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Neuroscience
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Primary Neuronal Cultures
  • 00:00Overview
  • 01:07Tissue Sources for Preparing Primary Neuronal Cultures
  • 02:25Dissection
  • 03:10Dissociation
  • 04:19Plating and Maintenance
  • 06:02Applications
  • 08:06Summary

Primäre neuronale Kulturen

English

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Overview

Die Komplexität des Gehirns fordert häufig Neurowissenschaftlern, ein einfacheres System für experimentelle Manipulationen und Beobachtungen zu verwenden. Ein leistungsfähiger Ansatz ist die Entwicklung einer Primärkultur durch das Sezieren des Gewebes des Nervensystems, das Dissoziieren in einzelne Zellen und das Wachsen dieser Zellen in vitro. Primärkulturen machen Neuronen und Gliazellen leicht für die experimentellen Instrumente zugänglich, die für Techniken wie die genetische Manipulation und Zeitraffer-Aufnahmen erforderlich sind. Außerdem stellen diese Kulturen eine gut steuerbare Umgebung dar, in der komplexe Phänomene wie Zell-Zell-Interaktionen untersucht werden können.

Dieses Video gibt einen Überblick über die wichtigsten Schritte bei der Herstellung von primären neuronalen Kulturen, die die Auswahl und die Zerlegung des Gewebes von Interesse, den mechanischen und chemischen Abbau des Gewebes, um eine Einzelzellsuspension herzustellen, das Ausplattieren der Zellen und die Erhaltung der Kulturen in dem entsprechenden Medium bereitstellt. Mehrere Beispiel Experimente werden vorgestellt, um zu zeigen, wie Zellkulturen verwendet werden können, um den Proteintransport, die morphologischen Veränderungen und die Elektrophysiologie in lebenden Nervenzellen zu untersuchen.

Procedure

Das Gehirn ist eines der kompliziertesten Organe im Körper deswegen benötigen Neurowissenschaftler oft ein einfacheres System für experimentelle Manipulationen und Beobachtungen. Die Zellkultur ist ein solches System, das einen einfachen Zugang zu lebenden Nervenzellen ermöglicht. Im Allgemeinen umfasst die Kultivierung von Zellen das Wachsen der Zellen in speziellen Lösungen, die Kulturmedien genannt werden, in einem sterilen, kontrollierbaren Umfeld – in der Regel ein warmer Inkubator. Eine Primärkultur ist eine, d…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Primary Neuronal Cultures. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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