट देता है, अंततः 40 डिग्री सेल्सियस से अधिक; इस समय, प्रयोग को समाप्त करें और मानक मानवीय अंत बिंदुओं के लिए माउस का मूल्यांकन करें।

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Representative Results

ईएचएस प्रोटोकॉल की संपूर्णता और माउस की शीघ्र वसूली के दौरान विशिष्ट थर्मोरेगुलेटरी प्रोफाइल चित्र 1 एमें दर्शाया गया है। इस प्रोफ़ाइल में चार अलग-अलग चरण शामिल हैं जिन्हें चैंबर हीटिंग चरण, वृद्धिशील व्यायाम चरण, स्थिर-राज्य अभ्यास चरण, और एक तेजी से ठंडा (आर) या गंभीर (एस) विधि17द्वारा एक वसूली चरण के रूप में परिभाषित किया जा सकता है। मुख्य थर्मोरेगुलेटरी परिणामों में अधिकतम टीसी (टीसी, अधिकतम) और टीसी, अधिकतम तक पहुंचने के लिए आवश्यक समय शामिल है। आरोही थर्मल क्षेत्र तापमान >39.5 डिग्री सेल्सियस21 और हाइपोथर्मिया गहराई (टीसी, न्यूनतम) के प्रभावी जोखिम का निर्धारण करने के लिए अनुमति देता है। कई अध्ययनों से संक्षेप में इन चरों के लिए विशिष्ट मान तालिका 1में दिखाए गए हैं। नियमित रूप से मापा जाने वाले अन्य परिणामों में कुल दूरी दौड़ना, अधिकतम गति प्राप्त की गई, और ईएचएस प्रोटोकॉल (निर्जलीकरण के लिए एक सरोगेट उपाय) के दौरान खो गया प्रतिशत वजन शामिल है। फिर, तालिका 1में विशिष्ट मूल्यों को देखा जा सकता है। मादा चूहे इस मॉडल में हीट स्ट्रोक के लिए अधिक प्रतिरोधी हैं और पुरुष चूहों की तुलना में लगभग 2 गुना लंबी दूरी चलाते हैं17,जैसा कि चित्र 1बी में योजनाबद्ध रूप से सचित्र है और तालिका 1में संख्यात्मक रूप से संक्षेप में प्रस्तुत किया गया है।

ईएचएस के बाद अलग-अलग समय बिंदुओं पर टर्मिनल प्रयोग किए गए हैं, जो 19 से 30दिन11, 17, 22तक गिरने से तुरंत पहले और बाद में होते हैं । यह मॉडल लगातार आंतों, गुर्दे और यकृत19को हिस्टोलॉजिकल क्षति को दर्शाता है। अन्य अपेक्षित परिणामों में तनाव या प्रतिरक्षा जवाबदेही के सामान्य बायोमार्कर11,17,(तालिका 2),साथ ही अंत अंग रोग शामिल हैं जिनमें यकृत (एलेनिन ट्रांसमेनाज), मांसपेशी (क्रिएटिनिन काइनेज), आंतों (फैटी एसिड बाइंडिंग प्रोटीन 2), और किडनी (क्रिएटिनिन: ब्लड यूरिया नाइट्रोजन अनुपात) शामिल हैं, जैसा कि तालिका 3 19में दिखाया गया है। भविष्य की जांच ऊतक क्षति या ऑक्सीडेटिव तनाव के अन्य मार्कर को मापने पर विचार कर सकती है।

आर प्रीक्लिनिकल मॉडल में, >99% जानवर नमूना संग्रह तक जीवित रहते हैं। हालांकि, एस मॉडल में, जैसा कि ऊपर वर्णित है, मृत्यु दर >30% (एन = 32, पी < 0.003) तक बढ़ जाती है। एस मॉडल के लिए एक विशिष्ट वसूली तापमान प्रोफ़ाइल चित्रा 1A (धराशायी लाल रेखा) में सचित्र है, जहां टीसी 2 घंटे वसूली अवधि में 37 डिग्री सेल्सियस से ऊपर रहता है। ईएचएस प्रोटोकॉल और वसूली के प्रत्येक चरण के दौरान ईएचएस वसूली अवधि के विभाजन की तुलना क्लासिक और एस मॉडल के बीच चित्रा 2 में की जाती है। दिलचस्प बात यह है कि दो मॉडलों में 39.5 डिग्री सेल्सियस तक ठीक होने के लिए आवश्यक समय में कोई अंतर नहीं है। हालांकि, पर्यावरण के तापमान (सामान्य शरीर के तापमान से ऊपर 37.5 डिग्री सेल्सियस) को ठंडा करने का समय बहुत लंबे समय तक (पी < 0.0001) था।

Figure 1
चित्रा 1:ईएचएस प्रोटोकॉल की संपूर्णता और माउस की जल्दी वसूली के दौरान थर्मोरेगुलेटरी प्रोफाइल। (क)ऊर्ध्वाधर धुरी पर प्रोटोकॉल के दौर से गुजर रहे C57Bl6 माउस की ठेठ कोर तापमान प्रोफ़ाइल । क्षैतिज धुरी पर, समय के रूप में प्रोटोकॉल के वृद्धिशील हिस्से की शुरुआत करने के लिए चैंबर हीटिंग (-50) से प्रगति करता है। जैसे ही माउस 41 डिग्री सेल्सियस तक पहुंचता है, स्थिर-राज्य चरण के दौरान गति को स्थिर रखा जाता है जब तक कि यह लक्षण-सीमा तक न पहुंच जाए। वसूली के दौरान, कोर तापमान गंभीर (लाल धराशायी लाइन) और तेजी से ठंडा (ठोस लाइन) मॉडल के लिए विभिन्न दरों पर गिरता है। (ख)कोर तापमान और अवधि में मनाए गए सेक्स मतभेदों का योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व । धराशायी रेखा पुरुष है, और ठोस रेखा महिला है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्र 2:अवधि जिसमें माउस का मुख्य तापमान तेजी से ठंडा (आर) और धीमी गति से ठंडा (एस) प्रोटोकॉल के लिए >३९.५ डिग्री सेल्सियस रहा । ध्यान दें कि टीसी में महत्वपूर्ण अंतर मौजूद हैं, अधिकतम से 37.5 डिग्री सेल्सियस और टीसी, अधिकतम से टीसी, न्यूनतम खंड। डेटा का मतलब मानक विचलन ± है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

पुरुषों महिलाओं एक्सीसी
टीसी, अधिकतम (डिग्री सेल्सियस) 42.1 ± 0.2 42.3 (42.2–42.4) 38.5 ± 0.2
टीसी के लिए समय (न्यूनतम) 123 ± 11 208 (152–252) 113 ± 10
ईएचएस में %वजन घटाने 8.1 ± 2.1 6.0 (5.1–7.6 4.5% ± 1.0%
हाइपोथर्मिया गहराई (डिग्री सेल्सियस) 33.0 ± 1.1 31.7 (30.7–33.1) n/a
आरोही थर्मल क्षेत्र (डिग्री सेल्सियस >39.5 • एस) 96.5 ± 14.7 240 (202–285) n/a
कुल दूरी (एम) 444.9 ± 89.3 623 (424–797) मिलान
अधिकतम गति (m/मिनट) 5.3 ± 0.6 8.1 (7.1–9.2) 5.2

तालिका 1: परिश्रम हीट स्ट्रोक के तेजी से ठंडा मॉडल का उपयोग कर अपेक्षित तापमान और व्यायाम प्रतिक्रियाएं। पर्यावरण के तापमान से सभी डेटा = 37.5 डिग्री सेल्सियस, 30%-40% सापेक्ष आर्द्रता। इसका मतलब है ± एसडी राजा एट अल से संक्षेप २०१५19,गार्सिया एट अल २०१८17,गार्सिया एट अल २०२०१८।
टीसी, अधिकतम = श्रमणीय हीट स्ट्रोक (ईएचएस) के दौरान लक्षण सीमा पर या उसके पास अधिकतम कोर तापमान प्राप्त हुआ।
% वजन घटाने = % वजन अंतर से तुरंत पहले और EHS के बाद। आरोही थर्मल क्षेत्र = थर्मल लोड का एक संकेतक। यह ईएचएस प्रोटोकॉल के दौरान 39.5 डिग्री सेल्सियस > समय एक्स तापमान का उत्पाद है।

नर मादा
पुरुषों एक्सीसी 30 मिनट 3 घंटे 24 घंटे एक्सीसी 30 मिनट 3 घंटे 24 घंटे
कोर्टिकोस्टेरोन (एनजी/एमएल) 50 ± 10 175 ± 42 152 ± 28 46 ± 26 72 ± 11 219 ± 78 259 ± 36 95 ± 24
आईएल-6 (स्नातकोत्तर/एमएल) 3.8 ± 0 58.0 ± 50.0 37.0 ± 43 5.1 ± 4.0 3.7 ± 0.3 97.0 ± 48 10.4 ± 16.0 5.0 ± 4.2
जीसीएस-एफ (स्नातकोत्तर/एमएल) 34.2 ± 16.4 573 ± 462 1080 ± 52 87.8 ± 40.5 44.2 ± 20.0 238 ± 194 1712 ± 1700 208.4 ± 193

तालिका 2: श्रमणीय हीट स्ट्रोक के एक तेजी से ठंडा मॉडल में तनाव हार्मोन/साइटोकिन प्रतिक्रियाओं के बायोमार्कर ।
डेटा एसडी ± मतलब है, पर्यावरण के तापमान से सभी डेटा = 37.5 डिग्री सेल्सियस, 30%-40% सापेक्ष
नमी। गार्सिया एट अल से संक्षेप में 201817.

समय बिंदु एक्सीसी 30 मिनट 3 घंटे 24 घंटे
क्रिएटिन किनेज़ (आईयू/एल) 215 ± 108 309 ± 145 1392 ± 1797 344 ± 196
रक्त यूरिया नाइट्रोजन (मिलीग्राम/डीएल) 23 ± 2.7 66 ± 2.6 34 ± 8.5 17.2 ± 0.4
क्रिएटिनिन: बन अनुपात 131 ± 70.0 210.7 ± 22.8 268.6 ± 118 52.3 ± 14
एलेनिन ट्रांसमाइने 25 ± 3.7 367 ± 744 123 ± 167 207 ± 236
FABP-2 (एनजी/एमएल) 2.3 ± 1.0 10.2 ± 1.0 2.6 ± 3.1 1.2 ± 0.5

तालिका 3: श्रमणीय हीट स्ट्रोक के तेजी से शीतलन मॉडल से वसूली के दौरान पुरुष चूहों में अंग चोट के बायोमार्कर।
डेटा एसडी ± मतलब है। पर्यावरण के तापमान से सभी डेटा = 37.5 डिग्री सेल्सियस। राजा एट अल २०१५19।

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Discussion

इस तकनीकी समीक्षा का उद्देश्य चूहों में ईएचएस के प्रीक्लिनिकल मॉडल के प्रदर्शन के लिए दिशानिर्देश प्रदान करना है। परिवर्तनीय गंभीरता के प्रजनन योग्य ईएचएस प्रकरण के निष्पादन के लिए आवश्यक विस्तृत कदम और सामग्री प्रदान की जाती है। महत्वपूर्ण बात यह है कि मॉडल काफी हद तक मानव ईएचएस पीड़ितों में देखे गए संकेतों, लक्षणों और बहु-अंग रोग की नकल करता है11,19। इसके अलावा, यह मॉडल लघु और दीर्घकालिक ईएचएस वसूली19,20, 22, 23 और थर्मोरेगुलेशन पर हस्तक्षेप के प्रभाव, गर्मी में प्रदर्शन मापन, स्ट्रोक के बाद तापमान में कटौती की दर, और बहु-अंग रोग और वसूली के कार्यात्मक परीक्षणों के संकेतकों के अंतर्निहित तंत्र की जांच के लिए अनुमति देता है। यह मॉडल जांचकर्ताओं को अन्य मॉडलों के बीच तुलना करने की अनुमति देता है जो घातक हाइपरथर्मिया या 24 , 25,26का वर्णन करने वाले घातक हाइपरथर्मिया या रबडोयोलिसिस जैसे तुलनाओं के लिए प्रासंगिक होसकतेहैं ।

यह प्रीक्लीनिकल मॉडल अनावश्यक तनावों को समाप्त करता है, जैसे विद्युत उत्तेजना, गुदा जांच, संज्ञाहरण, या पूर्व निर्धारित टीसी कट-ऑफ का उपयोग। इसके अलावा, यह सेक्स मतभेदों और EHS के लिए सहज सहिष्णुता पर प्रकाश डाला गया । हालांकि, कुछ महत्वपूर्ण कदम हैं जिनका पालन किया जाना चाहिए । उदाहरण के लिए, सापेक्ष आर्द्रता में मामूली ऊंचाई प्रोटोकॉल की अवधि को लम्बा कर सकती है क्योंकि चूहे खुद को ठंडा करने के लिए जल वाष्प के संघनन का उपयोग करने में सक्षम हैं (मनुष्यों में आर्द्रता के प्रभाव के विपरीत)19। इसके अलावा, यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि एस मोड का उपयोग करते समय, खाली पिंजरे को परीक्षण की पूरी अवधि के दौरान कक्ष के अंदर रखना चाहिए। यदि पिंजरे को कक्ष के बाहर छोड़ दिया जाता है, तो कमरे के तापमान के संपर्क में, यह माउस को ठंडा करने के लिए पर्याप्त ढाल बनाता है, भले ही जल्दी से गर्म कक्ष20में लौट आए। प्रोटोकॉल की एक अनूठी लेकिन जरूरी आवश्यक विशेषता एक छोटे, जबरन चलने वाले व्हील (17.1 सेमी व्यास) का उपयोग कर रही है। इस व्यास चूहों को गति बढ़ने के रूप में पहिया को पूरा करने के लिए अपने ऊपरी torsos उठाने की आवश्यकता है और पहिया की गति के साथ रखने के लिए काफी समन्वय से गुजरना और पहिया के व्यापक रूप से दूरी पर छड़ों पर कदम । इसलिए, इस तरह के पहिए का उपयोग करने वाली दक्षता, गति और प्रदर्शन बहुत अलग होते हैं जब चूहे एक सपाट सतह पर दौड़ते हैं जैसे कि ट्रेडमिल या बहुत बड़ा व्यास पहियों उपलब्ध हैं। यदि विभिन्न व्यास पहियों का उपयोग किया जाता है, तो यहां दिखाए गए उदाहरण डेटा के प्रतिनिधि होने की संभावना नहीं है। यह देखते हुए कि चल रही गतिविधि छोटे पहिया में अधिक जटिल है, इसका उपयोग उचित रूप से फ्लैट सतहों पर चलने के बजाय विविध गतिविधियों की विशिष्ट गर्मी में जटिल मोटर गतिविधियों का अनुकरण कर सकता है।

कूलिंग रेट को एडजस्ट करके गंभीरता का चयन करने की क्षमता इस मॉडल का एक और फायदा है। ईएचएस के नकारात्मक परिणामों का प्रतिकार करने में प्रभावी माने जाने वाला मुख्य चिकित्सीय हस्तक्षेप 40 डिग्री सेल्सियस27से नीचे तत्काल ठंडा होता है । इसलिए, आर मॉडल में वर्णित तेजी से कूलिंग दृष्टिकोण उन लोगों के लिए सिफारिश की जाती है जो एक्सरसाइज सेटिंग्स में ईएचएस एपिसोड को रिवर्स-ट्रांसलेट करने की कोशिश कर रहे हैं जहां कूलिंग स्टेशन आसानी से उपलब्ध हैं। हालांकि, कई अन्य उदाहरणों में, जैसे सैन्य परिदृश्यों या दूरदराज के सेटिंग्स में आयोजित खेल की घटनाओं में, पीड़ितों को अक्सर गर्मी में छोड़ दिया जाता है, पतन के बाद, अक्सर घंटों तक जब तक चिकित्सा सहायता उपलब्ध नहीं होती है। यह धीमी गति से ठंडा (एस) अधिक गंभीर परिणामों के लिए एक वैध मॉडल दृष्टिकोण बनाता है । संभवतः, इस दृष्टिकोण को परिणामों की गंभीरता की एक विस्तृत श्रृंखला प्रदान करने और कूलिंग प्रोटोकॉल का परीक्षण करने के लिए और संशोधित किया जा सकता है।

शायद इस प्रक्रिया में सबसे महत्वपूर्ण कदम टेलीमेट्रिक तापमान डिवाइस के उचित प्रत्यारोपण सुनिश्चित करने और पर्याप्त वसूली के बाद सर्जरी के लिए अनुमति दे रहा है । वसूली में शामिल आगामी सूजन प्रक्रिया माउस की ईएचएस प्रोटोकॉल के अनुकूल प्रतिक्रिया देने की क्षमता को बहुत बदल सकती है, क्योंकि ईएचएस नकारात्मक3,27केदौरानथर्मोरेगुलेटरी प्रतिक्रियाओं को प्रभावित करने के लिए संक्रमण और सूजन दिखाई गई है। सर्जरी की सफलता के लिए और उचित घाव भरने को बढ़ावा देने के लिए उचित टांका जरूरी है। यह सुनिश्चित करना महत्वपूर्ण है कि मांसपेशियों की परत को त्वचा की परत से अलग किया गया है। मांसपेशियों की परत को भी केवल लिना अल्बा के साथ काटा जाना चाहिए ताकि अनावश्यक रक्त हानि और मांसपेशियों को नुकसान सुनिश्चित किया जा सके। उचित समय पर एनाल्जेसिक को प्रशासित करना और इन-पिंजरे के पहियों को शुरू करने से पहले जानवरों को सर्जरी से पूरी तरह से ठीक होने के लिए पर्याप्त समय प्रदान करना अनिवार्य है। माउस के संकेत और संकट और वजन घटाने के लक्षणों के लिए वसूली के दौरान निगरानी की जानी चाहिए।

इस प्रोटोकॉल के विकास के दौरान, विभिन्न प्रकार के सफल संशोधनों का परीक्षण किया गया था। पहले संशोधन में उस गति को शामिल किया गया था जिस पर प्रशिक्षण आयोजित किया गया था और अभिनंदन के दौरान मुक्त-व्हीलिंग भाग का उन्मूलन किया गया था । उपकरण सीमाओं के कारण, प्रशिक्षण एक ही प्रोटोकॉल का उपयोग किया गया था, लेकिन ६० मिनट के लिए हर 10 मिनट में ०.५ मीटर/मिनट की गति में वृद्धिशील वृद्धि के साथ; प्रारंभिक प्रशिक्षण सत्र में फ्री-व्हीलिंग का उपयोग नहीं किया गया था। इन छोटे परिवर्तनों ने माउस के समग्र परिणाम या प्रशिक्षण की स्थिति को प्रभावित नहीं किया। एक दूसरा संशोधन जिसका परीक्षण किया गया था, वह पर्यावरण कक्ष के तापमान में वृद्धि के दौरान माउस का प्लेसमेंट था। प्रोटोकॉल बताता है कि माउस को घर के पिंजरे में तब तक आराम करना चाहिए जब तक कि लक्ष्य पर्यावरण का तापमान नहीं पहुंच जाता। हालांकि, लक्ष्य तापमान पर चैंबर का दरवाजा खोलने को खत्म करने के लिए माउस को आराम करने के लिए मजबूर रनिंग व्हील में रखा गया था जबकि चैंबर लक्ष्य तापमान तक पहुंच रहा था । चूहों की टीसी और गतिविधि काफी अलग नहीं थी कि माउस इस समय अवधि के दौरान पहिया या घर के पिंजरे में आराम कर रहा था या नहीं। अंत में, 37.5-39.5 डिग्री सेल्सियस से लेकर 30%-90% आरएच19के साथ विभिन्न प्रकार की पर्यावरणीय स्थितियों का परीक्षण किया गया था। कुल मिलाकर पैटर्न समान रहा जबकि टीसी, अधिकतम, और व्यायाम अवधि अलग थी। इसलिए लक्ष्य तापमान और आर्द्रता में हेरफेर को व्यक्तिगत अनुसंधान लक्ष्यों के अनुरूप किया जा सकता है।

इस प्रोटोकॉल के लिए कुछ अतिरिक्त सीमाएं ध्यान में रखने के लिए हैं। उदाहरण के लिए, क्योंकि प्रोटोकॉल लक्षण-सीमित है, माउस पतन के बिंदु से परे नहीं चलेगा, इससे व्यायाम तीव्रता के आधार पर अधिक गंभीर मॉडल बनाना मुश्किल हो जाता है। हालांकि, संशोधित कूलिंग प्रोटोकॉल इस सीमा को सुधारता है। एक और सीमा यह है कि किसी भी भविष्य चिकित्सकीय या हस्तक्षेप दूर से प्रशासित किया जाना चाहिए, पहले या EHS प्रोटोकॉल के बाद । यदि चिकित्सकीय प्रशासन के लिए जानवर को रोकना पड़ा, तो टीटीसी तुरंत छोड़ देगा, और थर्मोरेगुलेटरी प्रोफाइल को बदल दिया जाएगा।

यद्यपि ये सीमाएं कुछ सैन्य मुद्दों को प्रस्तुत करती हैं, यह मॉडल अन्य मॉडलों की तुलना में लाभप्रद विशेषताओं को प्रदर्शित करता है जिन्होंने तनावपूर्ण उत्तेजनाओं या आक्रामक उपकरणों को नियोजित किया है। भविष्य में, इस मॉडल का उपयोग ईएचएस में अंतर्निहित तंत्र को उजागर करने और उपन्यास हस्तक्षेपों का परीक्षण करने के लिए किया जा सकता है जो ईएचएस की शुरुआत में देरी कर सकते हैं या बहु-अंग रोग को रोक सकते हैं जो पीछा करते हैं। संक्षेप में, यह प्रोटोकॉल चूहों में ईएचएस के एक विश्वसनीय प्रीक्लिनिकल मॉडल के निष्पादन के लिए दिशानिर्देश स्थापित करता है और उम्मीद है कि अन्य वातावरण और भविष्य की जांच में इस दृष्टिकोण को पुनः बनाने से बचने के लिए संभावित नुकसान की पहचान करता है।

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Disclosures

लेखकों को खुलासा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है । सभी काम किया और इस परियोजना के लिए सभी समर्थन फ्लोरिडा विश्वविद्यालय में उत्पन्न किए गए थे।

Acknowledgments

इस काम को रक्षा विभाग W81XWH-15-2-0038 (टीएलसी) और BA180078 (टीएलसी) और बीके और बेट्टी स्टीवंस एंडोमेंट (टीएलसी) द्वारा वित्त पोषित किया गया था । जेएमए को सऊदी अरब के राज्य से वित्तीय सहायता द्वारा समर्थित किया गया था । जिस समय यह अध्ययन किया गया उस समय मिशेल किंग फ्लोरिडा विश्वविद्यालय के साथ थे । वह वर्तमान में पेप्सिको अनुसंधान और विकास के एक प्रभाग, Gatorade खेल विज्ञान संस्थान द्वारा नियोजित है ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
 1080P HD 4 Security Cameras 4CH Home Video Security Camera System w/ 1TB HDD 2MP Night View Cameras CCTV Surveillance Kit LaView
5-0 Coated Vicryl Violet Braided Ethicon
5-0 Ethilon Nylon suture Black Monofilament Ethicon
Adhesive Surgical Drape with Povidone 12x18 Jorgensen Labset al.
BK Precision Multi-Range Programmable DC Power Supplies Model 9201 BK Precision
DR Instruments Medical Student Comprehensive Anatomy Dissection Kit  DR Instruments
Energizer Power Supply Starr Life Sciences
G2 Emitteret al. Starr Life Sciences
Layfayette Motorized Wheel Model #80840B Layfayette
Patterson Veterinary Isoflurane Patterson Veterinary
Platform receiveret al. Starr Life Sciences
Scientific Environmental Chamber Model 3911 ThermoForma
Training Wheels  Columbus Inst.

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References

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King, M. A., Alzahrani, J. M.,… More

King, M. A., Alzahrani, J. M., Clanton, T. L., Laitano, O. A Preclinical Model of Exertional Heat Stroke in Mice. J. Vis. Exp. (173), e62738, doi:10.3791/62738 (2021).

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