Данный протокол демонстрирует уникальную мышиную модель остановки сердца при асфиксии, не требующую компрессии грудной клетки для проведения реанимации. Эта модель полезна для мониторинга и визуализации динамики физиологии мозга при остановке сердца и реанимации.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Мышиная модель остановки сердца для визуализации мозга и мониторинга физиологии мозга во время ишемии и реанимации
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Большинство людей, перенесших остановку сердца (КА), испытывают различные степени неврологического дефицита. Чтобы понять механизмы, лежащие в основе повреждения головного мозга, вызванного СА, и, следовательно, разработать эффективные методы лечения, необходимы экспериментальные исследования КА. С этой целью было создано несколько моделей CA для мышей. В большинстве этих моделей мышей помещают в положение лежа на спине, чтобы выполнить компрессию грудной клетки для сердечно-легочной реанимации (СЛР). Тем не менее, эта процедура реанимации затрудняет визуализацию/мониторинг физиологии мозга в режиме реального времени во время КА и реанимации. Для получения таких критически важных знаний в настоящем протоколе представлена модель СА асфиксии мыши, которая не требует этапа СЛР с компрессией грудной клетки. Эта модель позволяет изучать динамические изменения кровотока, структуры сосудов, электрических потенциалов и кислорода в тканях головного мозга от исходного уровня до ранней реперфузии после КА. Важно отметить, что эта модель применима к старым мышам. Таким образом, ожидается, что эта модель СА мыши станет важным инструментом для расшифровки влияния СА на физиологию мозга.
Введение
Остановка сердца (КА) остается глобальным кризисом общественного здравоохранения1. Только в США ежегодно регистрируется более 356 000 внебольничных и 290 000 стационарных случаев КА, и большинство жертв КА старше 60 лет. Примечательно, что неврологические нарушения после КА распространены среди выживших, и они представляют собой серьезную проблему для ведения КА 2,3,4,5. Для понимания патологических изменений головного мозга после СА и их влияния на неврологические исходы были применены различные....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Все процедуры, описанные здесь, были проведены в соответствии с рекомендациями Национальных институтов здравоохранения (NIH) по уходу и использованию животных в исследованиях, а протокол был одобрен Комитетом по уходу и использованию животных Института Дьюка (IACUC). Для настоящего исследования были использованы самцы и самки мышей C57BL/6 в возрасте 8-10 недель.
1. Хирургическая подготовка
- Взвесьте мышь на цифровых весах и поместите ее в индукционную коробку для анестезии размером 4 x 4 x 7 дюймов из плексигласа.
- Отрегулируйте испаритель анестезии на 5% изофлурана, расходомер кислорода на 30, а расходом....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Чтобы вызвать КА, мышь обезболивали 1,5% изофлураном и вентилировали 100% азотом. Это состояние приводило к тяжелой брадикардии через 45 с (рис. 1). Через 2 мин аноксии частота сердечных сокращений резко снизилась (рис. 2), артериальное давление снизилось ниже 20 мм рт. ст., а мозговой кровоток полностью прекратился (рис. 1). По мере того, как изофлуран отключался, температура тела больше не контролировалась и медленно падала пример.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
В экспериментальных исследованиях СА асфиксия, инъекции хлорида калия или фибрилляция желудочков, вызванная электрическим током, использовались для индуцирования СА 16,17,18,19,20,21,22,23. Как правило, сердечно-легочная реанимация требуется для реанимации .......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Конфликт интересов у авторов отсутствует.
Благодарности
Авторы благодарят Кэти Гейдж за редакционную поддержку. Это исследование было поддержано средствами кафедры анестезиологии (Медицинский центр Университета Дьюка), грантом Американской кардиологической ассоциации (18CSA34080277) и грантами Национальных институтов здоровья (NIH) (NS099590, HL157354, NS117973 и NS127163).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| Адреналин | Par Pharmaceutical | NDC 42023-159-01 | |
| Спиртовые тампоны | BD | 326895 | |
| Animal Bio Amp | ADInstruments | FE232 | |
| BP преобразователь | ADInstruments | MLT0699 | |
| Bridge Amp | ADInstruments | FE117 | |
| Гепарин натрия для инъекций, USP | Fresenius Kabi | NDC 63323-540-05 | |
| Изофлуран | Covetrus | NDC 11695-6777-2 | |
| Монитор лазерной допплеровской перфузии | Moor Instruments | moorVMS-LDF1 | |
| Лазерная система визуализации спеклов | RWD | RFLSI III | |
| Мазь-смазка для глаз | Bausch + Lomb | 339081 | |
| Микрозажим | Roboz | RS-5431 | |
| Мышиный ректальный зонд | Physitemp | RET-3 | |
| Игольчатый электрод | ADInstruments | MLA1213 | 29 Ga, гнездо 1,5 мм |
| Азот | Воздушный газ | UN1066 | |
| Оптический пластиковое волокно | Moor Instruments | POF500 | |
| Отоскоп | Welchallyn | 728 | 2,5 мм Зеркало |
| Кислород | Воздушный газ | UN1072 | |
| Трубка PE-10 | BD | 427401 | Полиэтиленовая трубка |
| Повидон-йод | CVS | 955338 | |
| PowerLab 8/35 | Кондиционеры | ||
| Римадил (карпрофен) | Zoetis | 6100701 | Инъекционный 50 мг/мл |
| Аппарат искусственной вентиляции легких для мелких животных | Kent Scientific | RoVent Jr. | |
| Регулятор температуры | Physitemp | TCAT-2DF | |
| Тройной антибиорик и обезболивающий | CVS | NDC 59770-823-56 | |
| Испаритель | RWD | R583S | |
| 0,25% бупивакаин | Hospira | NDC 0409-1159-18 | |
| 0,9% хрорид натрия | ICU Medical | NDC 0990-7983-03 | |
| 1 мл пластик шприц | BD | 309659 | |
| 4-0 шелковый шовный материал | Look | SP116 | Черный плетеный шелк |
| 6-0 нейлоновый шовный материал | Ethilon | 1698G | |
| 8,4% бикарбонат натрия Inj., USP | Hospira | NDC 0409-6625-02 | |
| 20 G Внутривенный катетер | BD | 381534 | 20GA 1,6 IN |
| 30 G Игла PrecisionGlide BD | 305106 | 30 Г X 1/2 |
Ссылки
- Smith, A., Masters, S., Ball, S., Finn, J. The incidence and outcomes of out-of-hospital cardiac arrest in metropolitan versus rural locations: A systematic review and meta-analysis. Resuscitation. 185, 109655(2022).
- Amacher, S. A., et al.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
