Drosophila ( Drosophila ) Conditionnement de la cour : une méthode pour tester l’apprentissage et la mémoire chez les mouches

-Tout d’abord, isoler les mâles naïfs, ou non, drosophiles melanogastor. Puis, pour conditionner les mâles, ajouter une femelle qui s’est déjà accouplé, et qui n’est donc pas réceptive à la cour. Le mâle affiche des comportements de cour typiques tels que s’orienter vers elle, la suivre, la tapoter avec une pattes antérieures, et étendre et faire vibrer son aile pour produire la chanson de cour. Il peut aussi tenter de lécher et de s’accoupler. Peu importe les efforts, la femelle reste non réceptive, et le mâle éprouve un rejet. Ainsi, il apprend à ne pas courtiser une femelle précédemment accouplé.

Pour tester la mémoire du mâle, lui permettre de se reposer, puis l’exposer à une autre femelle aérée. Le mâle entraîné ne tentera pas de courtiser cette mouche parce qu’il garde le souvenir du rejet passé. Dans le protocole de l’exemple, nous verrons comment les mouches sont manipulées pendant les phases d’entraînement et d’essai d’un essai de conditionnement de cour pour l’évaluation de la mémoire à court et à long terme.

- Commencez par anesthésier tous les adultes à partir des dossiers d’accouplement vieux de quatre jours. Séparez les sexes et transférez les femelles prématées individuelles dans chacun des 12 puits d’une rangée d’un bloc d’habitation. Puis, à l’aide d’un aspirateur et d’aucune anesthésie, retirez les mâles naïfs de leurs puits d’origine et transférez-les dans les puits contenant les femelles prématées. Répétez ce processus dans la deuxième rangée pour mettre en place 12 paires de plus.

Pour tester l’apprentissage ou la mémoire à court terme, effectuez cette configuration à l’aube, et laissez la période d’entraînement aller pendant une heure. Pour tester la mémoire à long terme, configurer les paires quatre heures avant l’aube subjective, et laisser la formation continuer pendant huit heures.

- Pour que l’apprentissage et la mémoire soient établis, il est important que les mâles ne copulent pas, si périodiquement vérifier les paires pendant la période d’entraînement, pour s’assurer que les mâles sont rejetés.

Lorsque la période d’entraînement est terminée, retirez doucement les mâles des puits à l’aide d’un aspirateur, et non d’une anesthésie au dioxyde de carbone. Chargez les mâles dans un nouveau bloc de logement. Pour l’expérience d’apprentissage, testez immédiatement les mâles après l’entraînement, sans période de repos. Pour l’expérience de mémoire à court terme, prévoyez aux mâles une heure de repos avant de commencer l’étape d’essai. Pour l’expérience de mémoire à long terme, reposez les mâles jusqu’à l’aube subjective suivante.

Pour se préparer à l’étape d’essai de l’expérience, anesthésier les femelles prématées et les transférer à une nouvelle vile alimentaire normale. Prévoyez au moins une heure pour que les mouches se remettent de l’anesthésie. Ensuite, préparez la configuration des tests. Assurez-vous d’avoir les enregistreurs vidéo prêts à enregistrer l’activité dans les arènes de cour.

Pour commencer le test, utilisez l’aspiration douce pour transférer un mâle d’essai du bloc de logement à l’arène de cour avec les diviseurs fermés. Déplacez les trous d’entrée entre les arénas jusqu’à ce que les 18 arénas soient chargés d’hommes célibataires. Ensuite, en utilisant la même technique, transférez les femelles prématées individuelles à chacune des 18 arènes, mais de l’autre côté des séparateurs. Maintenant, retournez soigneusement l’arène de cour et placez-la sous la caméra vidéo avec les ouvertures du puits vers la surface du banc blanc. Ensuite, retirez les diviseurs et commencez l’enregistrement vidéo. Enregistrez au moins 10 minutes d’activité. Lorsque l’expérience est terminée, retirez les mouches des arènes à l’aide d’un vide et ventilez les chambres de cour pendant au moins 10 minutes avant qu’elles ne soient réutilisées.