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Purification de protéine anaérobie et l’analyse cinétique via la sonde à oxygène pour l’étude de l’Inhibition et l’activité DesB Dioxygenase
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Anaerobic Protein Purification and Kinetic Analysis via Oxygen Electrode for Studying DesB Dioxygenase Activity and Inhibition
DOI:

08:31 min

October 03, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:33Anaerobic DesB Purification
  • 02:29Anaerobic Protein Concentration, Buffer Exchange, and DesB Desalting
  • 04:10Oxygen Electrode Preparation
  • 05:41Oxygen Electrode Kinetic Assay
  • 06:48Results: Representative DesB Dioxygenase Induction, Activity, and Inhibition
  • 07:50Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nous présentons ici un protocole pour la purification de protéine anaérobie, la concentration de protéines anaérobie et ultérieure caractérisation cinétique à l’aide d’un système d’électrodes de l’oxygène. La méthode est illustrée à l’aide de l’enzyme DesB, une enzyme dioxygénase qui est plus stable et plus active lorsque purifié et stockées dans un environnement anaérobie.

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