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Neuroscience
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Neuronal Transfection Methods
  • 00:00Overview
  • 00:49Principles of Transfection
  • 01:57Nucleofection
  • 03:07Gene Gun Transfection
  • 04:03Viral Transduction
  • 05:53Applications
  • 07:40Summary

Neuronale Transfektionsmethoden

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Overview

Transfektion – der Prozess der Übertragung von genetischem Material in Zellen – ist ein leistungsfähiges Instrument für die schnelle und effiziente Manipulation der Genexpression in Zellen. Da dieses Verfahren verwendet werden kann, um die Expression spezifischer Proteine zu verhindern oder die Expression von fremden oder modifizierten Proteinen anzutreiben, ist die Transfektion ein äußerst nützliches Instrument für die Untersuchung der zellulären und molekularen Prozesse, die die Neuronenfunktion regeln. Allerdings haben reife Nervenzellen eine Reihe von Eigenschaften, die es schwer machen sie zu transfizieren, deswegen sind spezialisierte Techniken zur genetischen Manipulation dieses Zelltyps erforderlich.

Dieses Video bespricht die Grundlagen und das Grundprinzip hinter der Transfektion von Neuronen. Drei allgemeine Strategien werden für die neuronale Transfektion diskutiert, darunter die Nukleofektion, die Genkanone und die virale Transduktion. Neben der Beschreibung, wie jedes dieser Verfahren die Probleme mit der Transfektion von Neuronen überwindet, umfasst die Präsentation eine Beschreibung, wie alle drei Verfahren durchgeführt werden. Schließlich werden mehrere Anwendungen der neuronalen Transfektion vorgestellt, wie die Expression der fluoreszierenden Tubulin Proteinen, um die Neuronenmorphologie zu visualisieren und selektives Gen-Silencing, um ein Zellkulturmodell der Parkinson-Krankheit zu erzeugen.

Procedure

Transfektion – die Übertragung von genetischem Material in Säugetierzellen – ist ein wertvolles Hilfsmittel, das den Wissenschaftlern ermöglicht, Neuronen und Nervengewebe genetisch zu manipulieren. Die einzigartigen Eigenschaften der empfindlichen Zellen machen die Transfektion anspruchsvoll und erfordern spezielle Techniken. Dieses Video bespricht die Grundlagen hinter der Transfektion von Neuronen und stellt Strategien vor, die häufig bei diesen Zellen verwendet werden, einschließlich der Nukleofektion, der biolist…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Neuronal Transfection Methods. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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