Summary
Динамическое рассеяние света (DLS) стало подходящим анализом для оценки размера частиц и распределения внутривенно вводимых железо-углеводных комплексов. Однако протоколы не имеют стандартизации и должны быть изменены для каждого анализируемого железо-углеводного комплекса. В настоящем протоколе описывается применение и особенности анализа сахарозы железа.
Abstract
Внутривенно вводимые железоуглеводные комплексы наночастиц широко используются для лечения дефицита железа. Этот класс включает несколько структурно гетерогенных комплексов наночастиц, которые проявляют различную чувствительность к условиям, необходимым для методологий, доступных для физико-химической характеристики этих агентов. В настоящее время критические качественные характеристики железо-углеводных комплексов до конца не установлены. Динамическое рассеяние света (DLS) стало фундаментальным методом определения размера и распределения неповрежденных частиц. Тем не менее, по-прежнему остаются проблемы, связанные со стандартизацией методологий в разных лабораториях, конкретными модификациями, необходимыми для отдельных железоуглеводных продуктов, и с тем, как лучше всего описать распределение по размерам. Важно отметить, что используемые разбавители и серийные разбавления должны быть стандартизированы. Большие различия в подходах к пробоподготовке и представлению данных ограничивают использование DLS для сравнения железо-углеводных агентов. Здесь мы подробно описываем надежный и легко воспроизводимый протокол для измерения размера и распределения по размерам железо-углеводного комплекса, сахарозы железа, с использованием Z-среднего и индекса полидисперсности.
Introduction
Сахароза железа (IS) представляет собой коллоидный раствор, состоящий из наночастиц, состоящих из комплекса полиядерного ядра железо-оксигидроксид и сахарозы. ИИ широко используется для лечения дефицита железа среди пациентов с широким спектром основных заболеваний, которые не переносят пероральные добавки железа или для которых пероральное железо неэффективно1. IS относится к классу комплексных лекарств, как определено Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA), который представляет собой класс лекарств со сложным химическим составом, соизмеримым с биологическими препаратами2. Регуляторная оценка сложных лекарственных препаратов может потребовать дополнительных ортогональных физико-химических методов и/или доклинических или клинических исследований для точного сравнения последующих комплексных лекарственных средств 3,4. Это важно, потому что в нескольких исследованиях сообщалось, что использование ИИ по сравнению с последующим продуктом ИИ не дает одинаковых клинических результатов. Это подчеркивает важность использования новых и ортогональных методов определения характеристик, которые подходят для выявления различий в физико-химических свойствах между продуктами ИС 5,6.
Точное выяснение размера и распределения по размерам ИИ имеет клиническое значение, поскольку размер частиц является основным фактором, влияющим на скорость и степень опсонизации - первого критического шага в биораспределении этих сложных препаратов 7,8. Даже незначительные изменения в размерах частиц и распределении частиц по размерам были связаны с изменениями фармакокинетического профиля комплексов наночастиц железа и оксида железа 9,10. Недавнее исследование, проведенное Brandis et al., показало, что размер частиц, измеренный с помощью DLS, значительно различался (14,9 нм ± 0,1 нм против 10,1 нм ± 0,1 нм, p < 0,001) при сравнении референтного лекарственного средства и непатентованного продукта глюконата натрия железа, соответственно11. Стабильное качество, безопасность и эффективность железоуглеводных продуктов от партии к партии полностью зависят от масштабирования производственного процесса, и необходимо тщательно учитывать потенциальный производственный дрейф9. Производственный процесс может привести к образованию остаточной сахарозы, и это будет варьироваться в зависимости от производителя12. Любые изменения в переменных производственного процесса могут привести к существенным изменениям в конечном комплексном лекарственном препарате в отношении структуры, стабильности комплекса и диспозиции in vivo 9.
Для оценки консистенции лекарственного средства и прогнозирования его поведения in vivo необходимы современные ортогональные аналитические методики для определения физико-химических свойств сложных нанолекарственных средств. Вместе с тем отсутствует стандартизация методологий, что может привести к высокой степени межлабораторных различий в представлении результатов13. Несмотря на признание этих проблем глобальными регулирующими органами и научнымсообществом14, большинство физико-химических характеристик ИС остаются плохо определенными, а полный набор критических атрибутов качества в контексте имеющихся нормативных руководящих документовне определен 15. Проекты руководящих документов по конкретным продуктам, выпущенные FDA для железо-углеводных комплексов, предлагают DLS в качестве процедуры оценки размера и распределения по размерам последующих продуктов16,17.
В нескольких публикациях подробно описаны установленные протоколы DLS для определения размеров наночастиц IS13,18. Однако, поскольку пробоподготовка, условия процедуры, контрольно-измерительные приборы и параметры настройки контрольно-измерительных приборов различаются между опубликованными методами, результаты DLS не могут быть напрямую сопоставлены в отсутствие стандартизированного метода интерпретации результатов13,18. Разнообразие методологий и подходов к представлению данных ограничивает надлежащую оценку этих характеристик для целей сопоставления19. Важно отметить, что многие из протоколов DLS, ранее опубликованных для оценки ИС, не учитывают эффект диффузии сахарозы в суспензии из-за присутствия свободной сахарозы, которая, как было показано, значительно повышает Z-средние расчетные гидродинамические радиусы наночастиц в коллоидных растворах13,18. Настоящий протокол направлен на стандартизацию методологии измерения размера частиц и распределения ИС. Метод был разработан и валидирован для этой цели.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Эксплуатация машины
- Запуск машины и программного обеспечения
ПРИМЕЧАНИЕ: На дополнительном рисунке S1A-D показаны шаги по запуску машины и программного обеспечения.- Включите прибор не менее чем за 30 минут до начала измерений, а затем запустите ПК.
- Дважды щелкните значок программного обеспечения прибора , чтобы запустить программу.
- Введите логин и пароль в окне входа. Убедитесь, что у каждого пользователя есть собственная учетная запись.
- Подождите, пока все три черные полосы в правом нижнем углу не загорятся зеленым, указывая на то, что устройство готово к работе.
- В случае длительных периодов бездействия, когда пользователь автоматически выходит из системы, в разделе « Безопасность» нажмите « Войти» и повторно введите пароль.
- Создание файла измерений
ПРИМЕЧАНИЕ: Новый файл измерений создается в начале каждого дня измерения. Все измерения перечисляются и сохраняются в файле измерений. Для получения подробной информации об этой процедуре см. дополнительный рисунок S2A-B.- Создайте новый файл измерения, нажав « Файл» | Новинки | Файл измерений. В открывшемся окне выберите место хранения и назовите файл измерения. Подтвердите данные, нажав « Сохранить».
- Чтобы открыть файл, нажмите «Файл» | Открыть | Файл измерений. Выберите файл измерения в открывшемся окне, подтвердите детали, нажав « Открыть», выберите имя файла и нажмите « Сохранить».
- Печать результатов
- Распечатайте или сохраните результаты испытания системы на пригодность (SST) (см. этап 1.5) и среднее значение измерения образца в соответствии с дополнительным рисунком S3.
- Отметьте измерения в представлении «Записи » файла измерения.
- Щелкните правой кнопкой мыши « Пакетная печать» и подождите, пока откроется еще одно небольшое окно.
- Выберите отчет об интенсивности PSD из вариантов и подтвердите его, нажав «ОК».
- Общая процедура начала измерения
ПРИМЕЧАНИЕ: Процедура начала измерения описана на дополнительном рисунке S4A-D. Следуйте по пути, описанному ниже, для необходимого файла параметров устройства (называемого СОП):- Выберите нужную СОП из выпадающего списка. Поскольку в списке отображаются последние использованные СОП, если требуется более старая СОП, выберите «Обзор СОП» и подтвердите, щелкнув зеленую стрелку. Как только место хранения СОП откроется, перейдите к шагу 1.4.2.
ПРИМЕЧАНИЕ: Для получения подробной информации о важных параметрах системы, характерных для сахарозы железа (например, время уравновешивания аттенюатора), см. Таблицу 1. - В открывшемся окне внесите необходимые записи в поля « Имя образца » и «Примечания». Подтвердите, нажав « ОК», и дождитесь автоматического открытия окна измерения.
- Начните измерение, нажав на зеленую кнопку «Пуск ».
- Как только в конце измерения раздастся звуковой сигнал, закройте окно измерения .
- Выберите нужную СОП из выпадающего списка. Поскольку в списке отображаются последние использованные СОП, если требуется более старая СОП, выберите «Обзор СОП» и подтвердите, щелкнув зеленую стрелку. Как только место хранения СОП откроется, перейдите к шагу 1.4.2.
- Измерение теста пригодности системы (SST)
ПРИМЕЧАНИЕ: Не прикасайтесь к нижней части кюветы (зоне измерения). В начале и в конце последовательности измерьте стандарт частиц 20 нм.- Залейте ~ 1 мл стандарта неразбавленных частиц в полистирольную кювету и закройте крышкой.
ПРИМЕЧАНИЕ: Разбавленный стандарт, приготовленный на этапе 1.5.1, можно использовать в течение 1 месяца. - После наполнения закройте кювету и проверьте, нет ли пузырьков воздуха. Удалите пузырьки воздуха, слегка постучав по кювете.
- Поместите кювету в держатель ячейки прибора так, чтобы стрелка была направлена вперед, и закройте крышку измерительной камеры.
- Загрузите СОП с параметрами объекта и введите в стартовом окне следующие данные:
Название образца: Стандарт частиц SST 20 нм
Затем добавьте примечание: идентификационный номер и срок действия стандарта - Начните измерение.
- После окончания измерения, когда прозвучит звуковой сигнал, закройте окно измерения.
- Распечатайте отчет (см. пункт 1.1.3).
ПРИМЕЧАНИЕ: SST сдается, если размер частиц Z-average соответствует значению сертификата анализа ± 10%.
- Залейте ~ 1 мл стандарта неразбавленных частиц в полистирольную кювету и закройте крышкой.
- Измерение раствора сахарозы железа
- Пипетку 0,5 мл раствора ИС с содержанием железа 2% м/В мерную колбу объемом 25 мл и наполнить до метки водой с низким содержанием частиц (например, свежедеионизированной и отфильтрованной [размер пор 0,2 мкм]); этот раствор содержит 0,4 мг Fe / мл.
ПРИМЕЧАНИЕ: Пробоподготовка на этапе 1.6.1. При этом специфическое разбавление было установлено при разработке метода, и это было определено как оптимальное разведение для этой цели. - Для предварительной очистки наполните полистирольную кювету приготовленным мерным раствором примерно на 3/4, аккуратно перемешайте, а затем опорожните как можно полнее.
ПРИМЕЧАНИЕ: Не прикасайтесь к нижней части кюветы (зоне измерения) и избегайте пузырьков воздуха, не встряхивая кювету. - Для измерения пипеткой наберите 1 мл мерного раствора в кювету и накройте крышкой.
- Проверьте измерительный раствор в кювете на наличие пузырьков воздуха. Если есть пузырьки воздуха, удалите их, слегка постукивая по кювете.
- Пипетку 0,5 мл раствора ИС с содержанием железа 2% м/В мерную колбу объемом 25 мл и наполнить до метки водой с низким содержанием частиц (например, свежедеионизированной и отфильтрованной [размер пор 0,2 мкм]); этот раствор содержит 0,4 мг Fe / мл.
- Выполнение измерения
- Поместите пластиковую кювету с измерительным раствором в прибор так, чтобы стрелка была направлена вперед, и закройте крышку.
- Загрузите параметр SOP (см. этап 1.4.1) и введите в стартовом окне следующие данные:
Имя образца: Номер партии - Начните измерение.
- После окончания измерения, когда прозвучит звуковой сигнал, закройте окно измерения .
- Рассчитайте среднее значение шести отдельных измерений в соответствии с дополнительным рисунком S5. Отметьте отдельные измерения в представлении записей файла измерений, щелкните правой кнопкой мыши « Создать средний результат», добавьте имя среднего значения в поле « Имя образца» и подтвердите, нажав « ОК».
- Подождите, пока программа создаст новую запись в конце списка, и найдите введенное имя и усредненный результат в этой записи.
- Распечатайте отчет (см. этап 1.1.3).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Описанный метод был валидирован в соответствии с ICH Q2(R1)20, который включал измерение тестовых растворов в различных условиях. Точность составила всего 0,5% RSD для среднего размера Z, в то время как для PDI было рассчитано максимум 3,5% RSD. Средние результаты от разных аналитиков и дней отличались только на 0,4% для среднего размера Z и на 1,5% для PDI. Статистика была рассчитана на основе 12 измерений, выполненных двумя аналитиками в разные дни. Ни изменение испытательной концентрации в диапазоне 50-200%, ни хранение тестовых растворов до 5 дней в охлажденных условиях не повлияли на конечный результат.
Анализируемые параметры
Z-средний размер
Гидродинамический диаметр задается как средний размер частиц Z, и метод его определения определен в ISO 22412:201717. Z-средний размер — это параметр, также известный как кумулянтное среднее. Z-среднее значение является предпочтительным параметром размера DLS, так как расчет Z-среднего математически стабилен, а результат Z-среднего нечувствителен к шуму. По данным EMA и FDA, Z-средний размер вместе с PDI являются рекомендуемыми значениями для характеристики нанолекарств15,16,21. Z-средний размер частиц сопоставим с размером, измеренным другими методами, только в том случае, если образец имеет мономодальную, сферическую или почти сферическую форму, является монодисперсным и приготовлен в подходящем диспергаторе. Это связано с тем, что средний размер частиц по шкале Z чувствителен даже к небольшим изменениям в пробоподготовке. Z-средний размер частиц является гидродинамическим параметром и, следовательно, действителен только для частиц в дисперсии или для молекул в растворе.
Индекс полидисперсности
Этот индекс представляет собой число, рассчитанное на основе простого двухпараметрического соответствия корреляционным данным (кумулятивный анализ). Индекс полидисперсности безразмерен и масштабирован таким образом, что значения меньше 0,05 встречаются редко, за исключением высокомонодисперсных стандартов. Значения, превышающие 0,7, указывают на то, что образец имеет очень широкое распределение частиц по размерам и, вероятно, не подходит для метода DLS. Различные алгоритмы распределения по размерам могут работать с данными, которые находятся между этими двумя крайностями. Расчеты для этих параметров определены в стандартном документе ISO 22412:201717.
Распределение размеров по интенсивности/объему/количеству
Типичные графики распределения размеров (интенсивность, объем, количество) изображены на рисунке 1. На результирующих графиках показано шесть независимо приготовленных образцов партии ИС 605211 в концентрации 0,4 мг Fe/мл. Для визуализации на рисунке 1 необработанные данные, взятые из программного обеспечения DLS, были нанесены на график с помощью статистического программного обеспечения без дальнейших изменений9. Распределение размеров по интенсивности, на которую повлиял второй пик, приведено в качестве примера плохого результата на рисунке 1A. На рисунке 2 показаны данные низкого качества, показывающие дополнительный сигнал на длине волны 5000 нм.
Рисунок 1: Распределение по размерам. (А) интенсивность, (В) объем и (В) число13. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Репрезентативные данные низкого качества. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Испытуемый раствор партии ИС 0371022A (0,4 мг Fe/мл), который хранился в течение 5 дней при комнатной температуре, показал дополнительный сигнал при ~ 5000 нм, что свидетельствует о некоторых дополнительных частицах (например, пыли или осадках). Соответственно, PDI, первоначально определенный на уровне 0,130, был смещен на 0,184, в то время как Z-среднее значение все еще было близко к исходному значению (т.е. 11,33) при 11,99 нм (неопубликованные данные).
Точность проверялась двумя лаборантами в разные дни. Среднее значение 12 реплик составило 11,32 нм с RSD 0,4% и 0,125 с RSD 1,5% для Z-среднего значения и PDI, соответственно, для двух техников. Критерии приемлемости были соблюдены (NMT 5% для Z-среднего, NMT 20% для PDI) (неопубликованные данные).
Сравнение анализируемых параметров
В дополнение к расчету основных параметров - Z-среднего и полидисперсности - программное обеспечение устройства DLS также позволяет вычислять распределения по размерам, которые могут быть взвешены в соответствии с интенсивностью сигнала детектора или объемом (или количеством) рассеивающих частиц. Актуальность сравнения этих параметров очевидна в результатах, изложенных в таблице 2. В то время как распределение размеров по количеству отличалось до 2 раз от предлагаемого среднего Z-значения, основанного на интенсивности, лишь несколько меньшие значения были рассчитаны при распределении размеров по объему. Следует, однако, отметить, что отчетность о результатах, основанных на интенсивности, может быть неточной, если комплексные растворы железа и углеводов содержат более крупные частицы или агрегаты13.
Таблица 1: Системные параметры для DLS. Сокращения: RI = показатель преломления; DLS = динамическое рассеяние света13. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту таблицу.
Таблица 2: Примеры того, как на определение размера частиц с помощью ИС влияет подход к представлению данных. Эта таблица адаптирована из Ди Франческо и Борхарда13. Сокращения: SD = стандартное отклонение; RSD = относительное стандартное отклонение; PDI = индекс полидисперсности; IS = железо-сахароза. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить эту таблицу.
Дополнительный рисунок S1: Этапы работы системы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительный рисунок S2: Создание файла измерений. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительный рисунок S3: Тест на пригодность системы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительный рисунок S4: Начало нового измерения. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Дополнительный рисунок S5: Расчет измерений. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
DLS стал фундаментальным анализом для определения размера и распределения наночастиц по размерам для применения в разработке лекарств и нормативной оценке. Несмотря на прогресс в методах DLS, все еще существуют методологические проблемы, связанные с выбором разбавителя и подготовкой проб, которые особенно актуальны для железо-углеводных комплексов в коллоидных растворах. Важно отметить, что методы DLS для железо-углеводных нанолекарств еще не были широко изучены в биологической среде (например, в плазме)22. Таким образом, по-прежнему сохраняется острая необходимость в согласовании протоколов наилучшей практики в зависимости от выбора разбавителя. Выбор разбавителя имеет важное значение, так как использование очищенной воды по сравнению с изотоническими солевыми растворами может повлиять на стабильность коллоидной суспензии16.
Следует также отметить, что железо-углеводные комплексы не следует разбавлять ниже рекомендаций по назначению информации, чтобы смягчить проблемы, связанные с наличием темного, непрозрачного раствора. Чрезмерные разбавления не являются биологически значимыми и могут влиять на стабильность коллоидной суспензии за счет изменений ионного экранирования, что может привести к потенциальному осаждению и неточным результатам. В ходе разработки этого метода были испытаны различные разведения и разбавители (неопубликованные данные), и пробоподготовка, описанная на этапе 1.6.1 протокола, была определена и валидирована как оптимальное разведение для ИС. Для DLS-анализа железо-углеводных комплексов необходимо рассмотреть несколько модификаций. Например, приготовление тестовых растворов необходимо выполнять при отсутствии какого-либо высокоскоростного перемешивания. Следует избегать использования вихревых смесителей, так как это приводит к образованию железо-сахарозных агрегатов. Для приготовления исследуемых растворов растворы ИС аккуратно перемешивают в воде с помощью автоматической пипетки. Кроме того, при запуске образцов для анализа DLS функция автоматической калибровки должна быть отключена.
Существует несколько неотъемлемых ограничений DLS-анализа для железо-углеводных наночастиц. Из-за характера углов рассеяния света и среднего Z-выходного сигнала сообщаемые гидродинамические диаметры смещены в сторону более крупных частиц в измерительном растворе. Таким образом, размер частиц может быть переоценен, а истинное распределение размера частиц может быть недооценено13. Методы представления результатов следует рассматривать в контексте того, насколько велики частицы железо-углеводного комплекса и потенциал агрегации в экспериментальных условиях. Следует также учитывать, что результаты распределений размеров, взвешенных по интенсивности, объему и числу, могут сильно различаться между различными единицами DLS от одного и того же или разных производителей, поскольку разные производители используют разные алгоритмы для расчета. Поэтому ISO22412 рекомендует использовать только Z-среднее значение и полидисперсность, так как алгоритм их расчета стандартизирован. Регулирующие органы также рекомендовали отчетность о среднем размереZ 16. Следует также отметить, что при применении этого протокола к другим приборам потребуются незначительные изменения (например, обращение с программным обеспечением, процедура измерения и подготовка данных).
Даже в свете проблем, связанных с DLS, этот метод представляет собой значительный прогресс по сравнению с предыдущими аналитическими методологиями и добавляет убедительные данные к характеристике железо-углеводных комплексов. Он был одобрен научными коллективами и регулирующими органами16,18,19,21. Будущие усилия по применению анализа СДО к железо-углеводным комплексам должны, прежде всего, быть сосредоточены на глобальной гармонизации протоколов их применения к разработке лекарств и нормативной оценке, включая обеспечение биоэквивалентности. В целом, описанный здесь аналитический протокол направлен на стандартизацию методологии измерения размера частиц и распределения ИС и может быть полезным инструментом для оценки качества ИС.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
M.B., E.P., M.W. и A.B. являются сотрудниками Vifor Pharma. Г.Б. является консультантом компании Vifor Pharma.
Acknowledgments
Никакой
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Equipment | |||
| Zetasizer Nano ZS | Malvern | NA | equipped with Zetasizer software 7.12, Helium Neon laser (633 nm, max. 4 mW) and 173° backscattering geometry |
| Materials | |||
| Disposable plastic cuvettes | |||
| LLG-Disposable plastic cells | LLG labware | LLG-Küvetten, Makro, PS; Order number 9.406011 | |
| low-particle water | (The use of freshly deionized and filtered (pore size 0.2 μm) water is recommended). | ||
| Microlitre pipette | |||
| Venofer 100 mg/5 mL | Vifor Pharma | ||
| Volumetric flask 25 mL | |||
| Nanosphere | Thermo | 3020A | Particle Standard |
| Software | |||
| Origin Pro v.8.5 | Origin Lab Corporation |
References
- Auerbach, M., Gafter-Gvili, A., Macdougall, I. C. Intravenous iron: A framework for changing the management of iron deficiency. Lancet Haematology. 7 (4), e342-e350 (2020).
- Generic drugs: FDA should make public its plans to issue and revise guidance on nonbiological complex drugs. US Government Accountability Office. , Available from: https://www.gao.gov/products/gao-18-80 (2017).
- Klein, K., et al. The EU regulatory landscape of non-biological complex drugs (NBCDs) follow-on products: Observations and recommendations. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 133, 228-235 (2019).
- Astier, A., et al. How to select a nanosimilar. Annals of the New York Academy of Sciences. 1407 (1), 50-62 (2017).
- Rottembourg, J., Kadri, A., Leonard, E., Dansaert, A., Lafuma, A. Do two intravenous iron sucrose preparations have the same efficacy. Nephrology Dialysis Transplantation. 26 (10), 3262-3267 (2011).
- Aguera, M. L., et al. Efficiency of original versus generic intravenous iron formulations in patients on haemodialysis. PLoS One. 10 (8), e0135967 (2015).
- Alphandery, E. Iron oxide nanoparticles for therapeutic applications. Drug Discovery Today. 25 (1), 141-149 (2020).
- Arami, H., Khandhar, A., Liggitt, D., Krishnan, K. M. In vivo delivery, pharmacokinetics, biodistribution and toxicity of iron oxide nanoparticles. Chemical Society Reviews. 44 (23), 8576-8607 (2015).
- Nikravesh, N., et al. Factors influencing safety and efficacy of intravenous iron-carbohydrate nanomedicines: From production to clinical practice. Nanomedicine. 26, 102178 (2020).
- Pai, A. B., et al. In vitro and in vivo DFO-chelatable labile iron release profiles among commercially available intravenous iron nanoparticle formulations. Regulatory Toxicology and Pharmacology. 97, 17-23 (2018).
- Brandis, J. E. P., et al. Evaluation of the physicochemical properties of the iron nanoparticle drug products: Brand and generic sodium ferric gluconate. Molecular Pharmaceutics. 18 (4), 1544-1557 (2021).
- Di Francesco, T., Sublet, E., Borchard, G. Nanomedicines in clinical practice: Are colloidal iron sucrose ready-to-use intravenous solutions interchangeable. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 131, 69-74 (2019).
- Di Francesco, T., Borchard, G. A robust and easily reproducible protocol for the determination of size and size distribution of iron sucrose using dynamic light scattering. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 152, 89-93 (2018).
- The Center for Research on Complex Generics. US Food and Drug Administration. , Available from: https://www.fda.gov/drugs/guidance-compliance-regulatory-information/center-research-complex-generics (2021).
- Drug products, including biological products, that contain nanomaterials - Guidance for industry. Center for Drug Evaluation and Research. FDA-2017-D-0759. US Food and Drug Administration. , Available from: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/drug-products-including-biological-products-contain-nanomaterials-guidance-industry (2022).
- US Food and Drug Administration. Draft guidance on ferric oxyhydroxide. US Food and Drug Administration. , (2021).
- ISO 22412:2017. Particle size analysis - Dynamic light scattering. International Organization for Standardization. , Available from: http://www.iso.org/standard/65410.html (2017).
- Zou, P., Tyner, K., Raw, A., Lee, S. Physicochemical characterization of iron carbohydrate colloid drug products. The AAPS Journal. 19 (5), 1359-1376 (2017).
- D'Mello, S. R., et al. The evolving landscape of drug products containing nanomaterials in the United States. Nature Nanotechnology. 12 (6), 523-529 (2017).
- Q2 (R1) Validation of analytical procedures: Text and methodology guidance for industry. FDA-2017-D-6821. US Food and Drug Administration. , Available from: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/q2r1-validation-analytical-procedures-text-and-methodology-guidance-industry (2005).
- Committee for Medicinal Products for Human Use. Reflection paper on the data requirements for intravenous iron-based nano-colloidal products developed with reference to an innovator medicinal product. European Medicines Agency. , Available from: https://www.ema.europe.eu/en/documents/scientific-guideline/reflection-paper-data-requirements-intravenous-iron-based-nano-colloidal-products-developed_en.pdf (2015).
- Fischer, K., Schmidt, M. Pitfalls and novel applications of particle sizing by dynamic light scattering. Biomaterials. 98, 79-91 (2016).
- Caputo, F., et al. Asymmetric-flow field-flow fractionation for measuring particle size, drug loading and (in)stability of nanopharmaceuticals. The joint view of European Union Nanomedicine Characterization Laboratory and National Cancer Institute - Nanotechnology Characterization Laboratory. Journal of Chromatography A. 1635, 461767 (2021).
- Yusa, S. Chapter 6 - Polymer characterization. Polymer Science and Nanotechnology. Narain, R. , Elsevier. Amsterdam, the Netherlands. 105-124 (2020).
