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Gleichzeitige Messung von HDAC1 und HDAC6 Tätigkeit in HeLa-Zellen mit UHPLC-MS
JoVE Journal
Chemistry
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JoVE Journal Chemistry
Simultaneous Measurement of HDAC1 and HDAC6 Activity in HeLa Cells Using UHPLC-MS
DOI:

09:20 min

August 10, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:20Cell Culture
  • 03:00Cell Treatment with Cell Compounds and HDAC Substrates, Cell Lysis, and Sample Preparation for UHPLC-ESI-MS/MS
  • 05:14UHPLC/MS-MS Analysis and Data Analysis
  • 06:14Results: Deacetylation of Specific Substrates by Endogenous HDACs and Potency of Standard HDAC Inhibitors
  • 08:18Conclusion

Summary

Automatic Translation

Das vorliegende Verfahren dient der Isoform-spezifische Inhibitoren der Histon Deacetylases (HDAC) in HeLa-Zellen durch die UHPLC-MS-Analyse von mehreren Substraten zu identifizieren. Dies ist ein Antikörper-freie Methode entwickelt, um HDAC1 und HDAC6 Tätigkeit im Wohnzimmer wiedergeben Zelle Umgebung, im Gegensatz zu Single-Isoform zellfreie Assays.

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