Процедура Краниотомия хирургии при хроническом изображений мозга
Summary
Это видео и протоколом продемонстрировать, как имплантат застекленным окном черепа у грызунов. Эти препараты могут быть использованы при хронических в естественных условиях двухфотонного изображения новой коры на временных масштабах месяцев. Он также может быть использован и для других типов изображений, в том числе оптических внутренней визуализации сигнала.
Abstract
Методов визуализации становятся все более важными в исследовании функции мозга. Среди них, двухфотонного микроскопии лазерного сканирования возникла как чрезвычайно полезный метод, поскольку он позволяет изучать живой нетронутой мозга. При соответствующей подготовки, эта техника позволяет наблюдать же области коры хронически, от нескольких минут до нескольких месяцев. В этом видео мы покажем, подготовка к хроническим в естественных изображений мозга с помощью двухфотонной микроскопии. Этот метод был впервые удалось доктор Карел Свобода, который в настоящее время Медицинского института Говарда Хьюза следователя на Janelia Farm. Подготовка, как показано здесь, может использоваться для работы с изображениями из неокортекса структуры (например, дендритные и аксонального динамика), для записи нейронной активности с использованием кальций-чувствительной краски, изображения корковой динамики кровотока, или для собственного оптические исследования изображений. Глубокая изображений неокортекса можно с оптимальным черепной хирургии окна. Действуя под наиболее стерильных условиях возможное, чтобы избежать инфекции, наряду с использованием особой осторожностью, чтобы не повредить мозговой оболочки во время операции, приведет к успешной и длительной застекленным черепных окон.
Protocol
Discussion
Как было показано в видео и в дополнительных фигур, черепно подготовке окно, в сочетании с использованием двух-фотонной микроскопии, является очень мощным инструментом для изучения в естественных условиях структуры и функции коры головного мозга. Техника требует упорных тренировок, чтобы ознако…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Carprofen (Rimadyl) | Drug | Pfizer | ||
| Isoflurane (Aerrane) | Surgery | Baxter | ||
| Dexamethasone | Drug | Baxter | ||
| Ortho-Jet Powder | Reagent | LANG | To be mixed with the acrylic | |
| Jet-Acrylic Liquid | Reagent | LANG | To be mixed with Ortho-Jet Powder | |
| Round Glass Cover Slip | Tool | Electron Microscopy Sciences | 72195-05 | 5 mm diameter |
| Gelfoam | Surgery | Pharmacia & Upjohn Co. (Pfizer) |
References
- Svoboda, K., Denk, W., Kleinfeld, D., Tank, D. W. In vivo dendritic calcium dynamics in neocortical pyramidal neurons. Nature. 85, 161-165 (1997).
- Lendvai, B., Stern, E. A., Chen, B., Svoboda, K. Experience-dependent plasticity of dendritic spines in the developing rat barrel cortex in vivo. Nature. 404, 876-881 (2000).
- Trachtenberg, J. T., Chen, B., Knott, G. W., Feng, G., Sanes, J. R., Welker, E., Svoboda, K. Long-term in vivo imaging of experience-dependent synaptic plasticity in adult cortex. Nature. 420, 788-794 (2002).
- Portera-Cailliau, C., Weimer, R. M., DePaola, V., Caroni, P., Svoboda, K. Diverse modes of axon elaboration in the developing neocortex. PLoS Biol. 3, (2005).
- Holtmaat, A., Wilbrecht, L., Knott, G. W., Welker, E., Svoboda, K. Experience-dependent and cell-type-specific spine growth in the neocortex. Nature. 441, 979-983 (2006).
