Journal
/
/
Thermostabilization والتعبير وتنقية، وتبلور من السيروتونين الناقل الإنسان ملزمة ل<em> S</em> -citalopram
JoVE Journal
Biochemistry
This content is Free Access.
JoVE Journal Biochemistry
Thermostabilization, Expression, Purification, and Crystallization of the Human Serotonin Transporter Bound to S-citalopram
DOI:

12:21 min

November 27, 2016

, ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:47Transfection of Adherent HEK293S GnTI-cells for Thermostability Screen
  • 02:24Scintillation Proximity-based Thermostability Screen with Citalopram
  • 04:18Expression of the Human Serotonin Transporter in HEK293S GnTI-cells
  • 05:24Affinity-purification of the Serotonin Transporter for Immunization and Crystallization
  • 07:12Formation of Transporter-antibody Complexes and Separation by Size-exclusion Chromatography
  • 08:21Crystallization of Transporter-antibody Complexes by Hanging Drop
  • 10:01Results: Thermostabilization and Crystallization of the Serotonin Transporter in an Antidepressant-bound State
  • 11:25Conclusion

Summary

Automatic Translation

توضح هذه المخطوطة كيفية كشف عن thermostabilizing الطفرات، وتنقية نقل السيروتونين البشري، وتوليد الأجسام المضادة تقارب عالية، وبلورة السيروتونين نقل الأجسام المضادة مجمع منضمة إلى اكتئاب المخدرات S -citalopram. ويمكن تكييف هذا البروتوكول لدراسة النقل الأخرى الصعبة الغشاء، المستقبلات، وقنوات.

Related Videos

Read Article