एक luciferase आधारित रिपोर्टर जीन परख के साथ झिल्ली biogenesis अध्ययन

Summary

यहाँ, हम एक luciferase आधारित रिपोर्टर जीन Promega से दोहरे GloTM luciferase परख प्रणाली का उपयोग कर दृष्टिकोण के साथ phagocytosis प्रेरित जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए प्रक्रियाओं का वर्णन.

Abstract

यह झिल्ली biogenesis के दौरान अलग लिपिड संश्लेषण रास्ते के समन्वय का अध्ययन जहां झिल्ली biogenesis तेजी से और एक inducible तरीके से होता है एक प्रायोगिक प्रणाली के साथ काम करने के लिए उपयोगी है. हमने पाया है कि लेटेक्स मोतियों की phagocytosis इन प्रयोजनों के लिए व्यावहारिक है के रूप में कोशिकाओं के तेजी से झिल्ली लिपिड synthesize झिल्ली कण engulfment के दौरान सामग्री लपेटन के रूप में खो पूल भरने. यहाँ, हम एक luciferase आधारित रिपोर्टर जीन Promega से दोहरे Glo luciferase परख प्रणाली का उपयोग कर दृष्टिकोण के साथ phagocytosis प्रेरित जीन अभिव्यक्ति में परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए प्रक्रियाओं का वर्णन.

Protocol

सेल संस्कृति मानव भ्रूण 293 गुर्दे (HEK293) कोशिकाओं के स्टॉक संस्कृतियों 10-सेमी संस्कृति व्यंजन में 'मध्यम एक', है Dulbecco संशोधित है ईगल (DMEM) मध्यम एंटीबायोटिक दवाओं के एक कॉकटेल (एक प्रकार की दवा की मिलीलीट…