Fly Climbing Assay: een methode om algemene voortbeweging in Drosophila melanogaster te testen

-Zorg eerst voor een vast aantal volwassen Drosophila. De testkamer voor de klimtest bestaat uit twee flacons die aan elkaar zijn geplakt. Een van deze flacons moet worden gemarkeerd met een lijn.

Zonder koolstofdioxide anesthesie, die het klimgedrag kan aantasten, breng een vast aantal vliegen over naar de testkamer. Laat de vliegen zich een vooraf bepaalde tijd herstellen. Tik met de gemarkeerde kant van de kamer naar beneden stevig op de kamer op een muismat die op een stevig oppervlak is geplaatst. Dit zal de vliegen naar de bodem van de kamer dwingen. De klimtest maakt gebruik van de natuurlijke neiging van Drosophila om tegen de zwaartekracht omhoog te klimmen, een gedrag dat negatieve geotaxis wordt genoemd.

Tijdens het onderzoek mogen de vliegen niet worden blootgesteld aan direct zonlicht, omdat de vliegen fototaxisgedrag of beweging kunnen vertonen als reactie op lichtprikkels. Noteer het aantal vliegen dat de lijn bereikt of passeert. Verkrijg vervolgens het percentage passpercentage door dit aantal te delen door het totale aantal geteste vliegen. Laat de vliegen herstellen voordat ze de studie herhalen. In het voorbeeld zullen we een vliegenklimtest observeren die wordt gebruikt om de drosophila-motoriek na chemische mutagenese te beoordelen.

-Om te beginnen, verzamel homozygote vliegen van lijnen die behoren tot de ENU gemuteerde verzameling drosophila mutanten in kaart gebracht naar het tweede chromosoom. Draai de vliegen van 10 tot 12 dagen in een testkamer zonder anesthesie één lijn per keer en laat ze vijf minuten herstellen.

Met de lijn van vijf centimeter aan de zijkant naar beneden, tikt u drie keer met geweld op de kamer op een muismat die op een stevig oppervlak is geplaatst, zodat alle vliegen de test onderaan beginnen. Observeer de voortbeweging van vliegen gedurende een periode van 10 seconden. Noteer het aantal vliegen dat de lijn van vijf centimeter binnen deze tijd bereikt of passeert, evenals het totale aantal geteste vliegen. Wacht een minuut voordat u aan een tweede proef begint. Herhaal minimaal drie proefherlicaties per lijn.