Den nuværende protokol beskriver optimeringen af eksperimentelle parametre, når man bruger transesophageal atrial pacing til at vurdere følsomhed over for atrieflimren hos mus.
Musemodeller af genetiske og erhvervede risikofaktorer for atrieflimren (AF) har vist sig værdifulde til at undersøge de molekylære determinanter for AF. Programmeret elektrisk stimulering kan udføres ved hjælp af transesophageal atrial pacing som en overlevelsesprocedure, hvilket muliggør seriel test i det samme dyr. Der findes dog adskillige tempoprotokoller, hvilket komplicerer reproducerbarheden. Denne protokol har til formål at tilvejebringe en standardiseret strategi til udvikling af modelspecifikke eksperimentelle parametre for at forbedre reproducerbarheden mellem undersøgelser. Indledende undersøgelser udføres for at optimere de eksperimentelle metoder til den specifikke model, der undersøges, herunder alder på undersøgelsestidspunktet, køn og parametre for pacingprotokollen (f.eks. Tempotilstand og definition af AF-modtagelighed). Det er vigtigt, at man sørger for at undgå høje stimulusenergier, da dette kan forårsage stimulering af ganglionic plexi med utilsigtet parasympatisk aktivering, manifesteret af overdreven atrioventrikulær (AV) blok under pacing og ofte forbundet med artefaktuel AF-induktion. Dyr, der påviser denne komplikation, skal udelukkes fra analysen.
Atrieflimren (AF) repræsenterer en endelig fælles vej for flere erhvervede og genetiske risikofaktorer. For undersøgelser, der undersøger de patofysiologiske mekanismer i AF-substratet, er musemodeller fordelagtige i betragtning af den lette genetiske manipulation og det faktum, at de generelt reproducerer AF-modtageligheden observeret hos mennesker for forskellige kliniske fænotyper 1,2,3. Mus udvikler dog sjældent spontan AF4, hvilket nødvendiggør brug af provokerende undersøgelser af atrietempo.
Programmeret elektrisk stimulering (PES) kan udføres for at vurdere murine atrial elektrofysiologi og AF-modtagelighed ved hjælp af enten intracardiac5 eller transesophageal6 pacing. Mens den transesophageale tilgang er særlig fordelagtig som en overlevelsesprocedure, kompliceres dens anvendelse af de mange offentliggjorte eksperimentelle protokoller7,8 og kilder til variabilitet, der kan hindre reproducerbarhed9. Desuden gør begrænsede rapporterede protokolsammenligninger det udfordrende at vælge en passende tempoprotokol.
Den nuværende protokol sigter mod at anvende en systematisk strategi til at udvikle modelspecifikke transesophageal PES-metoder til vurdering af murine AF-modtagelighed for at øge reproducerbarheden. Det er vigtigt, at indledende pilotundersøgelser udføres for at optimere tempoprotokollen ved at tage højde for alders-, køns- og tempotilstandsvariation, med tempo designet til at minimere utilsigtet parasympatisk stimulering, der kan forvirre resultater9.
Transesophageal atrial pacing tillader ikke kun serielle undersøgelser i samme dyr, men dets varighed er typisk kortere end intrakardiale undersøgelser (~ 20 minutter), hvilket minimerer anæstetisk brug og dets virkninger på elektrofysiologiske parametre.
Det er afgørende at optimere metoderne i første omgang for hver enkelt musemodel. Aldring øger AF-inducerbarheden hos normale mus18,19, og individuelle genetiske modeller kan …
The authors have nothing to disclose.
Figur 2 blev oprettet med BioRender.com. Dette arbejde blev støttet af tilskud fra National Heart, Lung, and Blood Institute ved National Institutes of Health (HL096844 og HL133127); American Heart Association (2160035, 18SFRN34230125 og 903918 [MBM]); og National Center for Advancing Translational Sciences ved National Institute of Health (UL1 TR000445).
27 G ECG electrodes | ADInstruments | MLA1204 | |
2-F octapolar electrode catheter | NuMED | CIBercath | |
Activated carbon canister | VetEquip | 931401 | |
Analysis software | ADInstruments | LabChart v8.1.13 | |
Biological amplifier | ADInstruments | FE231 | |
Data acquisition hardware | ADInstruments | PowerLab 26T | |
Eye ointment | MWI Veterinary | NC1886507 | |
Heating pad | Braintree Scientific | DPIP | |
Isoflurane | Piramal | 66794-017-25 | |
Stimulator | Bloom Associates | DTU-210 | |
Stimulus Isolator | World Precision Instruments | Model A365 |