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CRISPR/Cas9 के लिए Integrase-कमी Lentiviral वैक्टर के उत्पादन के लिए एक प्रोटोकॉल-विभाजन कोशिकाओं में मध्यस्थता जीन नॉकआउट
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
A Protocol for the Production of Integrase-deficient Lentiviral Vectors for CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockout in Dividing Cells
DOI:

10:42 min

December 12, 2017

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:52Transfecting of HEK-293T Cells Using Calcium Phosphate
  • 02:19Harvesting Virus
  • 02:50Concentration of Viral Particles by Ultracentrifugation
  • 05:11Esimating of Viral Titers Using p24-enzyme-linked Immunosorbent Assay
  • 07:31Counting GFP-positive Cells
  • 08:25Results: Production and Validation of the Knockout-efficiency of Integrase-deficient Lentiviral-CRSPER/Cas9 Vector
  • 09:57Conclusion

Summary

Automatic Translation

हम कोशिकाओं को CRISPR/Cas9 पहुंचाने के लिए वाहनों के रूप में integrase की कमी lentiviral वैक्टर (IDLVs) की उत्पादन रणनीति का वर्णन । कोशिकाओं में त्वरित और मजबूत जीन संपादन मध्यस्थता करने की क्षमता के साथ, IDLVs integrase सक्षम वैक्टर की तुलना में जीन वितरण के लिए एक सुरक्षित और समान रूप से प्रभावी वेक्टर मंच मौजूद.

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