JoVE Science Education
Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Science Education Biology II: Mouse, Zebrafish, and Chick
In ovo Electroporation of Chicken Embryos
  • 00:00Overview
  • 00:46Basic Principles of Electroporation
  • 01:37Preparing for Electroporation
  • 03:58Performing the Electroporation
  • 04:45Applications
  • 06:21Summary

באובו אלקטרופורציה של עוברי עוף

English

Share

Overview

אלקטרופורציה היא טכניקה המשמשת במחקר ביו-רפואי המאפשרת מניפולציה של ביטוי גנים באמצעות אספקת חומר גנטי זר לתאים. ליתר דיוק, ב ovo electroporation מבוצע על אפרוחים מתפתחים מוקדם(גאלוס גאלוס ביתיות)הכלול בתוך קליפות הביצים שלהם. בהליך זה, DNA או מבנים נוקאאוט מוזרקים תחילה לתוך רקמת היעד. עם זאת, החומר הגנטי אינו מסוגל לחדור את קרום הפלזמה כדי לבצע את תפקידו בתוך התא. כדי לפתור בעיה זו, שדה חשמלי מוחל, גרימת שיבושים זמניים ליציבות הממברנה. שדה חשמלי זה גורם גם לחומצות הגרעין הטעונות השליליות לנדוד לכיוון האלקטרודה הטעונה באופן חיובי דרך החורים בקרום הפלזמה, ובכך למעשה מניע את ה- DNA או את מבנה ההפלה לתא. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא כי משלוח של חומר גנטי יכול להיות מקומי לסוגי תאים מבודדים בנקודות זמן התפתחותיות ספציפיות. כתוצאה מכך, ניתן לבחון את המנגנונים הגנטיים השולטים באירועים התפתחותיים בודדים.

וידאו זה מספק סקירה של העקרונות שמאחורי האלקטרופורציה של ovo ומציג את הכלים הדרושים לטכניקה, כולל מחטים נימיות, אלקטרודות ואלקטרופורטור. פרוטוקול שלב אחר שלב לביצוע ההליך מוצג גם לפני הדיון בכמה דוגמאות מרתקות לאופן שבו הטכניקה משמשת לביצוע מגוון מניפולציות גנטיות בעוברי תרנגולות.

Procedure

אלקטרופורציה היא טכניקה המשמשת להכנסת חומר גנטי זר לתאים. אלקטרופורציה של עוברים אפרוח בתוך הביצה, או אלקטרופורציה ovo, הוא כלי בעל ערך עבור ביולוגים התפתחותיים כי משלוח של חומר גנטי יכול להיות מקומי לרקמות ספציפיות ונקודות זמן התפתחותיות ספציפיות. וידאו זה יציג את העקרונות הבסיסיים ש…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. In ovo Electroporation of Chicken Embryos. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos