A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 02:06Inclusion Body Preparation and Nickel Matrix Binding
- 03:55On-column Oxidative Crosslinking
- 04:50TFA Elution and Quantitation
- 05:52CNBr Digestion
- 07:54Reversed-phase HPLC Purification of Disulfide-crosslinked Peptide Complexes
- 09:06TrpLE fusions: Transmembrane Peptide Complexes Expressed in Bacteria
- 11:19Conclusion
Biofysiske og biokjemiske studier av samspill mellom membran-innebygde protein domener står overfor mange tekniske utfordringer, hvorav den første er å skaffe riktig studie materiale. Denne artikkelen beskriver en protokoll for fremstilling og rensing av disulfid-stabiliserte transmembrane peptid komplekser som er egnet for strukturell analyse av oppløsning nukleær magnetisk resonans (NMR) og andre analytiske programmer.
