Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- כדי להכין זחלים Drosophila לבדיקת חום, לאסוף בעלי חיים של השלב ההתפתחותי הרצוי, ולהעביר זחלים בודדים על צלחת מבחן עם סרט דק של מים. המים מאפשרים הזחלים לנוע בחופשיות מבלי לדבוק על פני השטח צלחת.
זחלי דרוזופילה מזהים גירויים תרמיים רעילים באמצעות נוירונים חושיים רב-דוריים באפידרמיס שלהם הידועים בשם nociceptors. אלה אינם יורים עד שיגיע סף חושי מסוים, כגון טמפרטורות גבוהות שעלולות להזיק.
הגדר את גשוש החום לטמפרטורה שתתגבר על הסף החושי הזה, ולגרום nociceptors לירות. בעדינות ללחוץ על קצה החללית נגד הזחל כדי להחיל חום. הזחל יגיב לטמפרטורה רעילה עם התנהגויות תרמו-nociceptive, נסיגה מהגשוש.
בפרוטוקול לדוגמה, נראה הדגמה של בדיקת חום מקומית על זחלי Drosophila כוכב שלישי מוקדם.
- ראשית, לקבוע מראש את הטמפרטורה של החללית התרמית לנקודת הסט הרצויה.
- על מנת למזער את השונות בלחץ, כמו גם כדי להבטיח את המיקום הנכון ואת הזווית של גשוש החום, בפועל עושה מושלם.
- בעדינות ללחוץ על קצה החללית נגד הזחל בקטע A4, הפעלת לחץ אור עם הקצה בערך זווית של 45 מעלות בין הגשוש לבין פני השטח של הזחל. הלחץ צריך לגרום כניסה קלה על פני השטח של הזחל, ובדרך כלל יהיה מספיק כדי למנוע תנועה.
זחלים מגיבים בדרך כלל מראים תחילה התנהגות ראשונית של הרמת הראש והזנב, ואחריו התנהגות הנסיגה של גלגול לפחות 360 מעלות.