Drosophila Kur Şartlandırma: Sineklerde Öğrenme ve Hafızayı Test Etmek İçin Bir Yöntem

-İlk olarak, tek naif veya unmated, Drosophila melanogastor erkekleri izole edin. Sonra, erkekleri koşullendirmek için, zaten çiftleşmiş bir dişi ekleyin, ve bu nedenle kur yapmaya açık değildir. Erkek, ona yönelmek, onu takip etmek, bir foreleg ile dokunmak ve kur şarkısını üretmek için kanadını uzatmak ve titreştirmek gibi tipik kur davranışları sergiler. Ayrıca yalama ve çiftleşme girişiminde bulunabilir. Çabalar ne olursa olsun, kadın alıcı değildir ve erkek bir reddedilme yaşar. Böylece, daha önce çiftleşmemiş bir kadına kur yapmamayı öğrenir.

Erkeğin hafızasını test etmek için, dinlenmesine izin verin ve sonra onu başka bir çiftleştirilmiş kadına maruz bırakın. Eğitimli erkek, geçmişteki reddedilme anısını koruduğu için bu sineği mahkemeye vermeye çalışmayacak. Örnek protokolde, kısa ve uzun süreli hafıza değerlendirmesi için bir kur şartlandırma testinin eğitim ve test aşamalarında sineklerin nasıl ele alındığını göreceğiz.

- Dört günlük çiftleşme dosyalarından tüm yetişkinleri uyuşturarak başlayın. Cinsiyetleri ayırın ve tek premated dişileri bir konut bloğunun bir sırasının 12 kuyusunun her birine aktarın. Daha sonra, bir aspiratör ve anestezi kullanmadan, naif erkekleri ev kuyularından çıkarın ve önceden belirlenmiş dişileri içeren kuyulara aktarın. 12 çift daha kurmak için bu işlemi ikinci sırada tekrarlayın.

Öğrenmeyi veya kısa süreli belleği test etmek için, bu kurulumu şafakta gerçekleştirin ve eğitim süresinin bir saat boyunca geçmesine izin verin.

- Öğrenme ve hafızanın kurulabilmesi için, erkeklerin çiftleşememesi önemlidir, bu nedenle erkeklerin reddedildiklerinden emin olmak için eğitim süresi boyunca çiftleri periyodik olarak kontrol edin.

Eğitim süresi bittiğinde, karbondioksit anestezisi değil, bir aspiratör kullanarak erkekleri kuyulardan hafifçe çıkarın. Erkekleri yeni bir barınma bloğuna yükleyin. Öğrenme deneyi için, eğitimi takip eden erkekleri dinlenme süresi olmadan hemen test edin. Kısa süreli hafıza deneyi için, test aşamasına başlamadan önce erkeklere bir saat dinlenme verin. Uzun süreli hafıza deneyi için, erkekleri bir sonraki öznel şafağa kadar dinlendirin.

Deneyin test aşamasına hazırlanmak için, önceden belirlenmiş kadınları uyuşturun ve yeni bir normal gıda aşağılığına aktarın. Sineklerin anesteziden iyileşmesi için en az bir saat izin verin. Sonra, test kurulumunu hazırlayın.

Teste başlamak için, bir test erkeğini konut bloğundan bölücüler kapalı olarak kur arenasına aktarmak için nazik bir aspirasyon kullanın. 18 arenanın tümü tek erkeklerle yüklenene kadar arenalar arasındaki giriş deliklerini hareket ettinin. Daha sonra, aynı tekniği kullanarak, önceden belirlenmiş kadınları 18 arenanın her birine, ancak bölücülerin karşı tarafına aktarın. Şimdi, kur arenasını dikkatlice çevirin ve beyaz tezgah yüzeyine doğru kuyu açıklıkları olan video kameranın altına yerleştirin. Deney bittiğinde, sinekleri bir vakum kullanarak arenalardan çıkarın ve kur odalarını yeniden kullanılmadan önce en az 10 dakika havalandırın.