Drosophila Kurtisekondisjonering: En metode for å teste læring og minne i fluer

-Først isolerer du enslige naive, eller uovertrufne, Drosophila melanogastor menn. legg til en kvinne som allerede har parret seg, og derfor ikke er mottakelig for frieri. Hanen viser typisk frieriatferd som å orientere seg mot henne, følge henne rundt, banke henne med en foreleg, og utvide og vibrere vingen for å produsere frierisangen. Han kan også forsøke å slikke og parre. Uansett innsats forblir kvinnen ikke-mottakelig, og hannen opplever en avvisning.

For å teste mannens minne, la ham hvile, og deretter utsette ham for en annen parret kvinne. Den trente mannen vil ikke forsøke å kurtisere denne fluen fordi han beholder minnet om tidligere avvisning. I eksempelprotokollen vil vi se hvordan fluer håndteres under opplærings- og testfasen av en frieribetingsanalyse for kort- og langsiktig hukommelsesvurdering.

- Begynn med å bedøve alle de voksne fra de fire dager gamle parringsfilene. Skill kjønnene, og overfør enslige prematerte kvinner til hver av de 12 brønnene i en boligblokk. Deretter, ved hjelp av en aspirator og ingen anestesi, fjern de naive mennene fra hjemmebrønnene og overfør dem til brønnene som inneholder de prematerte kvinnene. Gjenta denne prosessen i andre rad for å sette opp 12 flere par.

For å teste læring eller korttidshukommelse, utfør dette oppsettet ved daggry, og la treningsperioden gå i en time. For å teste langtidshukommelse, sett opp parene fire timer før subjektiv daggry, og la treningen fortsette i åtte timer.

- For at læring og hukommelse skal etableres, er det viktig at hannene ikke kopulerer, så kontroller parene regelmessig i treningsperioden, for å sikre at mennene blir avvist.

Når treningsperioden er over, fjern forsiktig hannene fra brønnene ved hjelp av en aspirator, ikke karbondioksidbedøvelse. Last hannene inn i en ny boligblokk. For læringseksperimentet, test straks mennene etter treningen, uten hvileperiode. For det kortsiktige minneeksperimentet, la mennene en times hvile før du starter testfasen. For det langsiktige minneeksperimentet hviler du hannene til følgende subjektive daggry.

For å forberede seg på eksperimentets teststadium, bedøv prematiserte kvinner og overfør dem til en ny normal matsjofel. La minst en time for fluene komme seg fra anestesi. Deretter forbereder du testoppsettet. Sørg for å ha videoopptakerne klare til å registrere aktivitet på frieriarenaene.

For å starte testen, bruk mild ambisjon om å overføre en testhann fra boligblokken til frieriarenaen med skilleveggene stengt. Flytt inngangshullene mellom arenaene til alle de 18 arenaene er lastet med enslige hanner. Deretter, ved hjelp av samme teknikk, overfør individuelle prematerte kvinner til hver av de 18 arenaene, men til motsatt side av skilleveggene. Nå, vend forsiktig kurtisearenaen, og plasser den under videokameraet med brønnåpningene ned mot den hvite benkeflaten. Deretter fjerner du skilleveggene og starter videoopptaket. Når eksperimentet er over, fjern fluene fra arenaene ved hjelp av et vakuum og ventiler kurtisekamrene i minst 10 minutter før de gjenbrukes.