Summary
Hier wordt een methode gepresenteerd voor het verrijken en analyseren van de vluchtige componenten van thee-extracten met behulp van oplosmiddelondersteunde smaakverdamping en oplosmiddelextractie gevolgd door gaschromatografie-massaspectrometrie, die kan worden toegepast op alle soorten theemonsters.
Abstract
Theearoma is een belangrijke factor in de theekwaliteit, maar het is een uitdaging om te analyseren vanwege de complexiteit, lage concentratie, diversiteit en labiliteit van de vluchtige componenten van thee-extract. Deze studie presenteert een methode voor het verkrijgen en analyseren van de vluchtige componenten van thee-extract met geurbehoud met behulp van solvent-ondersteunde smaakverdamping (SAFE) en oplosmiddelextractie gevolgd door gaschromatografie-massaspectrometrie (GC-MS). SAFE is een hoogvacuümdestillatietechniek die vluchtige stoffen uit complexe voedselmatrices kan isoleren zonder enige niet-vluchtige interferentie. Een volledige stapsgewijze procedure voor theearoma-analyse wordt in dit artikel gepresenteerd, inclusief het thee-infusiepreparaat, oplosmiddelextractie, SAFE-destillatie, extractconcentratie en analyse door GC-MS. Deze procedure werd toegepast op twee theemonsters (groene thee en zwarte thee) en zowel kwalitatieve als kwantitatieve resultaten over de vluchtige samenstelling van de theemonsters werden verkregen. Deze methode kan niet alleen worden gebruikt voor de aroma-analyse van verschillende soorten theemonsters, maar ook voor moleculaire sensorische studies erop.
Introduction
Thee is een favoriete drank van veel mensen over de hele wereld 1,2. Het aroma van de thee is een kwaliteitscriterium en een prijsbepalende factor voor theebladeren 3,4. De analyse van de aromasamenstelling en het gehalte aan thee is dus van groot belang voor moleculaire sensorische studies en de kwaliteitscontrole van thee. Als gevolg hiervan is aromasamenstellingsanalyse de afgelopen jaren een belangrijk onderwerp geweest in theeonderzoek 5,6,7.
Het gehalte aan aromacomponenten in thee is erg laag, omdat ze over het algemeen slechts 0,01% -0,05% van het droge gewicht van de theebladeren uitmaken8. Bovendien interfereert de grote hoeveelheid niet-vluchtige componenten in de monstermatrix aanzienlijk met de analyse door gaschromatografie 9,10. Daarom is een monstervoorbereidingsprocedure essentieel om de vluchtige stoffen in thee te isoleren. De belangrijkste overweging voor de isolatie- en verrijkingsmethode is het minimaliseren van de matrixinterferentie en tegelijkertijd het maximaliseren van het behoud van het oorspronkelijke geurprofiel van het monster.
Oplosmiddelondersteunde smaakverdamping (SAFE), oorspronkelijk ontwikkeld door Engel, Bahr en Schieberle, is een verbeterde hoogvacuümdestillatietechniek die wordt gebruikt om vluchtige stoffen te isoleren uit complexe voedselmatrixen11,12. Een compacte glazen assemblage aangesloten op een hoogvacuümpomp (onder een typische bedrijfsdruk van 5 x 10−3 Pa) kan efficiënt vluchtige stoffen verzamelen uit oplosmiddelextracten, oliehoudende voedingsmiddelen en waterige monsters.
Dit artikel beschreef een methode die de SAFE-techniek combineert met oplosmiddelextractie om vluchtige stoffen uit een zwarte thee-infusie te isoleren, gevolgd door analyse met GC-MS.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Bereiding van de interne standaard en thee-infusie
- Stamoplossing: Los 10,0 mg paraxyleen-d10 (zie materiaaltabel) op in 10,0 ml watervrije ethanol om een stamoplossing van 1.000 ppm van de interne standaard te bereiden.
- Werkoplossing: Verdun 1 ml van de stamoplossing (stap 1.1) tot 100 ml met zuiver water om een werkoplossing van 10 ppm van de interne standaard te bereiden.
OPMERKING: De werkoplossing moet op dezelfde dag als de analyse worden bereid. - Doe 3 g theebladeren (zowel voor groene thee als zwarte thee, zie Materiaaltabel) in een erlenmeyer en voeg 150 ml kokend water toe. Dek de kolf af met een glazen stop.
- Filter na 5 minuten snel de thee-infusie door een zeef met 300 mazen.
- Was de gebruikte theebladeren twee keer met 30 ml water en combineer de wasoplossing met de thee-infusie.
- Koel de thee-infusie snel af tot kamertemperatuur in een ijswaterbad.
- Voeg 1,00 ml werkoplossing (stap 1.2) toe aan de thee-infusie en meng ze goed.
2. Destillatie van de thee-infusie door SAFE en vloeistof-vloeistofextractie van het destillaat
- Bereid de SAFE-montage voor volgens de onderstaande stappen.
- Installeer de SAFE-assemblage (figuur 1) en sluit de destillatiefles linksonder (figuur 1[3]) en de opvangfles rechtsonder aan (figuur 1[4]). Sluit de circulerende waterbuis aan de achterzijde van de SAFE-glasassemblage aan. Installeer de koudeval (figuur 1[5]) en sluit de buis aan op de vacuümpomp (zie materiaaltabel) rechtsboven in de glazen samenstelling.
OPMERKING: Controleer de aansluiting van de circulerende waterbuis; Zorg ervoor dat de inlaat aan de bovenkant komt en de uitlaat aan de onderkant. Gebruik gedeïoniseerd water voor de circulatie om te voorkomen dat de weegschaal de witte buis in de SAFE-assemblage blokkeert, wat zou resulteren in een slechte circulatie van het circulerende water en de uiteindelijke explosie van de SAFE-assemblage. De destillatiebodem (figuur 1[3]) kan worden geroerd door een roerstaaf om de verdamping van het monster te vergemakkelijken. - Stel de temperatuur van het circulerende water in op 50 °C en die van het waterbad voor de monsterkolf op 40 °C. Sluit de vacuümklep (figuur 1[2]).
- Installeer de SAFE-assemblage (figuur 1) en sluit de destillatiefles linksonder (figuur 1[3]) en de opvangfles rechtsonder aan (figuur 1[4]). Sluit de circulerende waterbuis aan de achterzijde van de SAFE-glasassemblage aan. Installeer de koudeval (figuur 1[5]) en sluit de buis aan op de vacuümpomp (zie materiaaltabel) rechtsboven in de glazen samenstelling.
- Voer de werking van de vacuümpomp uit.
- Schakel de vacuümpomp in.
- Verhoog de snelheid geleidelijk tot de maximale snelheid van 100%.
OPMERKING: Als de snelheid niet 100% bereikt, controleer dan of het systeem luchtdicht is en of er oplosmiddelresten in het systeem zitten. - Na het bereiken van een hoog vacuüm (bij voorkeur 10-3 Pa)
OPMERKING: Het vacuüm zal verbeteren wanneer de vloeibare stikstof aan de koudeval wordt toegevoegd.
- Voer de destillatie van het monster uit.
- Start de watercirculatie.
- Voeg vloeibare stikstof toe aan de koudeval om de buitenkant van de opvangfles te bedekken.
- Giet de thee-infusie in de monstertrechter linksboven (figuur 1[1]) en bedek deze vervolgens met een glazen stop.
- Breng het monster druppelsgewijs in de destillatiekolf. Controleer de druppelsnelheid van het monster zodat het vacuüm in het juiste bereik van ongeveer 10−3 Pa wordt gehouden.
OPMERKING: Voeg tijdens het proces vloeibare stikstof toe om ervoor te zorgen dat de juiste opvangfles altijd wordt ondergedompeld in vloeibare stikstof. Probeer condensaatvorming in de koudeval te voorkomen.
- Schakel de vacuümpomp uit nadat de destillatie is voltooid.
- Druk op de aan/uit-schakelaar . Wanneer "STOP" knippert, drukt u op de Enter-toets om te bevestigen.
- Koppel het netsnoer los wanneer de snelheid van de moleculaire pomp afneemt tot "0".
OPMERKING: Start alleen opnieuw op als de snelheid daalt tot "0".
- Herstel het systeem naar atmosferische druk.
- Verwijder de maalplug boven de bemonsteringsfles.
- Schroef de knop van de vacuümklep langzaam los om het systeem weer onder atmosferische druk te brengen.
- Haal de opvangfles met het monster naar beneden.
- Verwijder de vloeibare stikstof buiten de opvangfles nadat u het systeem hebt teruggewonnen tot atmosferische druk.
- Schroef de opvangfles langzaam los. Haal de opvangfles met het monster voorzichtig naar beneden.
- Sluit het circulerende water.
- Voer vloeistof-vloeistofextractie van het SAFE-destillaat uit.
- Laat het SAFE-destillaat in de fles opwarmen tot kamertemperatuur.
- Extraheer het SAFE-destillaat driemaal met 50 ml dichloormethaan (zie materiaaltabel).
- Combineer de dichloormethaanlagen. Droog het extract met watervrij natriumsulfaat (zie de materiaaltabel).
OPMERKING: Het watervrije natriumsulfaat in het oplosmiddel wordt als droog genoeg beschouwd wanneer het niet langer is gecementeerd en vrij kan stromen. - Concentreer het extract tot ongeveer 2 ml met behulp van een zachte stikstofstroom.
- Breng over in een monsterflacon van 1-2 ml en concentreer verder tot 200 μL met behulp van een zachte stikstofstroom.
3. GC-MS analyse en gegevensverwerking
- Analyseer de aromaconcentraten bereid in protocolsectie 2 met behulp van een GC-MS-systeem (figuur 2) uitgerust met gesmolten silica capillaire kolommen (zie de tabel met materialen).
- Gebruik helium als dragergas met een lineaire snelheid van 40 cm/s.
- Injecteer 3 μL van het concentraat in splitless injectiemodus.
- Stel het GC-oventemperatuurprogramma in: (1) houd het gedurende 5 minuten op 40 °C; (2) verhogen tot 200 °C bij 5 °C/min; (3) verhogen tot 280 °C bij 10 °C/min; (4) gedurende 10 minuten bij 280 °C houden.
- Gebruik de massaselectieve detector in positieve EI-modus13 met een massascanbereik van 30 m/z tot 350 m/z bij 70 eV.
- Deconvolueer de GC-MS-gegevens met behulp van het Automated Mass Spectral Deconvolution and Identification System (AMDIS, zie de materiaaltabel).
- Match en kwalificeer de gegevens na deconvolutie met behulp van het NIST (National Institute of Standards and Technology) 17 massaspectrometer zoekprogramma3.
- Bereken de retentie-index van de verbindingen14 op basis van het resultaat van een set n-alkanen (C5-C25, zie de tabel met materialen) onder dezelfde GC-omstandigheden.
- Identificeer de GC-pieken met behulp van de NIST-massaspectrometriebibliotheek en de retentie-indexdatabase op basis van de gelijktijdige matching van de massa- en retentie-indexen.
- Bereken de concentratie van elke vluchtige component in het SAFE-monster ten opzichte van de interne standaard met behulp van het TIC-piekgebied (total ion chromatography).
- Herhaal de analyse drie keer, te beginnen met de thee-infusiebereiding.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
De hierboven beschreven analyseprocedure wordt in deze sectie geïllustreerd aan de hand van het voorbeeld van de aromaanalyse van monsters van zwarte thee en groene thee.
Een representatief GC-MS chromatogram is weergegeven in figuur 3. Figuur 3A toont een verzameling n-alkanen en figuur 3B toont het profiel van een interne standaard. De evaluatieresultaten voor de extracten van de monsters van groene thee en zwarte thee zijn weergegeven in respectievelijk figuur 3C en figuur 3D. Door de interne standaarden te analyseren, kan één definitieve piek met een stabiele basislijn worden gedetecteerd (figuur 3B). Het GC-chromatogram toont de volledige GC-profielen verkregen uit de groene thee en zwarte thee infusie-extracten na de totale ionentelling.
Een totaal van 104 aromaverbindingen werden geïdentificeerd in de groene thee en zwarte thee monsters door massaspectrometrie matching in combinatie met de retentie-index. De relatieve kwantificering werd berekend door het piekoppervlak van de verbinding ten opzichte van de interne standaard. De heatmap, getekend op basis van de kwalitatieve en kwantitatieve resultaten, toont de gehalten aan aromaverbindingen ten opzichte van de interne standaard voor de monsters van groene thee en zwarte thee (figuur 4).
Figuur 1: Schematisch schema van het SAFE-systeem. (1) De monsterfles voor de monsterverzameling. (2) De vacuümklep; Het systeem moet gesloten worden gehouden voordat monsters worden toegevoegd en de druppelstroom van het monster moet op passende wijze worden afgesteld. (3) De distillatiefles voor de monsterdistillatie. (4) De opvangfles voor het verzamelen van het gedistilleerde monster. (5) De koudevanger voor de terugwinning van monsters die niet door de opvangfles zijn verzameld en om te voorkomen dat het oplosmiddel in de vacuümpomp terechtkomt. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2: Schematisch diagram van het GC-MSD systeem. Het GC/MS-systeem is uitgerust met (1) een multi-mode injectiepoort, (2) een flow control module (PCM) die de heliumdragerstroom regelt, (3) een capillaire kolom van 60 m x 0,25 m x 0,25 m 5 ms en (4) een GC-kolomoven. De thee-extracten in het geïnjecteerde monster worden gescheiden in de GC-kolom, waardoor het dragergas stroomt en de oventemperatuur stijgt. De componenten worden geïoniseerd door een EI-ionenbron en vervolgens geanalyseerd in een massaanalysator. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3: Typisch totaal ionchromatogram van een succesvolle GC-MS analyse . (A) Het chromatogram van de n-alkanen. Alle n-alkaanpieken worden toegewezen aan het overeenkomstige koolstofgetal. (B) Het chromatogram van de interne standaard (paraxyleen-d10). (C) Representatief aromaprofiel van de groene thee-infusie. (D) Representatief aromaprofiel van de infusie van zwarte thee. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 4: Heatmap van 104 aromaverbindingen geïdentificeerd in de monsters zwarte thee (BT) en groene thee (GT). Het getal naast de kleurennotitie aan de rechterkant van de heatmap geeft de inhoud van de verbinding aan (ten opzichte van de interne standaard). De kleurdiepte geeft het niveau van het materiegehalte aan; Hoe dieper de kleur, hoe hoger het relatieve gehalte. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dit artikel beschrijft een efficiënte methode voor het analyseren van vluchtige stoffen in thee-infusies met behulp van SAFE- en GC-MS-analyse.
Thee-infusies hebben een complexe matrix met een hoog gehalte aan niet-vluchtige componenten. In de literatuur zijn verschillende methoden beschreven voor het isoleren van de vluchtige componenten uit thee-infusies. Een veelgebruikte methode is gelijktijdige destillatie-extractie (SDE)15,16. Het is echter niet geschikt voor de analyse van theearoma's omdat de theebladeren gedurende het hele destillatie- / extractieproces met water moeten worden gekookt, wat ertoe leidt dat de theecomponenten een chemische reactie ondergaan en dus een geurprofiel opleveren dat sterk verschilt van het oorspronkelijke monster17. SAFE destilleert de thee-infusie bij een lage temperatuur onder een hoog vacuüm, waardoor veranderingen in de analyten worden geminimaliseerd en de oorspronkelijke aromasamenstelling behouden blijft.
Solid-phase microextraction (SPME) is een andere methode die vaak wordt gebruikt voor de aroma-analyse van thee18,19. De voordelen liggen in de eenvoudige en oplosmiddelvrije procedure. De selectiviteit van de vezeladsorptie van de aromacomponenten maakt het echter moeilijk om een kwantitatief profiel te verkrijgen dat de aromakenmerken van het monster weerspiegelt, wat de toepassing van deze methode voor theearoma-analyse beperkt20.
De high-vacuum transfer (HVT) techniek is ontwikkeld om de kans op vorming van artefacten in aromaanalyses te verkleinen21. HVT heeft echter een lage extractieopbrengst voor stoffen met een hoog kookpunt en een sterke polariteit, wat het toepassingsgebied beperkt.
In tegenstelling tot de bovenstaande aangepaste methoden, is het SAFE-destillaat van een thee-infusie vrij van niet-vluchtige componenten22,23,24. Het aroma in het destillaat kan kwantitatief worden geëxtraheerd met behulp van organische oplosmiddelen, wat betekent dat een extract met een geurprofiel dat dicht bij het oorspronkelijke monster ligt, kan worden verkregen. Engel et al.11 distilleerden mengsels van n-alkanen met behulp van HVT of SAFE-destillatie om de efficiëntie te controleren. De destillaatopbrengsten met behulp van het SAFE-systeem bleken significant hoger te zijn dan die van HVT voor elk alkaan. Bovendien kunnen alkanen met kookpunten onder 285 °C volledig worden teruggewonnen door SAFE.
Er moet veel aandacht worden besteed aan de experimentele details voor verdere succesvolle analyses. (1) De vacuümdruk tijdens de SAFE-destillatie kan van invloed zijn op de terugwinning van de vluchtige bestanddelen en moet op een hoog niveau worden gehouden, bijvoorbeeld door de toevoeging van het monster te vertragen. (2) Er moet voor worden gezorgd dat de opvangfles in vloeibare stikstof wordt ondergedompeld voordat het systeem weer onder atmosferische druk komt om te voorkomen dat vluchtige oplosmiddelen door de koudeval rechtsboven worden gecondenseerd of in de vacuümpomp terechtkomen. (3) Men moet ervoor zorgen dat het circulerende water als eerste wordt ingeschakeld en als laatste wordt uitgeschakeld. Het circulerende water mag pas worden uitgeschakeld nadat de vloeibare stikstof is verwijderd; anders zal het apparaat bevriezen. (4) Het waterbad moet worden geroerd met een magneet om de warmteoverdracht te bevorderen.
In deze studie werd SAFE-destillatie uitgevoerd vóór de oplosmiddelextractie. Een omgekeerde procedure is ook mogelijk, en dit zou vooral voordelig zijn als eerst een groot volume thee-infusie wordt geëxtraheerd en het verkregen extract vervolgens door SAFE wordt gedestilleerd. De uitdaging van infusie-extractie met behulp van een organisch oplosmiddel is de mogelijke vorming van een emulsie. In dit geval zijn extra stappen nodig om de organische laag terug te winnen, zoals centrifugeren of het kiezen van verschillende oplosmiddelen. Na het experiment moet de SAFE-glasassemblage worden gereinigd. Ethanol of aceton kan worden gebruikt als reinigingsmiddel. De onderdelen moeten voor gebruik worden gedroogd.
Samenvattend stelt dit protocol een methode voor om een aromaconcentraat te verkrijgen met een geurprofiel dat dicht bij het oorspronkelijke theemonster ligt met behulp van SAFE-destillatie gevolgd door oplosmiddelextractie. Deze methode kan worden toegepast op alle soorten theemonsters, waaronder bijvoorbeeld instant theepoeders en theeconcentraten, en is zeer geschikt voor moleculaire sensorische studies van thee.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben niets te onthullen.
Acknowledgments
Dit onderzoek werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (32002094, 32102444), het China Agriculture Research System van MOF en MARA (CARS-19) en het Innovation Project for Chinese Academy of Agricultural Sciences (CAAS-ASTIP-TRI).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Alkane mix (C10-C25) | ANPEL | CDAA-M-690035 | |
| Alkane mix (C5-C10) | ANPEL | CDAA-M-690037 | |
| AMDIS | National Institute of Standards and Technology | version 2.72 | Gaithersburg, MD |
| Analytical balance | OHAUS | EX125DH | |
| Anhydrous ethanol | Sinopharm | ||
| Anhydrous sodium sulfate | aladdin | ||
| Black tea | Qianhe Tea | Huangshan, Anhui province, China | |
| Concentrator | Biotage | TurboVap | |
| Data processor | Agilent | MassHunter | |
| Dichloromethane | TEDIA | ||
| GC | Agilent | 7890B | |
| GC column | Agilent | DB-5MS | |
| Green tea | Qianhe Tea | Huangshan, Anhui province, China | |
| MS | Agilent | 5977B | |
| p-Xylene-d10 | Sigma-Aldrich | ||
| SAFE | Glasbläserei Bahr | ||
| Ultra-pure deionized water | Milipore | Milli-Q | |
| Vacuum pump | Edwards | T-Station 85H |
References
- Liang, S., et al. Processing technologies for manufacturing tea beverages: From traditional to advanced hybrid processes. Trends in Food Science & Technology. 118, 431-446 (2021).
- Guo, X. Y., Ho, C. T., Schwab, W., Wan, X. C. Aroma profiles of green tea made with fresh tea leaves plucked in summer). Food Chemistry. 363, 130328 (2021).
- Feng, Z. H., Li, M., Li, Y. F., Wan, X. C., Yang, X. G. Characterization of the orchid-like aroma contributors in selected premium tea leaves. Food Research International. 129, 108841 (2020).
- Hong, X., et al. Characterization of the key aroma compounds in different aroma types of Chinese yellow tea. Foods. 12 (1), 27 (2023).
- Flaig, M., Qi, S. C., Wei, G., Yang, X., Schieberle, P. Characterisation of the key aroma compounds in aLongjinggreen tea infusion (Camellia sinensis) by the sensomics approach and their quantitative changes during processing of the tea leaves. European Food Research and Technology. 246 (12), 2411-2425 (2020).
- Feng, Z., et al. Tea aroma formation from six model manufacturing processes. Food Chemistry. 285, 347-354 (2019).
- Wang, J. -Q., et al. Effects of baking treatment on the sensory quality and physicochemical properties of green tea with different processing methods. Food Chemistry. 380, 132217 (2022).
- Zhai, X., Zhang, L., Granvogl, M., Ho, C. -T., Wan, X. Flavor of tea (Camellia sinensis): A review on odorants and analytical techniques. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 21 (5), 3867-3909 (2022).
- Chaturvedula, V. S. P., Prakash, I. The aroma, taste, color and bioactive constituents of tea. Journal of Medicinal Plants Research. 5 (11), 2110-2124 (2011).
- Ridgway, K., Lalljie, S. P. D., Smith, R. M. Sample preparation techniques for the determination of trace residues and contaminants in foods. Journal of Chromatography A. 1153 (1-2), 36-53 (2007).
- Engel, W., Bahr, W., Schieberle, P. Solvent assisted flavour evaporation - A new and versatile technique for the careful and direct isolation of aroma compounds from complex food matrices. European Food Research and Technology. 209 (3-4), 237-241 (1999).
- Wang, B., et al. Characterization of aroma compounds of Pu-erh ripen tea using solvent assisted flavor evaporation coupled with gas chromatography-mass spectrometry and gas chromatography-olfactometry. Food Science and Human Wellness. 11 (3), 618-626 (2022).
- Zou, C., et al. Zijuan tea- based kombucha: Physicochemical, sensorial, and antioxidant profile. Food Chemistry. 363, 130322 (2021).
- Vandendool, H., Kratz, P. D. A generalization of the retention index system including linear temperature programmed gas-liquid partition chromatography. Journal of Chromatography. 11, 463-471 (1963).
- Khvalbota, L., Virba, M., Furdikova, K., Spanik, I. Simultaneous distillation-solvent extraction gas chromatography-mass spectrometry analysis of Tokaj Muscat Yellow wines. Separation Science Plus. 5 (8), 393-406 (2022).
- Ayalew, Y., et al. Volatile organic compounds of anchote tuber and leaf extracted using simultaneous steam distillation and solvent extraction. International Journal of Food Science. 2022, 3265488 (2022).
- Zhu, M., Li, E., He, H. Determination of volatile chemical constitutes in tea by simultaneous distillation extraction, vacuum hydrodistillation and thermal desorption. Chromatographia. 68 (7-8), 603-610 (2008).
- Lau, H., et al. Characterising volatiles in tea (Camellia sinensis). Part I: Comparison of headspace-solid phase microextraction and solvent assisted flavour evaporation. Lwt-Food Science and Technology. 94, 178-189 (2018).
- Li, Z. W., Wang, J. H. Analysis of volatile aroma compounds from five types of Fenghuang Dancong tea using headspace-solid phase microextraction combined with GC-MS and GC-olfactometry. International Food Research Journal. 28 (3), 612-626 (2021).
- Dong, F., et al. Herbivore-induced volatiles from tea (Camellia sinensis) plants and their involvement in intraplant communication and changes in endogenous nonvolatile metabolites. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 59 (24), 13131-13135 (2011).
- Acena, L., Vera, L., Guasch, J., Busto, O., Mestres, M. Comparative study of two extraction techniques to obtain representative aroma extracts for being analysed by gas chromatography-olfactometry: Application to roasted pistachio aroma. Journal of Chromatography A. 1217 (49), 7781-7787 (2010).
- Kumazawa, K., Wada, Y., Masuda, H. Characterization of epoxydecenal isomers as potent odorants in black tea (Dimbula) infusion. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 54 (13), 4795-4801 (2006).
- Wu, H. T., et al. Effects of three different withering treatments on the aroma of white tea. Foods. 11 (16), 2502 (2022).
- Wang, J., et al. Decoding the specific roasty aroma Wuyi rock tea (Camellia sinensis: Dahongpao) by the sensomics approach. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 70 (34), 10571-10583 (2022).
