זה וידאו פרוטוקול להדגים כיצד השתל מכוסה זכוכית חלון גולגולתי במכרסמים. תכשירים אלה יכולים לשמש כרונית in vivo שני הפוטונים הדמיה של הניאוקורטקס על סולמות זמן של חודשים. זה יכול לשמש גם עבור סוגים אחרים של הדמיה, כולל הדמיה אופטית אות מהותי.
Abstract
טכניקות ההדמיה נעשים יותר ויותר חשוב בתפקוד המוח במחקר. ביניהם, שני הפוטונים מיקרוסקופ סורק לייזר התפתחה שיטה שימושית מאוד, משום שהיא מאפשרת את המחקר של המוח שלמים לחיות. עם ההכנות המתאימות, טכניקה זו מאפשרת תצפית באזור קליפת המוח באותו כרוניים, מ דקות עד חודשים. בסרטון הזה, אנו מראים הכנה כרונית בתחום ההדמיה vivo של המוח באמצעות שני פוטונים במיקרוסקופ. טכניקה זו היה בתחילה חלוץ ידי דר 'קארל סוובודה, כיום הווארד יוז רפואי חוקר במכון Janelia משק חקלאי. תכשירים כמו זה המוצג כאן יכול לשמש הדמיה של המבנה neocortical (למשל, הדינמיקה הדנדריטים axonal), להקליט הפעילות העצבית באמצעות סידן רגיש צבעים, אל קליפת המוח תמונה הדינמיקה זרימת הדם, או מהותי לימודי הדמיה אופטית. הדמיה של דיפ הניאוקורטקס אפשרי עם אופטימלית ניתוחים חלון גולגולתי. הפעלה בתנאים סטריליים ביותר האפשרית כדי למנוע זיהומים, יחד עם שימוש זהירות רבה, כדי לא לגרום נזק מאטר הדורה במהלך הניתוח, תגרום מכוסה זכוכית החלונות מוצלחת וארוכת טווח גולגולתי.
Protocol
הרדימי עכברים עם isoflurane (4% לזירוז, 1.5-2% לניתוח) באמצעות נהלים שאושרו IACUC. חשוב זנב ו / או צובט את הבוהן משמשים על מנת להבטיח את החיה הוא מסומם לגמרי. שימוש גוזם מכרסם, לגלח את השיער מהחלק האחורי של הצוואר עד העיניים. <li style=";text-align:rig…
Discussion
כפי שהראינו את הוידאו וגם את הדמויות משלים, הכנת חלון גולגולתי, בשילוב עם שימוש במיקרוסקופ שני הפוטונים, הוא כלי רב עוצמה מאוד ללמוד in vivo את המבנה והתפקוד של הניאוקורטקס. הטכניקה דורשת הכשרה קפדני להכיר את האנטומיה הרלוונטית ואת ניתוחים בסדר ומיומנויות כי זה דורש הכנה. רק ניתוחי…