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DNA 결찰 반응
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Overview
분자 생물학에서, 결찰은 인포디스터 결합의 형성을 통해 2개의 DNA 단편의 결합을 말합니다. 리구아제로 알려진 효소는 결찰 반응을 촉매한다. 세포에서, 리갈은 DNA 복제 도중 생기는 단 하나 및 이중 가닥 나누기를 복구합니다. 실험실에서 DNA 리구슬은 분자 복제 중에 벡터와 삽입의 DNA 단편을 결합하는 데 사용됩니다 – 숙주 유기체에서 표적 단편을 복제할 담체 DNA 분자.
이 비디오는 DNA 결찰에 대한 소개를 제공합니다. 결찰의 기본 원리는 일반화된 결찰 반응을 설정하기 위한 단계별 절차뿐만 아니라 설명된다. 결찰 반응의 중요한 양상은 끈적끈적한 말돌출의 길이가 반응 온도에 어떻게 영향을 미치는지, DNA 삽입의 비율이 벡터에 대한 비율을 어떻게 조정해야 하는지와 같이 논의된다. 클레나우 단편 및 새우 알칼리인스파타제(SAP)와 같은 결찰을 지원하는 분자 도구가 언급되고, 근접 결찰 및 시퀀싱을 위한 조각에 링커를 추가하는 등의 응용 분야도 제시된다.
Procedure
결찰은 결합의 행위로 정의될 수 있고, 생물학에서 용어는 동월결합을 가진 2개의 생체 분자를 결합하는 효소 반응을 말합니다. 이 비디오는 분자 생물학 연구에서 DNA 결찰의 적용을 설명합니다. 세포에서 DNA 리거는 DNA 백본의 3′-하이드록실과 5’인산염 그룹 사이의 인포디스터 결합의 형성을 촉매하여 DNA에서 휴식부분을 식별하고 밀봉하는 효소입니다. 결찰은 DNA 복제와 …
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No conflicts of interest declared.
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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. DNA Ligation Reactions. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
