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La producción de disulfuro estabilizados complejos transmembrana de péptidos de Estudios Estructurales
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Production of Disulfide-stabilized Transmembrane Peptide Complexes for Structural Studies
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La producción de disulfuro estabilizados complejos transmembrana de péptidos de Estudios Estructurales

DOI:
10.3791/50141-v

•

12:05 min

•

March 06, 2013

•

, , , , ,
1Structural Biology Division,The Walter and Eliza Hall Institute of Medical Research, 2The University of Melbourne

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:06Inclusion Body Preparation and Nickel Matrix Binding
  • 03:55On-column Oxidative Crosslinking
  • 04:50TFA Elution and Quantitation
  • 05:52CNBr Digestion
  • 07:54Reversed-phase HPLC Purification of Disulfide-crosslinked Peptide Complexes
  • 09:06TrpLE fusions: Transmembrane Peptide Complexes Expressed in Bacteria
  • 11:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

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Estudios biofísicos y bioquímicos de las interacciones entre los dominios de la proteína de membrana integrados se enfrentan a muchos desafíos técnicos, la primera de las cuales es la de conseguir material de estudio adecuado. En este artículo se describe un protocolo para producir y purificar estabilizadas por puentes disulfuro complejos de péptidos transmembrana que son adecuados para el análisis estructural por la solución de resonancia magnética nuclear (RMN) y otras aplicaciones analíticas.

Tags

Disulfide-stabilizedTransmembrane Peptide ComplexesStructural StudiesMembrane ProteinsTM DomainsTM SignalingTM Peptide ComplexesHomo-dimericHetero-dimericStable Isotope LabelsNMRNon-natural Amino AcidsDisulfide-crosslinkedDetergentLipidMembrane-mimetic

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