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Neuronal Transfection Methods
  • 00:00Overview
  • 00:49Principles of Transfection
  • 01:57Nucleofection
  • 03:07Gene Gun Transfection
  • 04:03Viral Transduction
  • 05:53Applications
  • 07:40Summary

Métodos de Transfecção Neuronal

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Overview

A transfecção – o processo de transferência de material genético para as células – é uma ferramenta poderosa para a manipulação rápida e eficiente da expressão genética nas células. Como este método pode ser usado para silenciar a expressão de proteínas específicas ou para impulsionar a expressão de proteínas estrangeiras ou modificadas, a transfecção é uma ferramenta extremamente útil no estudo dos processos celulares e moleculares que regem a função dos neurônios. No entanto, neurônios maduros têm uma série de propriedades que os dificultam a transfecção, por isso técnicas especializadas são necessárias para a manipulação genética desse tipo celular.

Este vídeo revisa os princípios e a lógica por trás da transfecção dos neurônios. Três estratégias comuns para transfecção neuronal são discutidas, incluindo nucleofecção, arma genética e transdução viral. Além de descrever como cada uma dessas técnicas supera os desafios associados à transfecção de neurônios, a apresentação inclui uma descrição de como todos os três métodos são realizados. Finalmente, várias aplicações de transfecção neuronal são introduzidas, como a expressão de proteínas tubulinas fluorescentes para visualizar a morfologia do neurônio, e o silenciamento genético seletivo para gerar um modelo de cultura celular da doença de Parkinson.

Procedure

A transfecção – a transferência de material genético para células de mamíferos – é uma ferramenta valiosa que permite aos cientistas manipular geneticamente neurônios e tecido neuronal. As propriedades únicas das células delicadas tornam a transfecção desafiadora e necessitam de técnicas especializadas. Este vídeo revisará os princípios por trás da transfecção de neurônios e introduzirá estratégias comumente utilizadas nessas células, incluindo nucleofeipulação, transfecção biolística e …

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Neuronal Transfection Methods. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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