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Neuronal Transfection Methods
  • 00:00Overview
  • 00:49Principles of Transfection
  • 01:57Nucleofection
  • 03:07Gene Gun Transfection
  • 04:03Viral Transduction
  • 05:53Applications
  • 07:40Summary

Méthodes de transfection des neurones

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Overview

La transfection, le transfert de matériel génétique dans des cellules, est un outil précieux pour la manipulation rapide et efficace de l’expression des gènes dans les cellules. Puisque cette méthode peut être utilisée pour empêcher l’expression de protéines spécifiques ou pour induire l’expression de protéines étrangères ou modifiées, la transfection est un outil très utile dans l’étude de la cellule et des processus moléculaires qui régissent la fonction du neurone. Cependant, les neurones matures ont certaines propriétés qui les rendent difficiles à transfecter, c’est pourquoi des techniques spécialisées sont requises pour manipuler génétiquement ce type de cellules.

Cette vidéo passe en revue les principes et raisonnements sur lesquels repose la transfection de neurones. Trois stratégies classiques de transfection neuronale sont présentées, comprenant la nucléofection, le canon à ADN et la transduction virale. En plus de décrire comment chacune de ces techniques permet de surmonter les défis associés à la transfection de neurones, la présentation inclut une description du déroulement de chacune des trois méthodes. Enfin, plusieurs utilisations de transfection neuronale sont présentées, comme l’expression de protéines de tubuline fluorescentes pour visualiser la morphologie du neurone, et le silençage sélectif de gènes pour générer un modèle cellulaire de culture pour la maladie de Parkinson.

Procedure

La transfection, soit le transfert de matériel génétique dans des cellules de mammifères, est un outil précieux qui permet aux scientifiques de manipuler génétiquement les neurones et le tissu neuronal. Les propriétés uniques de ces cellules fragiles rendent la transfection difficile, d’où le besoin de techniques spécialisées. Cette vidéo passera en revue les principes de la transfection de neurones, et présentera des techniques couramment utilisées sur ces cellules, y compris la nucléofection, la transfe…

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No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Neuronal Transfection Methods. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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